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Los caldos suelen dar soluciones transparentes que no necesitan calentamiento ni ninguna
otra manipulación antes de ser llevados al autoclave. Las soluciones con agar sin embargo,
requieren calentamiento casi hasta ebullición con agitación constante y a fuego suave (o a
Baño María o microondas) para lograr su solubilización completa. Se debe observar con
cuidado la solución durante el calentamiento ya que una vez que aparecieron las primeras
burbujas tiende a desbordar por ebullición. Luego los medios se dosifican teniendo en cuenta
el uso que se les dará. Los tubos que contengan estas soluciones que serán esterilizadas en
autoclave deben contener sólo dos terceras partes de su volumen total ocupado por el líquido
para evitar desbordes. Así preparadas las soluciones deben esterilizarse en autoclave (15
minutos a 121 ºC). Una vez retirados del autoclave, los medios deben dejarse enfriar y
conservarse así refrigerados. Si van a ser utilizados en el momento se colocarán en un baño de
agua a 55 ºC para que se enfríen antes de verterlos sobre las placas. Si sobre la superficie de
una placa recién preparada aparecieran burbujas, éstas pueden eliminarse al pasar
rápidamente la llama del mechero de Bunsen sobre la superficie del agar. Recomendaciones •
Leer cuidadosamente el rótulo del envase. Controlar la fecha de vencimiento. • No introducir
ningún tipo de herramientas en el medio (espátulas, varillas, cucharas, etc.) • Para
homogeneizar el medio agitar tomando el envase desde el cuello del erlenmeyer, evitar las
varillas de vidrio. Universidad Nacional del Nordeste Trabajo Práctico Nº 4 FACULTAD DE
AGROINDUSTRIAS Medios de cultivo Microbiología General- Carrera Farmacia Año 2006 López
Tévez, Leonor; Torres, Carola • Los tubos con tapa a rosca no deben ajustarse completamente
cuando se introducen en el autoclave para su esterilización, la tapa debe quedar con media
rosca. Una vez retirados del autoclave, sí deben ajustarse para minimizar los riesgos de
contaminación. 2- Responda el siguiente cuestionario 1. Según la concentración de este medio,
clasifíquelo de acuerdo a su origen: 5gr. de glucosa, 1 gr. de cloruro de amonio, 1 gr. de fosfato
diácido de potasio, 0,3 gr. de sulfato de magnesio, 5 gr. de extracto de levadura y 1 litro de
agua destilada. 2. Calcule cuántos gramos de agar-agar se necesitan para preparar 125 ml de
medio de cultivo sólido. ¿Qué porcentaje P/V se utilizó? 3. ¿Por qué el medio Mc Conkey
puede ser considerado un medio selectivo y diferencial? ¿Para el aislamiento de qué tipo de
bacterias se lo emplea ? Anote la composición y diga qué función cumple el rojo neutro. 4. ¿En
qué momento se esteriliza un medio de cultivo y por qué? 5. ¿Cual es la fuente de carbono del
medio Citrato de Simmons y del agar nutritivo? ¿Por qué se considera al primero un medio
diferencial y con respecto a qué? 6. Antes del agar-agar se utilizó otro componente para
solidificar los medios de cultivo ¿de qué componente se trata y qué inconvenientes presentaba
su uso? 7. ¿Cuál es el medio de cultivo elegido para el aislamiento de Staphylococcus aureus?
Diga la composición y clasifíquelo de acuerdo a su origen, composición y consistencia. 8. ¿Cuál
es el medio de cultivo que se emplea para el aislamiento de hongos y levaduras?

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