Documento Tillandsias Capillaris R y P
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DEDICATORIA
A mis padres por todo su apoyo incondicional durante mi trayectoria por esta vida, por
apoyarme en cada etapa de mi vida, a todo el equipo del Laboratorio de calidad ambiental
(LCA).
AGRADECIMIENTOS
Tillandsia capillaris R. & P., como bioindicador de la contaminación por metales
A mis padres y hermanos por ser parte mi vida, por brindarme su compañía y
animarme para superarme a través del conocimiento.
Al Laboratorio de calidad ambiental (LCA), por abrirme las puertas y apoyarme con
sus conocimientos y experiencia, por los consejos personales y profesionales brindados con
tanta calidez.
Al personal del área de los metales pesados Lic. Vania Garcia, Lic. Juan Pablo, y al
Lic. Edson, por la paciencia brindada al transmitir sus conocimientos y experiencia durante
mi estadía en el LCA.
Contenido
RESUMEN .................................................................................................................................. 1
CAPITULO 1 .............................................................................................................................. 2
Tillandsia capillaris R. & P., como bioindicador de la contaminación por metales
CAPITULO 2 ............................................................................................................................ 39
2. OBJETIVOS ................................................................................................................ 39
CAPITULO 3 ............................................................................................................................ 40
3 METODOLOGÍA. ........................................................................................................ 40
CAPITULO 4 ............................................................................................................................ 48
CAPITULO 5 ............................................................................................................................ 55
CAPITULO 6 ............................................................................................................................ 58
BIBLIOGRAFÍA ............................................................................................................. 58
ANEXOS ................................................................................................................................... 61
RESUMEN
Él presente trabajo refleja un estudio de la contaminación por metales pesados en
ciudad de La Paz en el área urbana que se ve afectada seriamente por varios factores de
contaminación, principalmente la antrópica, causada por el hombre, que se refleja en la
contaminación por metales pesados presentes en la atmosfera como ser Cd, Pb, As, Hg y Mn
entre otros que son captados por las TILLANDSIAS Capillaris R.& P. o como se conoce planta
aérea, esta puede actuar como bioindicador y bioacumulador de contaminantes atmosféricos
mencionados, ya que esta especie tiene la capacidad de captar la humedad del ambiente y en
CO2 disuelto en el aire y con ayuda de energía solar poder sintetizar carbohidratos y los
nutrientes necesarios para su existencia y reproducción respectiva .
El análisis empleado fue por, espectroscopia de absorción atómica por horno de grafito
para el Pb, As y Cd, y espectroscopia de absorción atómica por llama para Mn, y
Fluorescencia atómica para el Hg, en estos análisis se evidencio la presencia de estos
elementos que fueron analizados en 4 puntos con alto tráfico vehicular diurno en áreas urbana
de la Ciudad de La Paz.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
CAPITULO 1
1. MARCO TEÓRICO
1.1. INTRODUCCIÓN
1.1.1. BIOINDICADOR
Los bioindicadores pueden ser muy útiles debido a su alta sensibilidad a un amplio
espectro de sustancias o a su tolerancia a altos niveles de una sustancia acumulada en sus
tejidos durante cierto período de tiempo. Además, debido a su bajo costo de mantenimiento y
cultivo, es posible usarlos para monitorear grandes áreas (De Temmerman et al., 2004). Entre
las especies comúnmente empleadas como bioindicadores de los contaminantes atmosféricos,
se encuentra Tillandsia usneoides L. la cual es una Bromeliácea epifita aérea, que vive sobre
árboles u otros tipos de estratos inertes, absorbiendo agua y nutrientes directamente del aire y
tiene la capacidad de acumular en sus tejidos concentraciones relativamente altas de metales y
otros elementos tóxicos (Brighigna et al., 1997).
Los bioindicadores son especies o grupos taxonómicos capaces de reflejar el estado de
conservación, diversidad, endemismo y el grado de intervención o grado de perturbación en
los ecosistemas naturales.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
1.2 TILLANDSIAS
1.2.1. GENERALIDADES
Tillandsia capillaris es una de las especies de epífitas más abundantes en la región del
Bosque Chaqueño de Argentina y es denominada vulgarmente como “clavel del aire”, al igual
que otras especies del mismo género. Esta especie también se distribuye por Bolivia y
Ecuador
1.2.1.1. FISIOLOGÍA
En cuanto a su nutrición y ecología, esta especie comparte las mismas características
que la mayoría de las especies del género, es decir, que sus raíces están adaptadas a la sujeción
o "anclaje" del individuo al sustrato, mientras que la función de captación de agua y nutrientes
es llevada a cabo gracias a la presencia de una especie de escamas denominadas tricomas
foliares, que recubren íntegramente la superficie de las hojas (Abril, A., y Bucher, E., 2009).
1.2.1.2. REPRODUCCIÓN
En cuanto a la reproducción de estas plantas, es muy común la del tipo asexual
mediante yemas, aunque también existe la reproducción sexual mediante la formación de
frutos que contienen numerosas semillas de dispersión anemófila (dispersadas por el viento).
Esto es posible gracias a la presencia de pubescencias seminales cuyo origen es la escisión de
fibras provenientes del mismo fruto maduro que tiene forma de cápsula (Abril, A., y Bucher,
E., 2009).
1.2.1.3. HÁBITAT
Existen numerosas especies arbóreas del Bosque Chaqueño que presentan gran
abundancia de "claveles del aire" en sus copas, dentro de los cuales podemos destacar al
“algarrobo blanco” (Prosopis alba Griseb.), uno de los árboles más emblemáticos de la región,
aunque también podemos encontrarlos en numerosas especies nativas y exóticas. Tillandsia
capillaris es una especie holo epifita, es decir, que sólo puede desarrollarse utilizando como
sustrato otras especies. En este caso, utiliza a los árboles sólo como soporte, estableciendo una
relación simbiótica del tipo comensalista. En esta relación la epifita no genera un daño directo
a su hospedante, como popularmente se cree. Estudios recientes realizados en los bosques de
la región Chaqueña han demostrado que Tillandsia capillaris no necesita a los árboles
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
hospedantes para su nutrición, lo cual le posibilita desarrollarse sobre soportes inertes como
los cables de la red eléctrica. Sin embargo, los árboles presentan, por lo general, una mayor
abundancia de “claveles del aire” sobre ramas secas o deterioradas y este patrón de
distribución tan particular de las epifitas, es frecuentemente considerado como evidencia de
que los “claveles del aire” estarían ejerciendo efectos negativos sobre los árboles en los cuales
se hospedan, por lo que más que un comensalismo sería un parasitismo.
1.2.1.4. TAXONOMÍA
Tillandsia capillaris fue descrita por Ruiz & Pav. y publicado en Flora Peruviana, et
Chilensis 3: 42, t. 271, f, c. 1802 (Abril, A., y Bucher, E., 2009).
1.2.1.5. ETIMOLOGÍA
Tillandsia: nombre genérico que fue nombrado por Carlos Linneo en 1738 en honor al
médico y botánico finlandés Dr. Elias Tillandz (originalmente Tillander) (1640-1693).
Capillaris: epíteto latino que significa "como pelos"
Variedades aceptadas
• Tillandsia capillaris f. cordobensis (Hieron.) L.B.Sm.
• Tillandsia capillaris f. hieronymi (Mez) L.B.Sm.
• Tillandsia capillaris f. incana (Mez) L.B.Sm.
• Tillandsia capillaris f. virescens (Ruiz & Pav.) L.B.Sm.
Sinonimia
• Diaphoranthema capillaris (Ruiz & Pav.) Beer
• Tillandsia capillaris f. capillaris
• Tillandsia lanuginosa Gillies ex Baker.
• Tipos de Género Se pueden dividir en variedades “verdes”, y variedades
“grises” (Butcher, 1984).
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espigada de brácteas imbricadas (puestas una sobre otra) de color rosado desde surgen las
flores de color azul violeta. Generalmente florece en verano o el otoño. Existen dos especies:
Tillandsias Verdes: Estás requieren un clima templado lluvioso y crecen por lo general
en la sombra, ya sea en la tierra o sobre árboles. Las variedades verdes carecen de tricomas.
Tillandsias grises: Estás especies crecen en áreas sub-húmedas o sub-áridas con alta
humedad del aire. Prefieren el sol, por lo cual se encuentran en los pisos altos del bosque o en
las rocas. Muchas de estas variedades son epifitas. Este tipo de plantas no tienen raíces (Soria
Nicolás, 2007).
El color gris, se da porque sus tallos y hojas están cubiertos por pequeñas escamas
(tricomas).
Formas de Cuidado, cultivos y usos: Las “Tillandsias” son plantas de interior, se
desarrolla bien en casas o en invernaderos. En el caso de las raíces, estas solo son utilizadas
como anclajes. En el caso de la luz solar, es preferible que se le administre luz indirecta o
difusa. Las Tillandsias deben de expuestas cerca de las ventanas, para que captar luz solar. La
temperatura ideal va de 32°C a 10°C. Son sensibles a las heladas. En el caso de la
manutención, hay que rociarlas con fertilizantes de plantas de interior, una vez cada dos
semanas en primavera y en verano, y una vez cada cuatro semanas durante el otoño o invierno
(Soria Nicolás, 2007).
El clavel del aire pertenece al Género Tillandsia, que contiene aproximadamente 500
especies. Es una planta epífita que cumple su ciclo de vida ubicándose sobre otras plantas,
especialmente leñosas y los géneros en que se los encuentra más frecuentemente son: Cedrus,
Pinus, Cupressus, Gingkgo, Quercus, Prunus. Se extiende desde el sur de los Estados Unidos
hasta la Patagonia Argentina sobre todo de Tillandsia aeranthos, T. recurvata y T. usneoides,
T. Capillaris R.& P., algunas no están determinadas y se estima que modificaciones del
ambiente crearon condiciones favorables para su reproducción. El modo de asociación de
Tillandsia spp., con las especies hospedantes es considerado por la mayoría de los botánicos
como un caso de comensalismo, sin afectar de modo alguno al patrón (la especie hospedante).
No se conocen estudios que confirmen un verdadero flujo de nutrientes desde el patrón al
clavel del aire hospedado, y la observación de que frecuentemente especia de Tailandia spp.
se desarrollan sobre ramas secas, cables de luz, teléfono y otras estructuras inertes, permiten
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poner en duda que ello ocurra, tanto como que signifique un efecto detrimental sobre el
hospedante vivo la Tillandsia recurvata y T. aeranthos como verdaderas malezas epífitas que
compiten por la luz con sus hospedantes. Por otra parte, (Johansson et al.1974) estableció que
estas especies penetran los vasos de conducción de los patrones mediante pelos radicales o
bien compartiendo un micelio con el hospedante (Abedini, et al., 1980).
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abierta diariamente en intervalos de varios días y durante semanas o meses. Sin embargo, la
mayoría de especies presentaron un patrón intermedio. Lo anterior sugiere que especies de
hábitat sucesión temprana (C. nutans y G. monostachya) tenderían a una menor variación
genética debido a una mayor frecuencia de autogamia. En contraste, el patrón mostrado por T.
fasciculata sugiere una mayor variación genética debido a una mayor dependencia de
polinizadores. El aparente potencial de auto gamia y auto compatibilidad en bromelias por sí
solos no son suficientes para hacer una inferencia directa sobre sus sistemas reproductivos.
Estudios genéticos en proceso serán utilizados para corroborar nuestras hipótesis sobre este
aspecto de la ecología de bromelias (Cascante A. Oostermeijer, 2001).
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antrópica. Por otra parte, Larrea y Werner (2010) demostraron cambios considerables y
rápidos hacia taxones más xerotolerantes en las comunidades de epífitas del bosque montano
húmedo en Ecuador con diferentes intensidades del uso de suelo y al cambio florístico
principalmente a la variación en el microclima hacia niveles más altos de luz y estrés hídrico
asociados a la perturbación del dosel. Por lo tanto, sus resultados apoyan la idea de que la
composición florística de epífitas junto con el conocimiento de sus adaptaciones morfo eco
fisiológicas, puede ser un indicador más sensible de la perturbación humana que el simple
valor numérico de la riqueza de especies (Krömer et al. 2014).
Los metales están clasificados entre los grupos de contaminantes antropogénicos más
peligrosos debido a su toxicidad y persistencia en el ambiente, por lo que la evaluación de la
deposición metálica atmosférica es de vital importancia. Sin embargo, el riesgo potencial que
representan esos contaminantes, se calcula solamente como una función de su concentración
en la fase del vapor, sin tomar en consideración el tiempo de exposición, biodisponibilidad y,
efectos antagónicos y/o sinérgicos (Lowry, 1995). En contraste con los métodos físicos y
químicos convencionales, los métodos biológicos permiten la evaluación directa del potencial
tóxico de los contaminantes del aire, de manera que los datos biológicos pueden ser usados
para estimar el impacto ambiental sobre otros organismos incluyendo humanos.
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contaminante con efecto oxidante. Los resultados no tomaron en cuenta muchas zonas de la
ciudad de La Paz que presentan comunidades de líquenes que pueden ser utilizadas como
indicadoras para monitorear las inmisiones. Estos intentos han sido sólo ejercicios y no se ha
completado todo el procedimiento (Canseco et al. 2006).
Debido a que los organismos epifitos reciben la mayor parte de sus nutrientes a partir
de la atmósfera, son más susceptibles a los factores atmosféricos y, por lo tanto, constituyen
sustratos ideales para ser utilizados como bioindicadores. Entre éstos, resaltan los epifitos
folícolas, ya que dependen, todavía en un mayor grado, de los factores atmosféricos, porque
su unión al sustrato es menos pronunciada para que la superficie foliar permanezca intacta,
varios autores iniciaron el mapeo de las especies aéreas presentes en las grandes ciudades de
todo el mundo, diferenciando zonas de distinto grado de salubridad del aire mediante la
presencia o ausencia de ciertas especies de aéreas o por la estructura de los talos de las
especies presentes. (Hawksworth D., 2005).
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sulfatos, nitratos, y metales como As, Cd, Fe, Zn, Cr, Cu, Al, V, Ni y Pb (WHO, 2003;
Wichmann y Peters, 2003). La presencia de cadmio y níquel como contaminante del aire está
relacionada con la utilización de metales como el plomo y zinc en refinado y fabricación de
sustancias. Si bien es cierto que unos 27 metales pesados se consideran tóxicos en mayor o
menor proporción, los que se valoran con mayor peligro en el aire son: mercurio, níquel,
cadmio, plomo, berilio y antimonio, asociados generalmente a fuentes industriales. Las
partículas, solas o en combinación con otros contaminantes (por ejemplo metales) representan
un peligro grave para la salud, ya que ingresan al cuerpo humano por las vías respiratorias y
pueden tener un efecto tóxico. Los metales pesados en el aire se catalogan como
contaminantes primarios, por ser sustancias que provienen directamente de las emisiones
(Martínez y Guzmán 2016).
ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIÓN
Aplicaciones principales: Análisis cuantitativo de precisión para un metal dado.
Fenómeno atómico: Absorción de la línea atómica característica
Ventajas en el análisis cualitativo: No es aplicable
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Una cantidad medida de la muestra se introduce como un bolo de líquido o de sólido. La señal
espectral en este caso alcanza un valor máximo y luego disminuye a cero. La desolvatación se
lleva a cabo al aumentar la temperatura hasta el valor en el que tiene lugar la evaporación
rápida del disolvente. A continuación, la temperatura del aparato se aumenta drásticamente de
tal forma que las otras etapas de la atomización se producen en un breve período de tiempo.
En estas circunstancias la señal espectral adquiere la forma de un pico bien definido (Skoog
D. A., 2008).
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electrones externos, existen los estados excitados singulete y triplete con diferentes energías.
A medida que aumenta el número de electrones fuera de las capas más internas, los diagramas
de niveles de energía se hacen cada vez más complejos. De esta forma, con tres electrones
externos, se produce una división de los niveles de energía en dos y cuatro estados; cuando
hay cuatro electrones externos existen estados singulete, triplete y quintuplete. Aunque la
correlación entre los espectros atómicos y los diagramas de niveles de energía, para elementos
como el sodio y el magnesio, es relativamente sencilla y susceptible de interpretación teórica,
no se puede decir lo mismo en el caso de los elementos pesados, y particularmente para los
metales de transición (Skoog D. A., 2008).
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1.6.2.2.3. MONOCROMADORES
Tienen como función seleccionar la línea de absorción, separándola de las otras líneas
de emisión emitidas por el cátodo hueco. Los aparatos comerciales suelen venir equipados con
monocromadores del tipo de prima o red de difracción.
1.6.2.2.4. DETECTORES
Miden la intensidad de la radiación antes y después de la absorción por la muestra. A
partir de los valores obtenidos se podrá calcular la radiación absorbida. En los aparatos
comerciales se emplean tubos fotomultiplicadores.
1.6.2.2.5. MODULACIÓN
La llama emite energía continuamente a longitudes de onda no deseadas, produciendo
interferencia y una gran inestabilidad en las lecturas. Los detectores que se utilizan son
sensibles a determinadas frecuencias, ignorando las señales continuas ocasionadas por la
llama. Por ello, se modula el sistema de alimentación de las lámparas a la misma frecuencia
que el tubo fotomultiplicador (Skoog D. A., 2008).
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1.6.2.4.1. INTERFERENCIAS
Se llaman interferencias a la influencia que ejerce uno o más elementos presentes en la
muestra sobre el elemento que se pretende analizar. La clasificación de los distintos tipos de
interferencias se muestra a continuación:
• Interferencias físicas:
Efectos causados por las propiedades físicas de la muestra en disolución.
• Interferencias espectrales:
Producida por radiaciones que alcanzan al detector a una longitud de onda muy próxima del
elemento que se investiga.
• Interferencias químicas:
Influencia que ejercen unos elementos sobre otros por formar, entre ambos, compuestos
estables.
• Interferencia por efecto de matriz:
Debidas a la influencia que tiene el entorno que rodea a los átomos en estado fundamental que
se pretende analizar.
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1.6.2.4.2. MÉTODOS
Para el análisis de una muestra, lo primero que habrá que hacer será poner las
condiciones específicas del elemento que vamos a analizar. Estas condiciones vienen
especificadas por el fabricante.
Una vez elegidas las condiciones de trabajo para el elemento en cuestión habrá que
calibrar el aparato. Parta ello se pueden seguir dos procedimientos, la realización de una curva
de calibrado o bien el método de adición.
• Curva de calibrado.
Se utilizan soluciones patrones, que contienen el elemento a determinar de
concentraciones conocidas. Se representan la absorbancia de cada solución patrón frente a la
concentración. Se procura trabajar en el intervalo lineal de la curva. Una vez obtenida la curva
patrón, se atomiza la muestra problema y se mide la absorción de la misma, utilizando
idénticas condiciones a las usadas cuando se preparó la curva patrón. De la medida de la
absorbancia del problema se puede determinar su concentración a partir de la curva de
calibrado por extrapolación.
• Método de adición.
Este método se emplea cuando existen interferencias. El método consiste en añadir un
volumen conocido de la muestra problema a cuatro matraces aforados. Al primer matraz no se
le añade nada. Al segundo se le añade por ejemplo 1ppm. Al tercer matraz se le añade un
volumen doble del mismo patrón, de forma que contenga una concentración añadida de 2ppm.
Y al cuarto matraz se le añade 3ppm.
Una vez hecho esto, se procede a realizar las medidas de absorbancia de cada matraz.
El primer matraz dará una lectura, el segundo matraz dará la misma lectura que el anterior más
la señal propia de 1ppm. Extrapolando sobre el eje negativo de las X se encuentra el valor de
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la concentración de la muestra desconocida. Para que este método sea válido se debe obtener
una curva calibrada perfectamente recta (Skoog D. A., 2008).
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• Aguas naturales:
Son las aguas que se encuentran en la naturaleza (aguas potables, de ríos y lagos, de
mar, las aguas subterráneas y las mineromedicinales). En este grupo se analizan con facilidad
los elementos mayoritarios. En el caso del agua de mar, para la determinación de los
elementos minoritarios será necesaria la extracción y utilización de la cámara de grafito.
• Aguas residuales:
Se trata de los residuos acuosos vertidos por las distintas fábricas, ciudades y
poblaciones. La preparación de la muestra suele reducirse a una simple filtración o
centrifugación.
• Agua ultra pura:
Son aquellas cuyo grado de pureza es muy elevado. Los niveles de concentración son
tan bajos que prácticamente se necesita la utilización de la cámara de grafito.
En el análisis de las trazas el analista debe estar muy alerta a posibles fuentes de
contaminación de la muestra tales como los recipientes de almacenamiento, impurezas en los
reactivos y solventes utilizados en el pre tratamiento. Una atención especial debe darse a
minimizar la contaminación por el polvo del lugar de trabajo, por el roce involuntario con la
piel o la ropa del analista y por el material de vidrio del laboratorio.
1.6.3.1 INSTRUMENTACIÓN
Los instrumentos para trabajar con emisión de llama son similares a los instrumentos
de absorbancia de llama, excepto por el hecho de que en los primeros la llama actúa como
fuente de radiación.
En la espectrofotometría de emisión de llama, la muestra en solución es nebulizada e
introducida dentro de la llama, en donde es desolvatada, vaporizada y atomizada, todo esto en
rápida sucesión. Subsecuentemente, los átomos y las moléculas se elevan a estados excitados
por colisiones térmicas con los constituyentes de los componentes de la llama parcialmente
quemados.
Durante su regreso a un estado electrónico basal o más bajo, los átomos y moléculas
emiten la radicación característica de los componentes de esa muestra. La luz emitida pasa por
un monocromador que aísla la longitud de onda específica para el análisis deseado. Un
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1.6.4.1. EL PLASMA
Un plasma es una mezcla gaseosa conductora de la electricidad que contiene una
concentración significativa de cationes y electrones. En el plasma de argón que se utiliza en
los análisis de emisión, los iones de argón y los electrones son las principales especies
conductoras, aunque los cationes de la muestra también están presentes en menor cantidad.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
Los iones argón, una vez que se han formado en un plasma, son capaces de absorber suficiente
potencia de una fuente externa, como para mantener un nivel de temperatura en el que la
ionización adicional sustenta el plasma indefinidamente (Skoog D. A., 2008).
1.6.4.2. LA ANTORCHA
La fuente de alimentación empleada para mantener un nivel de temperatura de 10000K
es la de plasma acoplado inductivamente (ICP) denominada antorcha.
La fuente de plasma acoplado inductivamente consiste en tres tubos concéntricos de
cuarzo a través de los cuales fluye una corriente de argón con un caudal total comprendido
entre 11 y 17 L/min.
El diámetro del tubo más grande es aproximadamente de 2.5cm. Rodeando la parte
superior de este tubo se encuentra una bobina de inducción refrigerada por agua, alimentada
por un generador de radiofrecuencia capaz de producir una potencia de 2kW a unos 27MHz.
La ionización del argón que fluye se inicia por medio de una chispa que proviene de
una bobina Tesla (Skoog D. A., 2008).
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Otro método que se puede utilizar para la introducción de muestras líquidas y sólidas
en un plasma es la vaporización electrotérmica. En este caso, la muestra se vaporiza en un
horno el cual sólo se utiliza para la introducción de la muestra y no para la atomización de la
muestra (Skoog D. A., 2008).
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Desventajas:
Equipo más caro.
Mayor coste de operación que la espectroscopia de absorción atómica.
Menor precisión que la espectroscopia de absorción atómica.
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Ni en leche materna.
B, P y S en huesos.
Geología:
Las aplicaciones van desde los elementos mayoritarios, minoritarios y las trazas.
Medio ambiente y aguas:
Se requiere un tratamiento previo de la muestra con digestiones ácidas, microondas... Incluyen
análisis de suelo, sedimentos, tejidos animales y vegetales, además de varios tipos de aguas.
Metales:
Una dificultad asociada es el gran número de interferencias espectrales de algunos metales.
Aun así, se obtienen buenos resultados (Skoog D. A., 2008).
1.7.1. INTRODUCCIÓN
Tradicionalmente los aditivos para combustibles han sido usados como una
herramienta para realzar características naturales de los hidrocarburos y asegurar el correcto
funcionamiento de los motores.
Las tendencias a elaborar combustibles "Más limpios" han incidido en su composición
química, limitando la necesidad de emplear aditivos de aplicaciones tradicionales, tales como:
Antioxidantes
Deactivadores metálicos
Anticorrosivos
Los cuales, en caso de continuar siendo necesaria su incorporación, ven declinar el
nivel de concentración requerido para proteger al combustible durante las etapas de
almacenaje y distribución. Paralelamente las presiones ambientalistas han marcado que, en los
últimos años, los aditivos para combustibles, adoptaran un nuevo rol: el de controlar y
modificar los depósitos en el sistema de inducción del mismo y la cámara de combustión,
actuando en forma indirecta sobre el nivel de toxicidad de los gases de emisión y la vida útil
de los motores. La disminución de las emisiones de particulado diésel es también un objetivo
de los investigadores de las químicas de los aditivos. Según información reciente estarían
próximos a obtenerse, en forma comercial, productos que al formar parte de la formulación
del combustible, actuarían como "promotor/activador" modificando el comportamiento del
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de "veneno" para los metales que conforman el mismo. La iniciativa de los EE.UU. fue
seguida por distintos países y hoy Europa se encuentra en un valor aproximado de
comercialización del 60% de gasolina unleaded, con una distribución desigual entre los
distintos países (mapa anterior). Esta evolución de la comercialización de naftas sin plomo ha
permitido el ingreso y difusión de la utilización de convertidores catalíticos, los cuales, a fines
de 1996 se ubicaron en los valores definidos en el siguiente gráfico (Kepler 2010).
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modelos 1997 que sea evitado el uso de gasolinas con aditivo MMT, nombre comercial del
aditivo antidetonante a base de Manganeso, siguiendo el camino anteriormente iniciado por la
General Motors y Chrysler. En dichos manuales, que por supuesto también mencionan como
combustible apto las gasolinas RFG de CARB, Ford establece que sus vehículos han sido
diseñados para operar con determinados tipo de naftas y agrega que los daños que se pudieran
ocasionar por la utilización de productos que no han sido recomendados en los mismos,
estarán fuera de los alcances de las garantías de la unidad.
Esto anterior lo fundamenta en el hecho que aún en aquellos casos que el vehículo
pueda funcionar adecuadamente, se vería afectado el sistema de tratamiento de gases de
emisión.
Paralelamente el nuevo Ministro de Medio Ambiente de Canadá introdujo la
prohibición del uso de derivados de manganeso en las gasolinas luego de haber sido
autorizado por aproximadamente 19 años. Las restantes compañías han logrado mantener y/o
aumentar los números de octanos Research y Motor a través del empleo de corrientes ricas en
hidrocarburos de alta calidad antidetonante, como son los cortes de reformado, isomerizado y
alquilado y especialmente los derivados oxigenados, del tipo de los éteres: Metil Ter Butil
Eter (MTBE) y Ter Amil Metil Eter (TAME) (Kepler 2010).
YPF S.A. ha puesto en marcha, las unidades de Isomerización, Alquilación y TAME,
las cuales en conjunto con las dos unidades anteriores de MTBE permiten la elaboración de
naftas, de altos valores octánicos, equilibradas composicionalmente, en cuanto a sus
contenidos de hidrocarburos aromáticos y benceno y totalmente libres de derivados metálicos.
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(sulfatos, nitratos, amonio), óxidos de silicio, otros óxidos, metales (plomo, arsénico, cadmio,
mercurio) y radionúclidos (Rivera E. 2012).
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1.8.4.2. EFECTOS DE Pb
El plomo es un metal neurotóxico que también se acumula en el cuerpo y causa daños
a los órganos, como los riñones, el hígado, el cerebro y los nervios. La exposición a altos
niveles causa daños cerebrales graves, como retraso mental, trastornos de conducta, problemas
de memoria y cambios de humor. El deterioro del desarrollo neurológico en los niños es el
efecto más crítico. La exposición en el útero, durante la lactancia o en la primera infancia
puede conllevar estos problemas de salud. El plomo se acumula en el esqueleto, que es
potencialmente peligroso durante el embarazo. Por lo tanto, la exposición previa de una mujer
antes del embarazo es importante. La exposición por inhalación puede ser significativa cuando
los niveles de Pb en el aire son altos. Las exposiciones elevadas se deben generalmente a
fuentes locales en lugar de ser el resultado del transporte a larga distancia. Muy a menudo, la
comida es la fuente predominante de absorción de Pb en la población. Sin embargo, la
contaminación atmosférica puede contribuir significativamente al contenido de Pb en los
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
cultivos, a través de la deposición directa. Aunque la absorción a través de las raíces de las
plantas es relativamente limitada, el aumento de los niveles de Pb en los suelos a largo plazo
es motivo de preocupación y debe abordarse debido a los posibles riesgos para la salud de la
exposición a bajos niveles de Pb. El plomo se bioacumula y afecta negativamente tanto a los
sistemas terrestres y acuáticos. Al igual que con los seres humanos, los efectos sobre la vida
animal incluyen problemas de reproducción y cambios en la apariencia o el comportamiento
(Rivera E. 2012).
1.8.4.2. EFECTOS DE Hg
El mercurio puede dañar el hígado, los riñones y el sistema digestivo y respiratorio.
También puede causar daños cerebrales y neurológicos y perjudicar el crecimiento. El
metilmercurio es un potente neurotóxico. Los niños no nacidos son el grupo de población más
vulnerable. El mercurio se bioacumula y afecta negativamente tanto a los sistemas terrestres y
acuáticos. Puede afectar a animales de la misma manera que a los seres humanos y es muy
tóxico para la vida acuática (Rivera E. 2012).
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
CAPITULO 2
2. OBJETIVOS
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CAPITULO 3
3 METODOLOGÍA.
40
Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
El muestreo fue definido por los lugares con mayor afluencia de la especie en estudio
ya que dentro de toda el área urbana la especie no se encuentra ampliamente distribuida en
árboles y claves de teléfono.
Se procedió a seleccionar especies entre jóvenes y adultas (ver Fotografía 4 del
Anexo C) de las ramas de los árboles que estaban expuestas a una altura aproximada de 2,50
a 3,00 metros con respecto al suelo.
Se las coloco en frascos herméticamente cerrados tomando como datos referenciales la
hora y la fecha.
Fuente: https://www.google.com.bo/maps/
Mapa 3.1: Avenida Arce en la plaza Bolivia (MO-1) punto en rojo sitio de muestreo.
41
Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
Fuente: https://www.google.com.bo/maps/
Mapa 3.2: Avenida 20 de Octubre en la plaza Avaroa, (MO-3), punto en rojo sitio de muestreo.
Fuente: https://www.google.com.bo/maps/
Mapa 3.4: Plaza Estadio entre avenida Saavedra y Claudio pinilla (MO-2), punto en rojo sitio de
muestreo.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
Fuente: https://www.google.com.bo/maps/
Mapa 3.5: Avenida del ejecito frente al teatro al aire libre, (MO-4) punto en rojo sitio de muestreo.
ABSORCIÓN ATÓMICA.
3.4.1.1. EQUIPOS
Espectrofotómetro absorción atómica, marca PERKIN ELMER AAnalyst 700, con
horno de grafito, ver foto del anexo 5.
Espectrofotómetro absorción atómica, marca PERKIN ELMER 3110 con llama, ver
foto del anexo 6.
Espectrofotómetro de fluorescencia atómica, marca BROONKS RAD Model III, ver
foto del anexo 7.
Digestor horno de microondas (Sistema de reacción por microondas), Marca ANTON
PAAR, Multiwave 3000, ver foto del anexo 8.
3.4.1.2. MATERIALES
7 Matraces aforados de 100 mL.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
1 Balanza analítica.
1 Pizeta de 500 ml.
3 Vasos de precipitados de 50 mL.
1 Varilla de vidrio
1 Micropipeta de 10-100 μL.
1 Micropipeta de 100-1000 μL.
Tubos de vidrio para digestión.
Tubos de plástico Falcon de 15 mL.
Mortero de agata provisto de su pilón.
Bolsas tipo siplock.
3.4.1.3. REACTIVOS
Solución madre de 1000 ppm de Plomo (Perkin Elmer).
Solución madre de 1000 ppm de Cadmio (Perkin Elmer).
Solución madre de 1000 ppm de Mercurio (Perkin Elmer).
Solución madre de 1000 ppm de Arsénico (Perkin Elmer).
Solución madre de 1000 ppm de Manganeso (Perkin Elmer).
Solución de dicromato de potasio 1000 ppm (Perkin Elmer).
Ácido nítrico concentrado.
Ácido nítrico al 0,2 %.
Agua oxigenada de 30 Volúmenes.
Agua mili-Q.
Agua bi destilada.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
CAPITULO 4
4. RESULTADOS Y DISCUSIONES
4.1. RESULTADOS
Plaza Estadio
Plaza Liviano y
MO-3 entre avenida Comercial Alta 10
redonda pesado
Saavedra y
Claudio pinilla
Avenida del Comercial / Avenida Liviano y
MO-4 Alta 10
ejecito Industrial ancha pesado
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
Ecuación: 𝑦 = 0,0053 𝑥
Coeficiente de correlación: 𝑅 2 = 0,999
Como el R2 es de 0,999 se tienen datos confiables.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
Ecuación: 𝑦 = 0,0055𝑥
Coeficiente de correlación: 𝑅 2 = 0,9990
Como el R2 es de 0,9990 se tienen datos confiables.
Ecuación: 𝑦 = 0,2035 𝑥
Coeficiente de correlación: 𝑅 2 = 0,9984
Como el R2 es de 0,9984 se tienen datos confiables.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
Ecuación: 𝑦 = 0,0961 𝑥
Coeficiente de correlación: 𝑅 2 = 0,9978
Como el R2 es de 0,9978 se tienen datos confiables.
Muestra limpia Muestra NO Limpia Diferencia con
Concentración Concentración respecto a la muestra
Muestra mg de Mn/Kg Muestra mg de Mn/Kg no limpia
MO-1 L 28,29 ± 0,183 MO-1 SL 63,18 ± 0,019 34,89
MO-2 L 56,64 ± 1,637 MO-2 SL 97,58 ± 4,709 40,94
MO-3 L 60,18 ± 1,443 MO-3 SL 121,74 ± 5,329 61,56
MO-4 L 65,85 ± 0,099 MO-4 SL 130,98 ± 0,843 65,13
Tabla 4.1.5: Resultados de manganeso presente el Tillandsias comparando entre muestras que fueron limpiadas
y muestras que no fueron limpiadas.
Nota: La evaluación y el control de calidad se realizó de acuerdo al SOP PRO-04.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
Metales encontrados
mg /Kg
Hg Cd As Pb Mn
Lima Perú (Bedregal P., Mendoza P., 2008) 0,2 50 10 290
México (Límites
NORMA OFICIAL MEXICANA
permisibles máximos 17 39 41 300
NOM-004-SEMARNAT-2002
en biosolidos)
De la siguiente tabla de datos se puede construir los siguientes gráficos para observar
la relación que existe entre los contaminantes mayoritarios encontrados según el sitio de
muestreo y el tipo de tratamiento que se le dio a la muestra.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
0-5
10
0
Pb
MO-1 L
MO-2 L As
MO-3 L
MO-4 L Cd
MO-1
SL MO-2
MO-3 Hg
SL
MO-4 SL
Sitio de muestreo y tratamiento SL
Grafico 4.2.1: Comparación de los contaminantes encontrados en menor cantidad y el tipo de tratamiento a la
muestra en cada sitios de muestreo.
100-150
150
Concentraciones (ppb)
50-100
100
50
Mn 0-50
Pb
0
As
MO-1 L
MO-2 L Cd
MO-3 L
MO-4 L
MO-1
MO-2 Hg
SL MO-3
SL MO-4
SL
Sitio de muestre y tratamiento SL
Grafico 4.2.2: Relación de metales pesados encontrados con el contaminante mayoritario según el sitio y tipo de
tratamiento a la muestra.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
CAPITULO 5
5. CONCLUCIONES Y RECOMENDACIONES
5.1. CONCLUSIONES
La Tillandsias capillaris R. & P., mostro ser indicador adecuado para medir Pb, Cd,
As, Mn y Hg. Aunque estos resultados son preliminares, proporcionan una idea de estudio
ampliado a esta especie que puede tener la exposición prolongada de un organismo en los
sitios estudiados
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
Los análisis revela que existen zonas que son de mayor contaminación por metales
pesados, este es el caso de los puntos dos y tres ubicados en la avenida 20 de octubre en la
plaza Avaroa y la plaza del estadio y Avenida Saavedra respectivamente los cuales dieron
elevadas concentraciones de metales con respecto a los otros puntos de muestreo, estos puntos
presentan trafico vial constante y esta es la razón por la cual los elementos hallados se
encuentran en mayor proporción con respecto a los demás puntos.
5.2. RECOMENDACIONES
Se debe monitorear la distribución de las Tillandsias capillaris R. & P., dentro de las
ciudades con alto índice de contaminación por metales pesados y otros elementos como
material particulado que son depositados en el ambiente atmosférico de la ciudad de La Paz.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
áreas rurales y verificar el impacto de la calidad del aire sobre seres habitantes a través de los
estudios de los contaminantes atmosféricos.
Se debe tomar políticas de monitoreo de la calidad del aire con esta especie y
establecer los límites máximos y permisibles de contaminantes metálicos en al área urbana de
la Cuidad de La Paz, principalmente en áreas muy pobladas y con alto tráfico vehicular.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
CAPITULO 6
BIBLIOGRAFÍA
Abedini, W.I., D.,O., Caldiz, Y I., Andia. :1980, Una Maleza de Especies Forestales.
Comunicación presentada en: IV Congreso Forestal Argentino, 27-31 Octubre, Goya,
Corrientes, Argentina.
Alfredo Cascante Marín, Gerard Oostermeijer Jan Wolf, Hans den Nijs. Institute for
Biodiversity and Ecosystem Dynamics (IBED), Universiteit van Amsterdam.
Barthlott, W., V. Schmit-Neuerburg, J. Nieder y S. Engwald. 2001. Diversity and
abundance of vascular epiphytes: a comparison of secondary vegetation and primary montane
rain forest in the Venezuelan Andes. Plant Ecology 152: 145-156.
Benavides, A. M., J. H. D. Wolf y J. F. Duivenvoorden. 2006. Recovery and
succession of epiphytes in upper Amazonian fallows. Journal of Tropical Ecology 22: 705-
717.
Bedregal P., Mendoza P., Ubillús M., Torres Blanca Hurtado Jazmín, Maza Ily,
Espinoza Rosa 2008, El uso de Usnea sp. Y Tillandsia capillaris, como Biomonitores De La
Contaminación Ambiental En La Ciudad De Lima, Perú Revista De La Sociedad Química Del
Perú, Vol. 74 N°4, Octubre – diciembre 2009.
Benzing, D., H. and J. Seemann. :1978, Nutritional piracy and host decline: a new
perspective on the epiphyte relationship.Selbyana 2.
Brighigna L., Ravanelli M., Minelli A. y Ercoli L., 1997. The use of an epiphyte
(Tillandsia caput medusae morren) as bioindicator of air pollution in Costa Rica. Sci Total
Environ. 198: 175-180.
Canseco A., Anze R., Franken M. 2006 Comunidades de líquenes: indicadores de la
calidad del aire en la ciudad de La Paz, Bolivia, ACTA NOVA; Vol. 3, Nº 2, junio 2006.
Claver, F., K., J., R., Alaniz., and D., O., Caldiz.: 1983, Tillandsia spp.: Epiphytic
weeds of tres and bushes. Forest Ecology and Management, 6.
D. A. Skoog, F. J. Holler, S. R. Crouch, Principios de análisis instrumental, 6ta
edición, Cengage Learning, México, 2008.
De Temmerman L., Bell J.N.B., Garrec J.P., Klumpp A., Krause G.H.M. y Tonneijck
A.E.G., 2004. Biomonitoring of air pollution with plants-considerations for the future. In:
58
Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
Klumpp A., Ansel W. y Klumpp G. (Eds.), Urban Air Pollution, Bioindication and
Environmental Awareness. Cuvillier Verlag, Göttingen, pp. 337-373.
Froehlich A. (2006). A look at Willamette valley air quality using lichen communities
as bioindicators. Research Based Learning 49, 377–389.
Izco J. (2000). Botánica. McGraw–Hill Interamericana, Madrid. 906 pp.
Johansson, D.:1974 Ecology of vascular epiphytes in West African rain forest. Acta
Phytogeographica Suecica 59, Upsala.
Krömer T., José G. García-Franco y Tarin Toledo-Aceves.2014 Vascular epiphytes as
bioindicators of forest quality: anthropogenic impact on their diversity and composition29:
605-623.
Krömer, T., S. R. Gradstein y A. Acebey. 2007. Diversidad y ecología de epífitas
vasculares en bosques montanos primarios y secundarios de Bolivia. Ecología en Bolivia 42:
23-33.
Larrea, M. L. y F. Werner. 2010. Response of vascular epiphyte diversity to different
land use intensities in a neotropical montane wet forest. Forest Ecology and Management 260:
1950-1955.
Lowry L.K., 1995. Role of biomarkers of exposure in the assessment of health risks.
Toxicol Lett. 77: 31-38.
Lugo, A. E. y F. N. Scatena. 1992. Epiphytes and climate change research in the
Caribbean: a proposal. Selbyana 13: 123-130.
María de los Ángeles Cuadros, Ángela Canseco 2007 , Bioindicadores en la detección
de la contaminación atmosférica en Bolivia, Revista Virtual REDESMA, Unidad de Calidad
Ambiental, UMSA].
Martínez M. Varona, Guzmán M. Vila (2016), Presencia de metales pesados en
material particulado en aire. Estación de monitoreo INHEM, Centro Habana. Instituto
Nacional de Higiene, Epidemiologia y Microbiología (INHEM), La Habana, Cuba.
MOLINA, V. B. (2012). «Non Carcinogenic Health Risks of Heavy Metals in Mudfish
from Laguna Lake», en Sci. Diliman., 24 (1): 23-32, 2012.
Nadkarni, N. M. y R. Solano. 2002. Potential effects of climate change on canopy
communities in a tropical cloud forest: an experimental approach. Oecologia 131: 580-586.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
ANEXOS
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
Fotografía 1: Avenida 20 de Octubre en la plaza Avaroa. in situ. Foto: Fernando Apaza, 2016.
Fotografía 2: Avenida Arce en la plaza Bolivia. in situ. Foto: Fernando Apaza, 2016.
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
Curva patrón de Pb
0.6
y = 0.0055x - 0.0079
0.5
R² = 0.9992
0.4
Absorbancia
0.3
Absorbancia
0.2
Linear (Absorbancia)
0.1
0
0 20 40 60 80 100 120
-0.1
Concentración ppb
Curva patrón de As
0.6000
0.5000
Absorbancia
0.4000
0.3000
Series1
0.2000
y = 0.0054x Linear (Series1)
0.1000
R² = 0.999
0.0000
0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 120.00
Concentración ppb
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Tillandsias como bioindicadores de la contaminación por metales en La Paz
Curva patrón de Cd
0.120
0.100
Absorbancia
0.080
0.060 y = 0.2035x
R² = 0.9984
0.040
Curva patrón de Pb
0.020
Ajuste
0.000
0.00 0.10 0.20 0.30 0.40 0.50 0.60
Concentración ppm
Curva patrón de Mn
0.250
Absorbancia (A)
0.200
0.150
0.100
0.050 y = 0.0961x
0.000 R² = 0.9978
0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50
Concentración (ppm)
Curva patrón de Hg
0.5
0.4
Absobamcia
0.3
0.2 Series1
Linear (Series1)
0.1
y = 0.0954x - 0.0008
0 R² = 1
0 1 2 3 4 5
Concentraci{on (mg/L)
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