Cromatografía de Líquida de Alta Eficiencia High Performance Liquid Chromatography
Cromatografía de Líquida de Alta Eficiencia High Performance Liquid Chromatography
Cromatografía de Líquida de Alta Eficiencia High Performance Liquid Chromatography
Chromatography
Cromatografa de Particin.
Cromatografa de Adsorcin
Cromatografa Inica
Cromatografa de Exclusin
Caractersticas:
Disponible comercialmente
Precio
Pureza y Estabilidad. En la actualidad contamos con productos de calidad de
pureza cromatogrfica. Bajo contenido de impuresas.
Disolver la muestra
Misible con otros solventes para formar mezclas tiles
No degradar o disolver la fase estacionaria
Tener baja viscosidad para reducir las cadas de presin
Ser compatible con el detector utilizado. Transparencia ptica (cuando se usan
detectores UV)
En el instante que se abre una nueva botella de solvente para HPLC se expone
el interior del solvente a la atmsfera y empieza a acumular gases disueltos
que se encuentran en la atmsfera. El trasegado del solvente en el depsito
solvente y su almacenamiento en estos depsitos mseste fenmeno. El
Oxgeno Disuelto que constituye el 21% de la atmsfera puede producir mayor
interferencia en los detectores de fluorescencia y electroqumicos. El Nitrgeno
Disuelto es el otro componente de la atmsfera que puede producir burbujas
en la columna de HPLC y cuando el solvente entra al detector produce picos
falsos y desviaciones de la lnea base. El Dixido de Carbono disuelto algunas
veces puede ser la causa de los cambios de pH en el sistema de solvente.
Hay tres(3) mtodos comunes que se utilizan hoy para la filtracin previa de los
Solventes en HPLC :
Filtracin al Vaco
Filtracin en Lnea
Mtodos de Desgasificacin de Solventes en HPLC
Sonificacin
Burbujear Helio
Desgasificacin Electrnica en la Lnea del Flujo
Desgasificacin al Vaco en Lnea
Bombas
Mecnicas
Recprocantes
De desplazamiento contnuo
Neumticas
Isocrtico
Gradiente de Elucin. Es un trmino que se utiliza para describir el proceso
mendiante el cual se cambia la composicin de la fase mvil. Pueden
efectuarse de dos maneras:
A baja presin
A alta presin
Cuando se desarrolla un anlisis usando el mtodo de gradiente se debe tener
presente dos objetivos:
Tipos de Columna:
Deteccin
Derivatizacin
Pre-Columna
PostColumna
Presin Alta
Posible causa: Obstruccin de la Columna de HPLC o Guarda Columna por
partculas.
Solucin: Invierta la Columna y Enjuagar con solvente, teniendo la columna
desconectada del detector. Si sto no funciona reemplaze el fritado a la
entrada de la columna. Si la presin sigue alta reemplaze la columna.
Solucin a largo plazo: Asegurese que todas las fases mviles se filtren
apropiamente antes que entren a la bomba de HPLC . Tambin filtre todas las
muestras antes de inyectarlas.
Prdida de la Resolucin
Posible causa: Obstruccin de la Columna de HPLC del Guarda Columna por
partculas.
Solucin: vea la seccin de Presin Alta
Solucin a largo plazo: Filtrar todo antes que se introduzcan las fases mviles
en el sistema de HPLC.
Picos Hendidos
Estos son algunos consejos para adquirir un sistema de HPLC ajustado a sus
necesidades: