Medio de cultivo

Agar nutritivo

Fundamento: Medio de cultivo nutritivo no selectivo, en el cual la pluripeptona y el

extracto de carne constituyen la fuente de carbono, nitrgeno y aportan nutrientes
para el desarrollo bacteriano. El agregado de cloruro de sodio mantiene el balance
osmtico y el agar es el agente solidificante. Puede ser suplementado con sangre
ovina desfibrinada estril para favorecer el crecimiento de microorganismos
exigentes en sus requerimientos nutricionales y permite una clara visualizacin de
las reacciones de hemlisis.

Clasificacin: segn su estado fsico: solido. Segn su composicin: bsico.

Interpretacin: Hemlisis alfa: lisis parcial de los glbulos rojos. Se observa un

halo de color verdoso alrededor de la colonia en estudio. Es debido a la oxidacin
de la hemoglobina a metahemoglobina (compuesto de color verdoso) por el
perxido de hidrgeno generado por los microorganismos. Hemlisis beta: lisis
total de los glbulos rojos. Se observa un halo claro, brillante alrededor de la
colonia en estudio. Hemlisis gamma: ausencia de lisis de los glbulos rojos. El
medio de cultivo no presenta modificaciones de color y aspecto alrededor de la
colonia en estudio.

Tripticasa Soya Agar

Fundamento: La triptena y la peptona de soya aportan nutrientes ricos en

pptidos, aminocidos libres, bases pricas y pirimdicas, minerales y vitaminas.
La peptona de soya aporta tambin carbohidratos que estimulan el crecimiento de
muchos microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico.
Adicionado con 5-10 % sangre, se logra un medio enriquecido y adecuado para
observar reacciones de hemlisis.

Clasificacin: segn su utilizacin: Medio comn.

Interpretacin: Cualquier tipo de crecimiento en el agar tripticasa de soya se

evidenciar por la aparicin de colonias en el medio.

Agar SS (Salmonella Shigella Agar)

Fundamento: La selectividad, est dada por la sales biliares y el verde brillante,

que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas, de la mayora de los
coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp.
Es diferencial debido a la fermentacin de la lactosa, y a la formacin de cido
sulfhdrico a partir del tiosulfato de sodio.
Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de desarrollar,
acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de pH, obtenindose colonias
rosadas o rojas sobre un fondo rojizo.
Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa, crecen
bien en el medio de cultivo, y producen colonias transparentes.
La produccin de cido sulfhdrico se evidencia como colonias con centro negro
debido a la formacin de sulfuro de hierro.
Para aumentar la selectividad, se recomienda incubar previamente la muestra en
Selenito caldo (B02-120-05).

Clasificacin: Es un medio de cultivo selectivo y diferencial.

Interpretacin:

Microorganismos Colonias

Salmonella typhimurium ATCC 14028 Transparentes, centro negro

Shigella flexneri Incoloras

Shigella sonnei Incoloras

Proteus mirabilis ATCC 43071 Transparentes, centro negro

Escherichia coli ATCC 25922 Rosadas a rojas

Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Rosadas cremosas y mucosas

Enterococcus faecalis ATCC 29212 Incoloras, de muy escaso crecimiento

Caldo Triptona
Fundamento: Medio de cultivo no selectivo usado para evaluar recuentos
bacterianos por el mtodo de filtracin por membrana.

Clasificacin:

Medio lquido.

Interpretacin: La presencia de turbidez indica crecimiento.

Agar Baird Parker

Fundamento: En el medio de cultivo preparado y completo la peptona y el

extracto de carne constituyen la fuente de carbono y nitrgeno, el extracto de
levadura aporta vitaminas del complejo B, la glicina y el piruvato estimulan el
crecimiento de los estafilococos.

Clasificacin: Medio selectivo y diferencial.

Interpretacin: Bacterias que reducen el telurito de potasio: colonias de color

grisceo-negro. Bacterias que no reducen el telurito de potasio: colonias del
color del medio, transparentes. Bacterias con actividad lecitinsica: halo claro
en el medio de cultivo alrededor de la colonia. Puede existir tambin un halo opaco
alrededor de la colonia con un halo claro externo. Bacterias sin actividad
lecitinsica: ausencia de halo claro alrededor de la colonia.

Agar OGY

Fundamento: Un medio selectivo para la enumeracin de levaduras y mohos en

muestras alimenticias.

Clasificacin: Medio selectivo.

Interpretacin: Despus de la incubacin registrar el crecimiento de los

microorganismos. Las caractersticas tpicas a notar incluye: tamao de la colonia
y morfologa, pigmentacin, y hemolisis en medio que contenga sangre.

Caldo BHI

Fundamento: Es un medio muy rico en nutrientes, que proporciona un adecuado

desarrollo microbiano. La infusin de cerebro de ternera, la infusin de corazn
vacuno y la peptona, son la fuente de carbono, nitrgeno, y vitaminas. La glucosa
es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro de sodio mantiene el balance
osmtico y el fosfato disdico otorga capacidad buffer. El agar es el agente
solidificante.
El agar cerebro corazn mantiene los mismos principios que el caldo para el
cultivo de estreptococos y otras bacterias exigentes.

Clasificacin: Medio slido.

Interpretacin: crecimiento y multiplicacin bacteriana, apareciendo una colonia

por cada bacteria sembrada.

Microorganismos Crecimiento

Aspergillus niger Bueno

Neisseria meningitidis Bueno

Streptococcus pyogenes ATCC 19615 Bueno

Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 Bueno

Caldo bilis verde brillante (Brila)

Fundamento: En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios

para el adecuado desarrollo bacteriano, la bilis y el verde brillante son los agentes
selectivos que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas y Gram negativas
a excepcin de coliformes, y la lactosa es el hidrato de carbono fermentable.

Clasificacin: medio de multiplicacin.

Interpretacin: El crecimiento se evidencia por la presencia de turbidez en el

medio de cultivo. Positivo: turbidez y presencia de gas. Puede existir viraje del
color del medio de cultivo al color amarronado o amarillo. Negativo: ausencia de
turbidez y/o gas.

Agar EMB
Fundamento: Este medio combina las frmulas de Holt-Harris y Teague con la de
Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de
enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. La diferenciacin
entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son
incapaces de hacerlo, est dada por los indicadores eosina y azul de metileno;
stos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas. Muchas
cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. Presentan un caracterstico brillo
metlico. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia
azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras.

Clasificacin: Medio selectivo.

Interpretacin: Microorganismos fermentadores de lactosa y / o sacarosa:

colonias de color negro azulado o amarronado. Pueden tener centro oscuro y brillo
metlico. Microorganismos no fermentadores de lactosa y sacarosa: colonias del
color del medio, incoloras.

Agar SPS

Fundamento: SPS Agar se utiliza para la deteccin y enumeracin de Clostridium

perfringens en alimentos.

Clasificacin: Medio slido.

Interpretacin: Clostridium perfringens crecer como colonias negras con buen

crecimiento.

Agar cetrimide

Fundamento: Medio utilizado para el aislamiento selectivo de Pseudomonas

aeruginosa y de otras especies del gnero.

Clasificacin: Medio selectivo.

Interpretacin: Observar el crecimiento microbiano, las caractersticas de las

colonias y la produccin de pigmentos. La presencia de un color verde-azulado
corresponde a produccin de piocianina, mientras que un color verde corresponde
a la produccin de pioverdina y un color rosa claro, rojizo o marrn oscuro
corresponde a la produccin de piorrubina. Examinar las placas bajo luz
ultravioneta, ya que la produccin de fluorescena se observa de color amarillo
verdoso brillante que difunde en el agar a partir del crecimiento microbiano.
Caldo Asparagina

Fundamento: Agar utilizado para la determinacin de Pseudomonas aeruginosa

de recreacin agua y natural en cuanto a APHA.

Clasificacin: Medio slido.

Interpretacin: Caractersticas de la cultura despus de 20-24 horas a 35 c.

Los organismos (AATC) Pseudomonas aeruginosa crecimiento (27853)
abundante.

Agar sangre

Fundamento: La infusin de msculo de corazn y la peptona, otorgan al medio

un alto valor nutritivo, que permite el crecimiento de una gran variedad de
microorganismos, an de aquellos nutricionalmente exigentes.

Clasificacin: Medio slido.

Interpretacin: Hemlisis alfa: lisis parcial de los glbulos rojos. Se observa un

halo de color verdoso alrededor de la colonia en estudio. Es debido a la oxidacin
de la hemoglobina a metahemoglobina (compuesto de color verdoso) por el
perxido de hidrgeno generado por los microorganismos. Hemlisis beta: lisis
total de los glbulos rojos. Se observa un halo claro, brillante alrededor de la
colonia en estudio. Hemlisis gamma: ausencia de lisis de los glbulos rojos. El
medio de cultivo no presenta modificaciones de color y aspecto alrededor de la
colonia en estudio.

Agar Saboraud

Fundamento: Medio de cultivo recomendado para el aislamiento y desarrollo de

hongos, particularmente los asociados con infecciones cutneas (piel, pelo). En el
medio de cultivo, la peptona, la triptena y la glucosa son los nutrientes para el
desarrollo de microorganismos.

Clasificacin: Medio selectivo.

Interpretacin: Describir las caractersticas tpicas de las colonias y subcultivar en

medios apropiados para identificacin.
Agar Mueller Hinton

Fundamento: Medio de cultivo nutritivo no selectivo que promueve el desarrollo

microbiano. Por su composicin, ha sido recomendado por el Clinical and
Laboratory Standards Institute (CLSI) antiguamente llamado National Committee
for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), para ser utilizado en forma rutinaria en
la realizacin del antibiograma en medio slido.

Clasificacin: Medio solido o lquido.

Interpretacin: Los lotes de agar Mueller Hinton Britania cumplen con las normas
descriptas en el documento M6 - P del NCCLS: Evaluating production lots of
dehydrated Mueller Hinton agar. Esto es muy importante pues algunos lotes
pueden variar significativamente y si las bacterias no crecen adecuadamente, las
zonas de inhibicin en las pruebas de difusin son generalmente ms grandes,
quedan fuera de los lmites de control de calidad y pueden llevar a resultados
errneos.

Los medios que contienen cantidades excesivas de timidina o timina pueden

revertir el efecto inhibitorio de las sulfonamidas y trimetoprima, produciendo as
zonas de inhibicin ms pequeas y por lo tanto informes de falsa resistencia.

Agar Mac Conckey

Fundamento: En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes

necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono
fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes
selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva.

Clasificacin: Medio inhibidor.

Interpretacin: Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias rosadas-

rojizas. Puede observarse halo de precipitacin biliar. Microorganismos no
fermentadores de lactosa: colonias del color del medio, incoloras.

Agar chocolate

Fundamento: El medio de cultivo es ampliamente nutritivo por la presencia de

peptona, triptena, extracto de levadura, extracto de corazn y almidn.
Clasificacin: Medio enriquecido.

Interpretacin: Observar las caractersticas de las colonias.

Agar PDA

Fundamento: Son medios comunes de cultivo microbiolgico que se preparan a

partir de infusin de patata y dextrosa. El agar de patata y dextrosa es el medio
ms utilizado para el crecimiento de hongos y levaduras que atacan a las plantas
vivas o materia vegetal muerta en descomposicin.

Clasificacin: Medio comn.

Interpretacin: crecimiento de hongos.

Agar SIM

Fundamento: El triptfano es un aminocido constituyente de muchas peptonas,

y particularmente de la triptena, que puede ser oxidado por algunas bacterias
para formar indol. En el proceso interviene un conjunto de enzimas llamadas
triptofanasa. El indol producido se combina con el aldehdo del reactivo de Kovac
s o de Erlich, para originar un compuesto de color rojo. Las cepas mviles pueden
apreciarse en este medio, por la turbidez que producen alrededor de la puncin de
siembra, mientras que aquellas cepas productoras de sulfhdrico se distinguen por
la formacin de un precipitado negro de sulfuro de hierro a partir del tiosulfato
siempre que el medio se mantenga a un pH mayor a 7.2.

Clasificacin: Medio semislido.

Interpretacin: Cepas mviles: producen turbidez del medio, que se extiende

ms all de la lnea de siembra.
Cepas inmviles: el crecimiento se observa solamente en la lnea de siembra.
Cepas SH2 positivas: ennegrecimiento a lo largo de la lnea de siembra o en todo
el medio.
Cepas SH2 negativas: el medio permanece sin cambio de color.
Cepas indol positivas: desarrollo de color rojo luego de agregar el reactivo de
Kovacs o de Erlich.
Cepas indol negativas: sin cambio de color.
Agar Lia

Fundamento: En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan

los nutrientes para el desarrollo bacteriano. La glucosa es el hidrato de carbono
fermentable y la lisina es el sustrato utilizado para detectar la presencia de las
enzimas decarboxilasa y deaminasa. El citrato de hierro y amonio y el tiosulfato de
sodio son los indicadores de la produccin de cido sulfhdrico. El purpura de
bromocresol, es el indicador de pH (su color es amarillo a pH igual o menor a 5.2 y
violeta a pH igual o mayor a 6.8) y el agar es el agente solidificante.

Clasificacin: Medio diferencial.

Interpretacin:

Decarboxilacin de la lisina: Resultado Positivo: superficie alcalina /

profundidad alcalina (pico violeta / fondo violeta). Resultado negativo: superficie
alcalina /profundidad cida (pico violeta / fondo amarillo).

Desaminacin de la lisina: Resultado positivo: superficie rojiza / profundidad

cida. Esto sucede con cepas del gnero Proteus, Providencia y algunas de
Morganella spp.

Produccin de SH2: Resultado positivo: ennegrecimiento del medio de cultivo

(especialmente en el lmite entre la superficie y profundidad). Resultado
negativo: el medio de cultivo permanece sin cambio de color.

Endo

Fundamento: La selectividad del agar Endo se debe a la combinacin de sulfito

de sodio y fucsina bsica que inhibe ligeramente el crecimiento de los
microorganismos gram positivos.

Clasificacin: Medio diferencial y ligeramente selectivo.

Interpretacin: Microorganismos BD Endo Agar E. coli Colonias de rosa oscuro a

rojizo, brillo verde metlico. Enterobacter/Klebsiella Colonias grandes, mucoides,
de color rosa. Proteus Colonias desde incoloras hasta rosa muy plido,
proliferativas. Salmonella Colonias desde incoloras hasta rosa muy plida.
Shigella Colonias desde incoloras hasta rosa plido. Pseudomonas Colonias
irregulares, incoloras. Bacterias grampositivas Crecimiento nulo o escaso.
Urea

Fundamento: En el medio de cultivo, la triptena y la glucosa, aportan los

nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el
balance osmtico, y el rojo de fenol es el indicador de pH. El agar es el agente
solidificante.

Clasificacin: Medio diferencial

Interpretacin: Microorganismos que hidrolizan la urea: el medio de cultivo es de

color rosado-rojizo. Microorganismos que no hidrolizan la urea: el medio de cultivo
permanece de color amarillo.