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TEMA 6.- BIOACTIVACIN Y DETOXICACIN: Biotransformaciones de XBs. Compuestos biodegradables y no

biodegradables o persistentes: bioacumulacin y biomagnificacin. Rutas para la biotransformaciones de XBs. Reacciones de fase
I y de fase II. Transformaciones de activacin y de detoxicacin.

BIOTRANSFORMACIONES DE LOS COMPUESTOS XENOBIOTICOS

Los organismos estn expuestos a un gran nmero de diferentes sustancias qumicas xenobiticas, que, una vez absorbidas
por el organismo, se acumulan en l y pueden amenazar su equilibrio funcional. Si la concentracin de cualquier xenobitico en el
organismo es excesiva, inevitablemente comportar un riesgo para las funciones de las biomolculas que acten en su entorno,
pudiendo alterar el correcto funcionamiento de un rgano, tejido, sistema, etc, interfiriendo en las reacciones bioqumicas.
Al igual que la absorcin y la distribucin, dos procesos de transferencia, la Biotransformacin tambin se lleva a cabo utilizando los
mecanismos existentes en los tejidos, para ello se usa la misma maquinaria bioqumica con la que se metabolizan los compuestos
endgenos, a veces de estructura qumica similar.
Al conjunto de reacciones metablicas por medio de las cuales los organismos modifican la estructura qumica de un XB se le
denomina BIOTRANSFORMACIN. Podemos predecir que la biotransformacin de un XB consiste fundamentalmente en
incrementar su polaridad para posibilitar su eliminacin, en convertir un compuesto no polar en uno soluble en agua. Este es el
mecanismo ms comn que usan los organismos para transformar y eliminar los XBs ambientales.

Un XB en el interior del organismo puede seguir muchas opciones, pero simplificando:

a) puede ser excretado sin que haya sufrido modificacin alguna, con su estructura original.
b) puede sufrir reacciones de transformacin metablica, biotransformaciones. Cuando stas se producen, los compuestos son
biodegradables. Existe un conjunto de enzimas en los organismos que es ms responsable de las biotransformaciones de XBs.
METABOLISMO Y BIOTRANSFORMACION
El metabolismo de un organismo es el conjunto de reacciones enzimticas organizadas en rutas bioqumicas que sirven para
mantener la funcionalidad de las clulas con las caractersticas estructurales y funcionales propias. Cuando las reacciones
enzimticas operan sobre componentes endgenos nos estamos refiriendo al metabolismo propiamente dicho y cuando las
reacciones enzimticas operan sobre los xenobiticos nos referimos a las reacciones de biotransformacin. Ambos trminos
metabolismo y biotransformacin se usan a veces como sinnimos, particularmente cuando se refiere al campo de los xenobiticos o
de "drugs" .

Por ejemplo, las enzimas biotransformadoras de xenobiticos son frecuentemente llamadas enzimas metabolizantes de drogas.
Cualquier enzima puede operar sobre su sustrato natural o sobre un compuesto XB, sea frmaco, contaminante, etc.:
enzima
Sustrato ---------------------------
Producto o metabolito
Cofactor

El trmino enzimas bitransformadoras de xenobiticos sera

mas apropiado, aunque el trmino enmascarara el hecho de que
varios compuestos endgenos, como los esteroides, puedan ser
sustratos de estas mismas enzimas. Aplicar el trmino metabolismo a
la biotransformacin de xenobiticos, as como el trmino de
metabolito a los derivados metablicos de aquellos no parece muy
adecuado, pero suele ser generalizado.
Igualmente cuando se habla de individuos metabolizadores pobres,
aquellos con alguna deficiencia enzimtica y que tienen menor
capacidad de biotransformar los XBs., o el trmino metabolizadores
extensivos para aquellos individuos con fenotipo normal. Podra
resultar conveniente aplicar el trmino de sistemas
biotransformadores, aunque no es usual.
Biotransformacin: Cualquier reaccin bioqumica que opere sobre
un XB a cargo de los sistemas enzimticos de un organismo. Se
entender como BIODEGRADACIN el conjunto de
transformaciones metablicas que sufra un XB a lo largo de su paso
por un organismo, especialmente cuando el XB se degrade y ha sido
el proceso mas estudiado para muchos xenobiticos en muchos tipos
diferentes de organismos (fundamentalmente organismos).

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Biodegradacin: El resultado de todas las biotransformaciones de un XB en un entorno concreto, a cargo de los diferentes
organismos que operen en l. La capacidad biotransformadora de los organismos es muy diferente y est relacionada, adems, con
su grado de exposicin a XBs. Por ejemplo, los insectos, que se alimentan de una amplia variedad de plantas, tienen una mayor
capacidad para biotransformar XBs que aquellos insectos que se alimentan de un nmero limitado de plantas. Comparados con los
mamferos, los peces tienen una ostensible menor capacidad de biotransformar XBs, porque ellos pueden eliminar ms fcilmente
los XBs no transformados a travs de las branquias. Por otra parte, las diferencias especficas en la capacidad de biotransformar XBs
entre los mamferos no refleja simplemente unas diferencias en su exposicin a contaminantes, sino otros muchos factores.
Algunos compuestos estimulan la sntesis de enzimas implicadas en la biotransformacin de XBs. Este proceso conocido
como induccin enzimtica es una respuesta reversible y adaptativa a la exposicin a XBs. La induccin enzimtica hace posible
que algunos XBs aceleren su propia biotransformacin y la biotransformacin de otros compuestos. Se estudiar este proceso en
relacin con las enzimas tipo Cit. P-450 y algunas conjugasas.

BIOACUMULACIN: COMPUESTOS BIODEGRADABLES Y NO DEGRADABLES O PERSISTENTES.

Los xenobiticos despus de ser absorbidos, dependiendo de sus propiedades fsico-qumicas, se acumulan en los
organismos, especialmente los compuestos con caractersticas lipoflicas o que son fuertemente liposolubles. Otros compuestos se
acumulan porque emulan comportamientos de anlogos biolgicos o porque interaccionan con algunas biomolculas.
Por ejemplo el Pb es transportado en sangre dentro de los eritrocitos, como el Fe2+ y se acumula en los huesos al igual que el Ca2+
.El Cd2+ interacciona con las enzimas que dependen de Zn2+ (carboxipeptidasas).
El comportamiento bioacumulador se basa tambin en las funciones de los rganos excretores (rin, pulmn, etc.), que
generalmente se deshacen de las sustancias en contacto con lquidos o con gases, donde estn en contacto con los conductos de estos
rganos. El rin excreta sustancias (hidrosolubles) a travs del filtrado glomerular de la sangre, envindolas por los tbulos renales
a la vejiga. Desde los tbulos renales muchas sustancias son reabsorbidas hasta la circulacin, bien de forma activa (agua, sales,
glucosa) o bien de forma pasiva (sustancias lipoflicas). La reabsorcin pasiva de las sustancias lipoflicas se produce porque
dichas sustancias tienden a disolverse en los lpidos de las membranas de las clulas epiteliales. Puesto que en ellas pueden unirse
despus a protenas o lipoprotenas de la sangre, as se genera un transporte neto desde el filtrado glomerular hacia la sangre. Este
fenmeno explica que la concentracin de sustancias lipoflicas en el organismo pueda ir en aumento y se produzca su
bioacumulacin, primordialmente en los tejidos con alto contenido lipdico (adiposo, hgado, mamas, etc).

Este fenmeno se produce generalmente para los compuestos que en su paso por el organismo no son degradados, sino que
son persistentes, porque no son abordados por los sistemas de biotransformacin. En general son muy persistentes los
hidrocarburos, mas si son policclicos y si estn halogenados y son menos persistentes los carbamatos y los organofosforados Estos
compuestos XBs persistentes en el medio, se van acumulando desde entornos acuosos hasta los tejidos de las diferentes especies,
conduciendo a un fenmeno de bioconcentracin de los XBs. La acumulacin de un compuesto en los tejidos de cualquier
organismo para conseguir un nivel mayor que el que tiene el medio ambiente del entorno.
BCF: factor de bioconcentracin = razn entre las [ ] y BAF: factor de bioacumulacin = razn entre las
concentraciones del organismo/agua o medio, cuando hay un eslabn alimenticio intermediario.
Las especies correspondientes a los eslabones superiores de las cadenas trficas suelen soportar los niveles ms altos de los XBs
acumulados. Se denomina biomagnificacin a los procesos de bioconcentracin y bioacumulacin que se producen en los
organismos de una secuencia trfica a travs de la cadena alimentaria. Ver pirmides invertidas de biomasa y de contenido en XBs o
el Proceso de bioacumulacin para TCDDs.
Ejemplo de Biomagnificacin de TCDDs (persistentes)
Suelo superficial 150 pg/g
Hierba 270 pg/g
Hierba (Seveso) 100 pg/mg = ng/g
Hgado conejos 433-633 ng/g
Granja Seveso pollos 35-24 ng/g

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BIOTRANSFORMACIONES Y ACCIN TXICA:

Desactivacin o detoxicacin y bioactivacin o activacin.
Los organismos contienen un nmero de sistemas enzimticos capaces de biotransformar compuestos XBs, al igual
que metabolizan los compuestos endgenos para convertirlos en desechables, para transformarlos en otros ms hidrosolubles,
que sean mas fcilmente excretables. Las biotransformaciones pueden inducir considerables cambios en la actividad biolgica
de los XBs. Si esta actividad decrece, el proceso se denomina de bioinactivacin (detoxicacin) y si aumenta se denomina
bioactivacin (activacin). As pues, los efectos txicos de los compuestos exgenos, frecuentemente no provienen de los
compuestos patrn sino de los metabolitos reactivos formados a partir de ellos dentro de las clulas. Estas
biotransformaciones de compuestos relativamente inertes a metabolitos muy reactivos con una toxicidad intrnseca mayor que
la de los compuestos originales se denomina activacion metabolica , bioactivacion o toxificacin

Esquema de biotransformaciones: activacines y desactivaciones

XENOBITICOS
ABSORCIN
Efectos farmacolgicos
XBs en TORRENTE
CIRCULATORIO y
TEJIDOS
Efectos patolgicos
Reacciones metablicas
BIOTRANSFORMACIONES Reparacin
celular: DNA
y protenas
EXCRECCIN Daos en el DNA
Replic
acin
Se unen a componentes
DETO
XIFICA TOXI celulares: Enzimas,
CIN FICACI Receptores,
N
Membranas, DNA,

DNA alterado

METABOLITOS ACTIVACIN
METABOLITOS
NO TXICOS
TXICOS o
DESACTVACIN REACTIVOS

Ejemplos de biotransformaciones:

La hidroxilacin en el anillo de aminas aromticas 1s conduce a su destoxicacin, mientras que la hidroxilacin en el N de la aminas
primarias conlleva activacin. Los estudios pioneros de James y Miller (aos 40-50) con el colorante N-(CH3)2-4-amino-azo-
benceno (DAB), un hepatocarcingeno en ratas, demostraron la conversin in vivo del compuesto qumico a productos derivados
que eran los que se unan a Ac. nucleicos y protenas, los carcingenos.
El -naftil-amino tiende primero a ser metabolizado antes que a causar cncer de vejiga y el 2-Acetilaminofluoreno (2-
AAF) slo es carcingeno despus de su biotransformacin a N-OH-AAF. Estos hechos establecen la importancia de la activacin
metablica en la carcinognesis inducida qumicamente.

DETOXICACIN: La actividad biolgica (incluida la txica) de las sustancias frecuentemente desciende

con las biotransformaciones, pero no siempre La biotransformacin suele producir un aumento de
hidrosolubilidad de una molcula y as mejora su excreccin. Habr menos acumulacin de la sustancia en el
organismo, su nivel descender y puesto que hay una relacin general (dosis-respuesta) entre la concentracin
de sustancia y la intensidad de su efecto txico, este tipo de biotransformaciones significan un descenso de la
intensidad de la accin biolgica original y se puede definir como bioinactivacin o detoxicacin.

La Detoxicacin, sigue diversos caminos en dependencia de la naturaleza qumica del XB.

- Detoxicacin con grupos no funcionales benceno, tolueno requiere 2 fases

- Detoxicacin de nuclefilos -OH, -SH, -NH2 conjugacin: S, Glu, Ac.
- Detoxicacin de electrfilos iones -GSH, epoxi hidrolasa, H-quinona y DT-diaforasa
- Detoxicacin de radicales libres HO. Glutation (-GSH)

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BIOACTIVACIONES: Producen un aumento de la reactividad del XB; generalmente conllevan la FORMACIN DE:
Formacin de electrfilos, de radicales libres, de nuclefilos o de reactivos red-ox
Estas reacciones aumentan la polaridad de los XBs y la introduccin de grupos polares en una molcula no solo aumenta su
reactividad para someterse a posteriores reacciones de destoxicacin y aumenta su reactividad hacia otras muchas molculas,
incluidas las biolgicas. Si un XB puede reaccionar con un componente de un sistema biolgico (proteina, DNA, etc, o
cualquier metabolito del metabolismo celular) hay una posibilidad razonable de que la clula se vea afectada por l. Si esta
influencia es adversa, significa que el XB mostrar un efecto txico.
REACCIONES DE BIOACTIVACIN ms frecuentes Enzimas
Oxidacin Cit P450, FMO, Alcohol y aldehido deshidrogenasa, PGSintasa
Des-conjugacin B-liasa de XB- conjugados
Microflora intestinal Hidrolasas y reductasas.

Ejemplos de reaciones:
AMINAS PRIMARIAS N-hidroxilacin
HIDROCARBUROS POLICCLICOS Derivados epoxi
DERIVADOS AZO-BENCENO Radicales
PCDD Y PCBs COPLANAR
Todos forman metabolitos reactivos carcingenos, sustancias
electrfilas que se unen al DNA.

Otras biotransformaciones que son reacciones de bioactivacin,

son las de oxidacin de los organofosforados, i.e., la oxidacin
del insecticida parathion en paraoxon (cambia un >P=S por un
>P=O). El parathion es un organotiofosfato, cuya neurotoxicidad

radica en la inhibicin de la aceilcolinesterasa (AChE). La afinidad de la enzima por el paraoxon (metabolito) es muy superior que la
que mantiene por el precursor. La reaccin de oxidacin que transforma al txico en un compuesto mas hidrosoluble y mas
excretable, le convierte tambin en un compuesto ms txico. El paraoxon, no obstante, puede ser hidrolizado y como consecuencia
pierde su efecto txico sobre la AChE.
Los nitritos y las aminas forman fcilmente carcingenos en el organismo. Conversin de nitrato, va nitrito en
nitrosamina cancergena. La formacin de nitrosamina puede tener lugar en el estmago (pH) despus del consumo de
alimentos ricos en nitratos (espinacas), junto con un componente de la dieta que contenga aminas, que pueden nitrosilarse.
Las nitrosaminas son carcinognicas porque sus metabolitos son muy reactivos, por ejemplo la hidroxilacin de las N-
nitrosaminas procura procesos de metilacin sobre las bases nitrogenadas en el DNA.

PRINCIPALES RUTAS PARA LA BIOTRANSFORMACIN DE XENOBITICOS

Las reacciones de biotransformacion son conversiones enzimticas de sustancias xenobiticas lipoflicas hacia productos
hidroflicos, generalmente, mas eliminables o excretables. Las reacciones son a veces son coincidentes con las que sufren los
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productos metablicos endgenos (Vit. D, prostaglandinas, ). El conjunto de reacciones de biotransformacin de XB suele agruparse
en dos fases: I y II.

XENOBITICOS

altamente lipoflicos
metablicamente estables
lipoflicos polares hidroflicos

BIOACUMULACIN
acumulacin de XBs
en lpidos del cuerpo

FASE I: + polares
bioinactivacin o activacin
OXIDACIN, REDUCCIN
HIDRLISIS
polares

FASE II +
hidroflicos
(bioanactivacin)

MOVILIZACIN EXTRACELULAR
circulacin plasmtica
Excreccin biliar excreccin renal

Aunque la degradacin completa de un XB requiere de muchas reacciones, el ataque incial suele ser mediante las
reacciones de fase I. Un primer conjunto de reacciones, en las que la biotransformacin es la conversin de compuestos lipoflicos
(no polares) en compuestos mas polares y por lo tanto algo ms solubles en agua, mediante las reacciones llamadas de FASE I,
(oxidaciones, reducciones e hidrlisis). Muchas de estas reacciones tienen lugar bajo la catlisis de enzimas componentes de los
sistemas llamados oxidasas de funcin mixta (OFM), distribuidas principalmente en hepatocitos. Estas reacciones producen
compuestos que pueden ser ms, igual o menos txicos que sus predecesores, aunque si es frecuente que sean ms reactivos, lo que
suele conllevar una mayor capacidad txica. Las oxidaciones incluyen todas las monooxigenasas dependientes del Cit P-450, las
monooxigenasas que contienen nucletidos de flavina y otras (ver tabla adjunta).
Son muchas las reacciones de
oxidacin que conllevan la bioactivacin de sus
sustratos por la formacin de puentes epoxi. Este
es el caso de los XBs con anillos aromticos,
cuya oxidacin a derivados hidroxi pasa por la
formacin de intermediarios muy reactivos,
epoxis. Estos epoxi no son estables y la mayor
parte derivan hacia fenoles.
A causa de su carcter electrfilo, los epoxi pueden tambin reaccionar con grupos nucleoflicos en biomolculas como las protenas
o el DNA, que pueden inducir dao en dichas molculas. Algunas de estas reacciones en el DNA pueden producir alteraciones que
eventualmente deriven en cncer. Muchas de las conocidas bioactivaciones carcinogenticas pasan por la produccin de un
intermediario reactivo electroflico.

Las reacciones de FASE II son reacciones de conjugacin (glucuronidacin, sulfonacin y

conjugacin con GSH con formacin de Ac. Mercaptrico-), donde los XBs polares, son conjugados
con sustancias endgenas hidroflicas (ac. glucurnico, sulfato, glutation). Estas reacciones enzimticas
estn encaminadas a aumentar an ms la
hidrosolubilidad de sus sustratos y por lo
tanto hacerlos ms fcilmente excretables
por el organismo. Adems la mayor parte de
los derivados conjugados tienen muy baja
actividad biolgica, por lo tanto muchas reacciones de la fase II son reacciones de bioinactivacin en
procesos de detoxicacin, aunque no siempre.

Fase III.- despus de las modificaciones

Despus de las reacciones de fase II, los conjugados de xenobiticos pueden sufrir an ms
modificaciones. Un ejemplo muy comn es el procesado de los conjugados de glutation hasta acetil-
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cisteinil-derivados (cidos mercaptricos). En estos casos, los residuos de -glutamato y glicina en la

molcula de glutation son hidrolizados por la Gamma-glutamil transpeptidasa y las dipeptidasas. En el
paso ltimo, la cisterna es acetilada en el conjugado. Los conjugados y sus metabolitos pueden ser
excretados desde las clulas en la fase III de su metabolismo, con los grupos aninicos actuando como
marcadores de afinidad para una serie de transportadores de membrana de la familia proteina resistente a
multi-XBs (MRP). Estas protenas son miembros de la familia de transportadores transmembrana que
unen ATP y pueden catalizar el transporte dependiente de ATP de una estrecha variedad de aniones
hidrofbicos, y as actuar para extraer productos de la fase II hacia el medio extracelular, donde pueden
ser posteriormente metabolizados o excretados.

MRP: P-glicoprotena: es una protena humana transportadora de la subfamilia MDT/TAP. Est muy
distribuida y se expresa en clulas normales tales como intestino, hgado, clulas proximales de rin,
endoteliales capilares y clulas de la barrera hemato-enceflica. Tambin se expresa en clulas de la lnea
P-gp, denominadas cmo ABCB1, miembro 1 de la sub-familia B de las transportadoras dependientes de
ATP, MDR1, y PGY1. la glicoproteina P tambin se la designa cmo CD243 (grupo de diferenciacin
243).
ATP-binding cassette transporters (ABC-transportadores) son miembros de una superfamilia,
una de las ms abundantes, y ms antiguas (ancestrales) familias con representacin en todos los
organismos, desde procariotas a humanos. Estas son unas protenas transmembrana que funcionan en el
transporte de de una amplia variedad de sustratos a travs de las membrana extra e intracelulares,
incluyendo productos metablicos, lpidos y esteroles, y drogas. Las protenas son clasificadas cmo
ABC transportadores basado en la secuencia y organizacin de su dominio de unin al ATP(s), tambin
conocido como plieges de unin a nucleotidos (NBFs). ABC transportadores estn implicados en
resistencia de tumores, fibrosis cstica, resistencia multi-drogas bacteriana y un rango de otras
enfermedades humanas heredables.