Práctica

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Práctica #1: Máximo de absorbancia y curva de calibración

Universidad Autónoma de Ciudad Juárez


Instituto de Ciencias Biomédicas
Departamento de Ciencias Químico-Biológicas
Lic. En Químico Farmacéutico Biólogo
Laboratorio de Análisis Químico II
Ramírez Islas, Luis Alberto 158731
Zárate Cervantes, Jessica Aylín 158610
De Santiago Chávez, Elena Itzel 153760
Resumen
La espectroscopía, de manera general, se fundamenta en las propiedades más elementales de la
química: la excitación de electrones, el espectro visible y la impenetrabilidad. La espectroscopía
permite conocer la concentración de soluciones a partir la cantidad de luz que atraviesa una muestra
en el espectrofotómetro. Se realizó una disolución de permanganato de potasio de 0.00004 M a partir
de una solución estandarizada a 0.005 M, la cual fue de utilizada para un barrido espectral en un
espectrofotómetro de luz visible y localizar el punto máximo de absorción, 525 nm. Se realizaron cuatro
diluciones seriadas para realizar la curva de calibración a 525 nm. Se obtuvo un 0.9553 en la prueba
de R2
Resultados
Tras realizar el barrido espectral, se localizó
un pico en 520 nm, pues la siguiente medida
mostró 0.08 de absorbancia, tal como se
observa en la Tabla 1. A fin un salto del punto
máximo de absorbancia, se realizó una
lectura cada 5 nm, obteniendo 525 nm como
la mayor absorbancia de 0.11.
Tabla 1 Barrido espectral de la muestra de permanganato de
potasio a 4x10-5 M. El punto máximo de absorbancia se
encuentra a los 525 nm.

Longitud de onda Absorbancia Gráfica 1 Barrido espectral de la muestra patrón de


(nm) permanganato de potasio a 4x10-5 M
400 0.03
440 0.04
480 0.05
520 0.1
525 0.11
560 0.08
Tabla 2 Absorbancia medida en el espectrofotómetro de luz
visible a 525 nm de las disoluciones de permanganato de
potasio (KMnO4).

Concentración de Absorbancia
KMnO4 (M)
0.00004 0.11
Gráfica 2 Curva de calibración de las cinco diluciones
0.00002 0.05 realizadas.
0.00001 0.04
0.000005 0.03
0.0000025 0.03
Discusión disoluciones se realizaron con
perfectamente, son variados, presentando
La espectrofotometría de UV-VIS posee
tres disoluciones con un error menor al 10%,
como principales ventajas su fácil empleo y
mientras que una presenta un error de poco
bajo coste, permitiendo la obtención de un
más de 27% y la de menor concentración
gran número de datos útiles. Sin embargo, el
presenta un error altísimo de 108.83%; por lo
espectrofotómetro de luz UV-VIS no es del
que un R2 de más de 0.95 no asegura errores
todo preciso, Fersht (1980) menciona que, al
pequeños. La Tabla 3 muestra el error de
exponerlo a altas absorciones de fondo, se
cada disolución.
absorbe tanta luz de la longitud de onda
correcta, que luz de otras longitudes de onda Tabla 3 Cálculo del error de la concentración estimada con
la línea de tendencia. La línea de tendencia posee una
que se filtra a través del monocromador se ecuación de 2145.2x + 0.0188 = y
hace significativa, a esto se le conoce como
Concentración Absorbancia Concentración % Error
luz extraviada. Otro factor que puede afectar de la calculada a
la precisión del análisis es el empleo de disolución partir de la
preparada absorbancia
sustancias con consistencia turbia, dado que 0.00004 0.11 4.25135E-05 6.2837
esto dispersa la luz. 0.00002 0.05 1.45441E-05 27.2795
0.00001 0.04 9.88253E-06 1.1747
La absorción de la energía radiante en la 0.000005 0.03 5.22096E-06 4.4191
0.0000025 0.03 5.22096E-06 108.8383
región visible implica la captura de fotones
que ocasionan transiciones de electrones de
los orbitales más externos, capa de valencia, Conclusión
de iones o moléculas absorbentes, a niveles
Los espectrofotómetros permiten hacer
de energía más altos. Por consiguiente, las
análisis con la utilización de diversas técnicas
muestras que absorben selectivamente la
de luz. La más simple es la de luz ultravioleta-
radiación visible son sustancias que poseen
visible basándose en la Ley de Lambert-Beer.
niveles de energía con déficit de electrones.
La realización de curvas de calibración debe
(Clavijo Díaz, 2002)
ser extremadamente uniforme, pues incluso,
Tanto el dicromato como el permanganato con una prueba de R² igual a 1, aún existe el
de potasio absorben fuertemente en las riesgo de un error al hacer estimaciones de
regiones visibles y ultravioleta. (Skoog & concentración basándose en la absorbancia.
West, 1986) El permanganato presenta un
Bibliografía
máximo de absorción de 523nm, y su color
observado es violeta. Se dice que el color Clavijo Díaz, A. (2002). Fundamentos de
observado es complementario al color que se química analítica. Equilibrio iónico y análisis
absorbe. (Clavijo Díaz, 2002) químico. Bogotá: Universidad Nacional de
Colombia.
El coeficiente de regresión (R2) es aquel
número que nos brinda un intervalo de Fersht, A. (1980). Estructura y mecanismo de
confianza. Este número tiene que ser mayor las enzimas. Barcelona: Reverté.
a 0.95 para poder decir que los datos son
precisos. (Johnson & Kuby, 2012) Sin Johnson, R., & Kuby, P. (2012). Estadística
embargo, al realizar el cálculo inverso de la elemental. D.F.: Cengage Learning.
concentración a partir de la absorbancia Skoog, D. A., & West, D. M. (1986).
utilizando la ecuación de la línea de Introducción a la química analítica.
tendencia, el error que se presenta en las Barcelona: Reverté.
concentraciones, suponiendo que las

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