Manual de Preparación de Reactivos Fq-Lab 3y4
Manual de Preparación de Reactivos Fq-Lab 3y4
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Laboratorios de docencia 3 y 4
Asignatura: INM
Reactivos Cantidad
NaCl - Cloruro de sodio 8 gr
KCl - Cloruro de potasio 0.2 gr
Na2HPO4 - Fosfato dibsico de sodio 1.15 gr
KH2PO4 - Fosfato monobsico de potasio 0.27 gr
Agua destilada 1L
Preparacin: Disolver los reactivos en una parte del agua destilada, ajustar el pH a 7 con
soluciones de HCl o NaOH. Aforar a 1L; Si el reactivo no se usar pronto, esterilizar. Guardar en
refrigeracin.
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Manual de preparacin de reactivos
Laboratorios de docencia 3 y 4
Preparacin: Disolver los reactivos en 300ml de agua destilada, ajustar el pH a 7.2 con HCl, y
aforar a 500ml. Para preparar el Buffer TBE 1X, Colocar 100 ml de buffer TBE 10x, y aforar a
1L.
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EDTA 0.5M: pesar 14.61 gr de EDTA y diluir en 80ml aproximadamente de agua destilada, ajustar
el pH a 8 (durante el proceso se llega a un punto en el que se forma una especie de pasta, pero
esto es normal, y se debe continuar hasta llegar al pH indicado), y aforar a 100ml. No es necesario,
pero se puede esterilizar por filtracin con membrana milipore de 0.2m.
Para preparar el Buffer TAE 1X, Colocar 20 ml de buffer 50X, y aforar a 1L.
Para preparar el Buffer TAE 1X con SYBR safe: agregar 50L de SYBR safe a 500ml de buffer TAE
1X.
Caractersticas del reactivo: solucin acuosa incolora. El buffer SYBR safe tiene un color
ligeramente verde
Buffer SYBR safe: protegerse de la luz y mantener en refrigeracin; estable por ms de 1 ao.
Asignatura: QB, MG
Soluciones Reactivos Cantidad Cantidad para
solucin de trabajo
Buffer Tris (10mM) 72 L
EDTA 0.1mM
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Colorante 18 L
Marcador de 10 L
1Kb
Preparacin: mezclar los componentes de la formulacin.
Asignatura: QB
Soluciones Reactivos Cantidad
glicina 14.4 gr
Tris base 3.9 gr
SDS 10% SDS en polvo 1gr 10 ml
Agua destilada 10 ml
Agua destilada 1L
Preparacin: Disolver los reactivos y aforar 1L. Para preparar el Buffer 1X, Colocar 100 ml de
buffer 10x, y aforar a 1L.
Asignatura: QB
Soluciones Reactivos Cantidad PARA PREPARAR EL
BUFFER 5X
SDS 10% SDS en polvo 1 gr 2.5 ml
Agua destilada 10 ml
2-mercaptoetanol 0.2 ml
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Preparacin: Disolver completamente el colorante en el alcohol etlico; despus aforar a con agua
destilada.
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Preparacin: Disolver completamente el colorante en el alcohol etlico; despus aforar con
agua destilada, y en caso de ser necesario filtrar.
Preparacin: pesar las cantidades de los reactivos y llevarlas al mortero, triturarlas y agregar un
poco del agua previamente medida en probeta, homogenizar y verter en matraz o vaso, completar
el agua y observar si existen partculas, de ser asi, agitar hasta disolucin.
Disolver completamente los reactivos (requiere alterar perodos largos de agitacin vigorosa y
reposo, si an as no se disuelve, se puede agitar calentando levemente.
Observaciones: Utilizar equipo de proteccin al preparar, ya que los reactivos pueden causar
daos a la salud. Almacenar en frasco de vidrio mbar; no necesita refrigeracin. Los vapores son
txicos.
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Caractersticas del reactivo: solucin acuosa transparente. No necesita refrigeracin.
Caractersticas del reactivo: solucin acuosa ligeramente espesa color verde muy oscuro.
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Reactivos Cantidad
Sulfato de amonio Max. 300g
Acetato de sodio 12.3g
cido actico glacial 9 ml
Agua destilada 1L
Observaciones: No necesita refrigeracin, pero puede llegar a formar cristales por fuera del
envase.
Para poder utilizar el reactivo despus de estar almacenado por algunos meses, aadir
nuevamente el volumen proporcional de cido actico glacial.
Asignatura: BT
Reactivos y sus concentraciones Solucin concentrada a preparar Cantidad de la soln.
finales en la solucin (pesar para 20ml de c/u): Concentrada a usar
Tris HCl [100mM], pH 8.0 Tris HCl 2M (4.84g) 2.5 ml
EDTA [20mM], pH 8.0 EDTA 0.5M (2.92 gr) 2 ml
NaCl [1.4M] NaCl 5M (5.845 gr) 1 ml
Bromuro de cetiltrimetilamonio CTAB al 20% ( 4 gr) 5 ml
(CTAB) [2%]
- mercaptoetanol 10mM 2-mercaptoetanol 0.717M (1ml) 0.7 ml (700L)
Agua destilada Ajustar pH y Aforar a 20ml c/u Aforar a 50 ml
Tris HCl 2M: Pesar 4.84g de Tris Base y diluir en 10ml de agua destilada; ajustar el pH a 8 con HCl
y finalmente aforar a 20 ml. Conservar en un vial en refrigeracin. Esta solucin es altamente
estable, por lo que puede ser almacenada y usada por ms de 2 aos luego de su preparacin.
EDTA 0.5M: pesar 2.92g de EDTA en 10ml de agua destilada, ajustar el pH a 8 (durante el proceso
se llega a un punto en el que se forma una especie de pasta, pero esto es normal, y se debe
continuar hasta llegar al pH indicado), y aforar a 20ml
NaCl 5M: Pesar 5.845g de NaCl y aforar a 20ml. Conservar en vial transparente o mbar, y no se
requiere refrigeracin.
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Bromuro de cetiltrimetilamonio (CTAB) 20%: Pesar 4g del reactivo y diluir el 20ml de agua
destilada. Para lograr la completa disolucin agitar con calentamiento leve. Mantener el
reactivo en frasco mbar.
- mercaptoetanol 0.717M: Medir 1ml del reactivo y aforar a 20ml. Mantener el reactivo en
frasco mbar.
Asignatura: BT
Reactivos cantidad
cloroformo 24 ml
Alcohol isoamlico 1 ml
Asignatura: BT
Reactivos cantidad
Acetato de sodio 4.938 gr
Agua destilada Aforar a 20ml
Preparacin: diluir el reactivo en 10ml de agua destilada, ajustar el pH a 5.2, y aforar a 20ml.
Caractersticas del reactivo: solucin acuosa transparente.
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COLORANTE DE WRIGHT
Asignatura: BT
Reactivos Cantidad Cantidad
Colorante de Wright en polvo 2.2 gr 1.1 gr
Glicerol (glicerina) Variable (aprox. 50ml) Aprox. 25ml
Metanol 300 ml 150 ml
Agua destilada Aforar a 1000ml Aforar a 500ml
Asignatura: hem II
SOLUCIN AMORTIGUADORA CONCENTRADA AL 10%
Reactivos cantidad
Cloruro de sodio 18 g 9g
Fosfato de sodio dibsico (Na2HPO4) 2.73 g 1.365 g
Fosfato disdico anhidro (NaH2PO4) 0.486 g 0.243 g
Agua destilada 200 ml 100 ml
Caractersticas del reactivo: ambas soluciones (10% y 1%), son acuosas transparentes.
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Asignatura: HEM II
Soluciones Reactivos Cantidad PARA PREPARAR EL
BUFFER DE TRABAJO
SOLUCIN A Fosfato de sodio dibsico (Na2HPO4) 14.2 g 80.8 ml
Agua destilada 1L
SOLUCIN B Fosfato de sodio monobsico (NaH2PO4 13.8 g 19.2 ml
.2H2O)
Agua destilada 1L
Preparacin: preparar las soluciones A y B por separado, posteriormente medir las cantidades
indicadas en la tabla para preparar el buffer de trabajo, y ajustar el pH a 7.4 con soluciones de
NaOH o HCl segn se requiera.
Observaciones: usar equipo de proteccin personal (guantes, MASCARILLA, lentes, bata, etc), los
reactivos son dainos para la salud y cancergenos. Conservar en refrigeracin y frasco mbar,
estable por ms de 1 ao.
Asignatura: BT, QB
Reactivos cantidad
Dodecil sulfato de sodio (SDS) 10g
Agua destilada 100 ml
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Preparacin: Disolver el reactivo en el agua destilada; forma grandes cantidades de espuma.
Caractersticas del reactivo: transparente y jabonoso.
Asignatura: BT, QB
Reactivos cantidad
Tris base 121.14g
Agua destilada 1L
Asignatura: QB
Soluciones Reactivos Cantidad PARA PREPARAR Concentracin
EL BUFFER DE final
TRABAJO
Cloruro de Cloruro de magnesio 2.033 g 5mM
0.5 ml
Magnesio MgCl2 1M Agua destilada 10 ml
Cloruro de sodio Cloruro de sodio 2.92 g 10mM
1 ml
(NaCl) 1M Agua destilada 50ml
Tris base 2.423g 10mM
Tris HCl 1M pH 7.6 1 ml
Agua destilada 20 ml
Agua destilada Aforar a 100ml
Observaciones: Puede formar precipitados con el tiempo, sin embargo es estable por ms de 1
ao. Requiere refrigeracin.
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Asignatura: QB
Soluciones Reactivos Cantidad PARA PREPARAR Concentracin
EL BUFFER DE final
TRABAJO
Tris HCl 1M pH Tris base 2.423g 10mM
1 ml
7.6 Agua destilada 20 ml
Cloruro de sodio Cloruro de sodio 2.92 g 50mM
5 ml
(NaCl) 1M Agua destilada 50ml
EDTA 0.25M pH EDTA 1.46 gr 10mM
4 ml
8.0 Agua destilada 20 ml
SDS al 20% SDS 4 gr
2 ml 0.2%
Agua destilada 20 ml
Agua destilada Aforar a 100ml
Preparacin: Preparar las soluciones de cloruro de sodio, SDS, EDTA y tris, ajustando el pH de las
dos ltimas con soluciones de HCl o NaOH segn se requiera; medir los volmenes indicados para
preparar el buffer de trabajo, y aforar a 100ml con agua destilada
Caractersticas del reactivo: solucin acuosa transparente.
Observaciones: Puede formar precipitados con el tiempo, sin embargo es estable por ms de 1
ao. Requiere refrigeracin.
Asignatura:
Reactivos cantidad
Agua destilada
Preparacin:
Caractersticas del reactivo:
Observaciones:
Asignatura:
Reactivos Cantidad
Fuscina basica 4 gr
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Etanol al 95% 25 ml
Fenol (cristal) 8 gr
Agua destilada 100 ml
Asignatura:
Reactivos cantidad
FENOL CRISTALINO
BUFFER 10 TE 1M Tris-HCL Ph 8.0 50 ml
(STOCK 500ML) 0.5M EDTA Ph 8.0 10 ml
dH2O 440 ml
BUFFER 1X TE buffer 10x TE 50 ml
(STOCK 500ML) dH2O 450 ml
Preparacin:
Caractersticas del reactivo:
Observaciones:
Solucin de Hayem
Asignatura:
Reactivos cantidad
HgCl2 0,25 gramos
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Preparacin:
Pese estas sales y adalas a 100 ml. de agua destilada.
Caractersticas del reactivo:
Observaciones:
Asignatura:
Reactivos cantidad
FORMALINA V/V
ALCOHOL V/V
Agua destilada
REACTIVO
Asignatura:
Reactivos cantidad
Agua destilada
Preparacin:
Caractersticas del reactivo:
Observaciones:
REACTIVO
Asignatura:
Reactivos cantidad
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Agua destilada
Preparacin:
Caractersticas del reactivo:
Observaciones:
REACTIVO
Asignatura:
Reactivos cantidad
Agua destilada
Preparacin:
Caractersticas del reactivo:
Observaciones:
REACTIVO
Asignatura:
Reactivos cantidad
Agua destilada
Preparacin:
Caractersticas del reactivo:
Observaciones:
REACTIVO
Asignatura:
Reactivos cantidad
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Agua destilada
Preparacin:
Caractersticas del reactivo:
Observaciones:
REACTIVO
Asignatura:
Reactivos cantidad
Agua destilada
Preparacin:
Caractersticas del reactivo:
Observaciones:
REACTIVO
Asignatura:
Reactivos cantidad
Agua destilada
Preparacin:
Caractersticas del reactivo:
Observaciones:
REACTIVO
Asignatura:
Reactivos cantidad
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Agua destilada
Preparacin:
Caractersticas del reactivo:
Observaciones:
REACTIVO
Asignatura:
Reactivos cantidad
Agua destilada
Preparacin:
Caractersticas del reactivo:
Observaciones:
REACTIVO
Asignatura:
Reactivos cantidad
Agua destilada
Preparacin:
Caractersticas del reactivo:
Observaciones:
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