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    Reconocimiento de Las Proteinas Por Precipitacion y Coloración

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    El documento describe métodos para identificar proteínas mediante precipitación y coloración, incluyendo coagulación por calor, precipitación con ácidos fuertes, sales de metales pesados, la reacción de Biuret y la reacción xantoprotéica. Los procedimientos involucran agregar diferentes reactivos como ácidos, sales metálicas o soluciones alcalinas a muestras que contienen proteínas y observar si se produce un precipitado o cambio de color que indique la presencia de proteínas.

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    Reconocimiento de Las Proteinas Por Precipitacion y Coloración

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    El documento describe métodos para identificar proteínas mediante precipitación y coloración, incluyendo coagulación por calor, precipitación con ácidos fuertes, sales de metales pesados, la reacción de Biuret y la reacción xantoprotéica. Los procedimientos involucran agregar diferentes reactivos como ácidos, sales metálicas o soluciones alcalinas a muestras que contienen proteínas y observar si se produce un precipitado o cambio de color que indique la presencia de proteínas.

    Descripción original:

    RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS

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    RECONOCIMIENTO DE LAS PROTEINAS POR PRECIPITACION Y

    COLORACIÓN

    INTRODUCCION
    Las proteínas son elementos vitales para los organismos, encontrándose en
    plantas y animales en una proporción elevada. Hay una gran variedad de
    proteínas y cada una desempeña una función biológica específica que puede ser
    de reserva, de sostén, transporte, estructural, etc. Químicamente las proteínas
    están constituidas por combinaciones complejas de carbono, hidrogeno,
    oxigeno, nitrógeno y otros elementos en menor proporción como son azufre
    cobre y fosforo, debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el agua
    soluciones coloidales que pueden precipitar, formándose coágulos al ser
    calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones
    salinas, ácidos, alcohol, etc. La coagulación de las proteínas es un proceso
    irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados, que al
    actuar sobre la proteína la desorganizan, por destrucción de sus estructuras
    secundaria y terciaria. Esto trae como consecuencia la pérdida de la actividad
    biológica. Este método es utilizado para demostrar la presencia de proteínas:
    albúminas, globulinas, glutelinas y prolaminas etc. La positividad se manifiesta
    por la formación de un coágulo, no se conoce exactamente el mecanismo de
    reacción, se cree que ocurre cierta deshidratación de la molécula proteica, es
    por ello que la formación de este solido fácilmente observable, está asociada a
    la disminución de solubilidad de la proteína. También se puede identificar
    proteínas mediante el uso de sustancias que, al ponerse en contacto con ellas,
    producen una coloración específica, tal es el caso de la Reacción de Biuret.
    Materiales:

    Tubos de ensayo con gradilla Agua destilada

    Huevo Vaso de precipitado Pipeta

    Reactivos:

    Bicarbonato de sodio Ácido tricloro acético al 10 %


    PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

    A. COAGULACIÓN POR CALOR


    Algunas proteínas no presentan ningún cambio de solubilidad por debajo
    de 35° C todas las proteínas sufren u7n fenómeno de desnaturalización
    cuando la temperatura pasa de 35°C y la alteración es total al llegar a
    80°C. La coagulación de proteínas es un proceso irreversible debido a la
    desnaturalización cambiando de su estructura nativa.
    Procedimiento:
     Enumerar dos tubos de ensayo.
     En el tubo N° 1 colocar 5ml de agua destilada (blanca o control)
     En el tubo N° 2 colocar 5ml de albúmina de hubo al 25%.
     Someter progresivamente los tubos en baño María colocando un
    termómetro en la solución albumina.
    B. Precipitación En Frio Con Ácidos Fuertes
    Cuando la solución de las proteínas se acidifica adquieren una carga neta
    positiva. Las proteínas actúan como base y pueden formar sales con los
    ácidos o los aniones que se les añade.

    Procediendo Con Los Ácidos Minerales

     Enumerar dos tubos de ensayo.


     En el tubo numero 1 colocar 2ml de agua destilada y agregar 5
    gotas de HNO3CC. por las paredes.
     En el tubo 2 colocar 2ml de la solución de albúmina al 2% y agregar
    5 gotas de HNO3 CC. Por las paredes.

    Procedimiento Con Ácidos Orgánicos

     Enumerar dos tubos de ensayo


     El tubo numero 1 colocar 2ml de agua destilada.
     Al tubo numero 2 colocar 2ml de solución de albumina al 2%.
     A los tubos agregar 1ml de ácido trícloro acético al 10% mesclar y
    observar.
    C. Precipitación por sales de metales pesados
    Las proteínas en presencia de cationes de metales pesados se forman
    sales de proteínas metálicas que pueden ser solubles según su
    naturaleza metal. Cuando la solución es vuelve alcalina, la carga neta de
    la proteína se hace negativa. También constituye la base de la
    administración de leche o clara de huevo a individuos que hayan ingerido
    algún veneno metálico como la dicloruro de mercurio (HgCl2).
    Procedimiento
     Enumerar tres tubos de ensayo.
     El tubo numero 1 colocar 2ml de agua destilada.
     Al tubo numero 2 colocar 2ml de solución de albumina al 2%.
     Al tubo numero 3 colocar 2ml de solución de albumina al 2%.
     A los 2 tubos agregar 5 gotas de HgCl2 al 5% observar la
    formación de proteinato de mercurio.
     Al tubo numero 3 colocar 5 gotas de (CH3COO)2Pb. Al 10%
    (acetato de plomo) observar.
    D. Reacción De Biuret
    El sulfato alcalino de cobre reacciona con compuestos que contienen dos
    o más enlace peptídico dando un complejo de coloración violeta. La
    intensidad del color obtenido es una medida del número de enlaces
    peptídicos presentes en la proteína. El complejo está formado por enlaces
    de coordinación, donde los pares electrónicos proceden de los grupos
    amino de los aminoácidos de cade3nas polipeptídicas. El nombre de la
    prueba se ha tomado del compuesto de Biuret que da una reacción
    típicamente positiva.
    Procedimiento:
     Enumerar tres tubos de ensayo.
     En el tubo número uno colocar 2ml de agua destilada
     En el tubo numero dos colocar 2ml de solución de fenilalanina al
    2%
     En el tubo número uno colocar 2ml de albumina de huevo al 2%.
     Añadir a cada tubo 2ml del reactivo de Biuret. 6. Mezclar y
    observar.
    E. Reacción xantoprotéica:
    Los aminoácidos que contienen un núcleo aromático forman nitro
    derivados de color amarillo cuando se calienta con ácido nítrico
    concentrado. Las sales de estos derivados son de color naranja.
    Procedimiento:
     1 Enumerar tres tubos de ensayo.
     En el tubo número uno colocar 2ml de agua destilada.
     En el tubo número dos colocar 3ml de albumina de huevo al 2%.
     Añadir a cada tubo 1ml de HNO3CC.
     Observar el precipitado blanco, hervir en baño María hasta que
    tome un color amarillo.
     Alcalinizar con 3ml de solución de NaOH al 40%.

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