MORFOLOGIA DE LAS SEPAS DE MEDIOS SELECTIVOS Y DIFERENCIALES

CHROMOCULT
MORFOLOGIA

El Chromocult es un medio de cultivo selectivo para la detección y recuento de

coliformes y de E.coli. Contiene una combinación de dos sustratos cromogénicos
de manera que se hace posible la detección simultánea de los dos tipos de
bacterias coliformes.

Agar Chromocult para coliformes

El agar para coliformes Chromocult es un medio de cultivo cromógeno selectivo y

diferencial previsto para su uso en laboratorios de microbiología en los que se
analizan alimentos y agua. En un plazo de 24 horas este medio permite la
detección, la diferenciación y el recuento simultáneos de Escherichia coli y
coliformes del agua potable y las matrices de alimentos procesados. Una
selección meticulosa de los inhibidores utilizados en los medios selectivos asegura
el crecimiento y la recuperación de esos microorganismos. El agar Chromocult
para coliformes contiene Tergitol 7 como inhibidor de las bacterias gram positivas,
que no tiene efecto negativo sobre el crecimiento de los coliformes buscados ni de
E.coli. Por consiguiente, el agar Chromocult para coliformes es el medio ideal para
la detección de coliformes o E. coli en agua potable y alimentos procesados.

CARACTERÍSTICAS

• La enzima característica de los coliformes, ß-D-Galactosidasa coliforme No

coliforme 5 coliformes, ß-D-Galactosidasa se fija en el sustrato SalmonGAL y es la
causa del color rojo de los coliformes.

• La enzima característica de los E.coli, ß-D-Glucuronidasa se fija en el sustrato

XGlucuronida y es la responsable de que las colonias positivas E.coli presenten un
azul oscuro o violeta.

PATOGENOSIDAD

El empleo del medio de cultivo Agar Chromocult para la cuantificación de

Escherichia coli, bacteria indicadora de contaminación fecal, se ha utilizado en
ecosistemas acuáticos de clima templado.
HÁBITAT

Hábitat: Tracto gastrointestinal de animales.

CONTAMINACIÓN

Nivel de contaminación fecal

Agar EMB
El agar EMB es un medio de cultivo sólido selectivo y diferencial utilizado para el
aislamiento de bacilos Gram negativos, principalmente de la familia
Enterobacteriaceae, y otros bacilos Gram negativos no exigentes.

FUNDAMENTO

Selectivo

El agar EMB es sutilmente selectivo porque contiene los colorantes analíticos

(eosina y azul de metileno), los cuales actúan como inhibidores, impidiendo el
crecimiento de la mayoría de las bacterias Gram positivas y de algunos bacilos
Gram negativos exigentes.

Sin embargo, este agar tiene el inconveniente de que algunas bacterias Gram
positivas pueden resistir la presencia de las sustancias inhibidoras y crecer como
pequeñas colonias puntiformes incoloras, tal como el Enterococcus faecalis y
algunos Staphylococcus.

También pueden crecer ciertas levaduras, como el complejo Candida albicans,

que dará colonias rosadas muy pequeñas. Inclusive se pueden desarrollar
clamidosporas a partir de esta levadura si la muestra es sembrada por
profundidad.
Diferencial

Por otra parte, el agar EMB también es un medio diferencial, ya que estos
colorantes juntos (eosina y azul de metileno) tienen la propiedad de formar un
precipitado en pH ácido, por tanto sirven como indicadores de la producción del
mismo.

Por ello, las bacterias débilmente fermentadoras de lactosa o sacarosa producen

colonias de color púrpura en 24 a 48 horas. Por ejemplo los géneros Klebsiella,
Enterobacter y Serratia.

Aquellas bacterias que fermentan fuertemente la lactosa, como Escherichia coli, o

la sacarosa, como Yersinia enterocolítica o Proteus penneri, forman un precipitado
negro verdoso, dando un aspecto de brillo metálico característico en estas
especies.

Cabe destacar que si se usa el medio EMB levine (sin sacarosa), Yersinia
enterocolítica y Proteus penneri producirán colonias transparentes.

Las bacterias que no fermentan la lactosa ni la sacarosa se nutren por la

presencia de peptonas, que proporcionan los aminoácidos y el nitrógeno necesario
para el desarrollo bacteriano, y producen colonias transparentes. Por ejemplo, los
géneros Salmonella y Shigella, entre otros.

Así mismo, es importante destacar que el género Acinetobacter puede presentar

colonias de color azul lavanda, aun cuando no es fermentador de lactosa, ni
sacarosa, pero tienen la propiedad de fijar el azul de metileno en su pared celular.
Esto también puede suceder con otras bacterias oxidativas.

PATOGENICIDAD

Este medio es muy útil en el análisis microbiológico de alimentos y aguas, pues es

ideal para la fase completa confirmatoria de la determinación de coliformes, es
decir, para corroborar la presencia de E. coli a partir de caldos EC turbios,
provenientes de la técnica del número más probable (NMP).
CARACTERISTICAS

CARACTERÍSTICAS DEL MEDIO

Placas preparadas: color púrpura.

La esterilización del medio de cultivo reduce el azul de metileno al color naranja. El
color púrpura se restaura por agitación. La presencia de un precipitado en el
medio esterilizado es normal y no debe ser removido, ya que es parte esencial del
mismo.

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.

HABITAT
Habitan de acuerdo a los niveles de actividad levadura

CONTAMINACION
Contaminación microbiana, decoloración, desecación, roturas u otras señales de
deterioro.

SALADO MANITOL
El agar sal y manitol o manitol salado es un medio de cultivo sólido, selectivo y
diferencial. Fue creado por Chapman para el aislamiento de cocos Gram positivos
patógenos, especialmente Staphylococcus aureus.
El agar manitol salado está compuesto por extractos y peptonas de carne bovina,
tripteína, manitol, cloruro de sodio, rojo de fenol y agar.

CARACTERISTICAS
- Las colonias en este caso pueden ser rosadas débil o fuertes, y el medio se
queda del mismo color o cambia a fucsia.

- El agar es la sustancia que proporciona la consistencia al medio.

PATOGENOCIDAD

La degradación del manitol a ácido se correlaciona con la patogenicidad de este

microorganismo y por lo tanto sirve como indicador para esta especie.
Staphylococcus aureus crecerá en este medio y será capaz de virar el indicador
de rojo a amarillo.

QUE CAUSAN

Aislamiento de estafilococos patogénicos a partir de muestras clínicas, alimentos,

productos cosméticos y otros materiales de importancia sanitaria.

También, este medio puede utilizarse para el cultivo de especies halófilas de

Vibrio, si no se dispone de medios apropiados Medio, Medio Marino, aunque
algunas especies pueden no desarrollar.

HABITAT
Piel y mucosas, nasofaringe.

CONTAMINACION
Contaminación microbiana, decoloración, signos de deshidratación, roturas.
BAIRD PARKER
MORFOLOGIA
El agar Baird Parker es un medio de cultivo sólido, selectivo y diferencial. Fue
creado en 1962 para la detección y recuento de estafilococos coagulasa positivos
(Staphylococcus aureus).

Está compuesto por hidrolizado pancreático de caseína, extracto de carne,

extracto de levadura, cloruro de litio, glicina, piruvato sódico, telurito potásico, agar
y emulsión de yema de huevo.

Fundamento
Poder nutritivo
El hidrolizado pancreático de caseína, el extracto de carne y el extracto de
levadura son las fuentes de nutrientes, vitaminas y minerales necesarios para el
desarrollo general microbiano, mientras que el piruvato y la glicina son
compuestos que favorecen el crecimiento específico de Staphylococcus aureus.

Selectivo
El agar Baird Parker es selectivo porque contiene sustancias que inhiben el
crecimiento de la flora acompañante, mientras que favorece el desarrollo de S.
aureus. Los compuestos inhibidores son el cloruro de litio y el telurito de potasio.

Diferencial
Este medio permite diferenciar el S. aureus del resto de los Estafilococos
coagulasa negativos. S. aureus tiene la capacidad de reducir el telurito a teluro
libre metálico negro, formando colonias negras o grises oscuras.

Así mismo, la yema de huevo proporciona los sustratos para evidenciar la

presencia de la enzima lecitinasa y lipasa. S. aureus es lecitinasa positiva y por
tanto se observará un halo claro alrededor de la colonia, indicando que la lecitina
fue hidrolizada.

En este sentido, la aparición en este agar de colonias negras o grises oscuras

brillantes con halo claro alrededor indican presencia de S. aureus.

Si se forma una zona de precipitación es indicativo de que hay actividad de la

lipasa. Algunas cepas de S. aureus son lipasa positivas y otras negativas.
En el caso de que el S. aureus sea lipasa positiva se observará una zona opaca
alrededor de la colonia negra o gris oscura, y luego el halo claro por la acción de la
lecitinasa.

Las colonias de bacterias distintas a S. aureus capaces de crecer en este medio

desarrollarán colonias incoloras o de color marrón, sin halo alrededor.

También se pueden observar colonias atípicas color negro con o sin borde
incoloro, pero sin halo claro. Estas colonias no deben tomarse en cuenta, no
corresponden a S. aureus.

CARACTERISTICAS
- Utiliza la capacidad de los estafilococcus de reducir el telurito a telurio y
detectar la lecitinasa a partir de la lecitina de huevo

- Contiene las fuentes de carbono y nitrógeno necesarias para el crecimiento

La lecitina, el cloruro de litio y el telurito de potasio actúan como agentes
selectivos

POTOLOGIA
Su diagnóstico o detección es de suma importancia, debido a la variedad de
patologías que produce, como intoxicación alimentaria, síndrome de la piel
escaldada, síndrome del shock tóxico, abscesos, meningitis, septicemias,
endocarditis, entre otras.

HABITAT
Este patógeno se puede encontrar en muestras clínicas, aguas, cosméticos y
alimentos crudos o cocidos.

CONTAMINACION
- No se debe calentar el medio después de agregar el telurito y la yema de
huevo ya que se pude producir una contaminación.
- La preparación de la emulsión de yema de huevo y su agregado en el
medio es un paso muy vulnerable de contaminación. Se deben extremar los
cuidados.
AGAR MOSSEL (BACILLUS CEREUS)
Es un bacilo formador de esporas responsables de intoxicaciones alimentarias,
siendo su hábitat natural el suelo, contamina con frecuencia cereales, leche,
especias, entre otros alimentos.

MORFOLOGIA
- Familia de bacillaceae
- Formadoras de esporas
- Pueden ser abióticos extrictos, hasta anaerobios obligados, coco y bacilos,
tanto psicrofilos como termófilos.
- Es gram positivo en los cultivos jóvenes y a medida que envejece puede
verse como gram variable o gram negativo

CARACTERISTICAS

Temperaturas de crecimiento:
Minima están entre 15°C y 20°C
Máxima entre 40°C y 45°C, con una óptima de 37°C
Tiene movilidad

KLEBSIELLA
MORFOLOGIA
Bacterias con y sin cápsula; un tamaño entre 0.5 μm y 2.0 μm. La morfología
microscópica se observa en tinciones de Gram, No forma endoesporas, no tiene
flagelo, por lo que es inmóvil.

Klebsiella, Enterobacter y Serratia son bacterias gramnegativas estrechamente

relacionadas entre sí, que en algunos casos provocan infecciones en hospitales o
en centros sanitarios de larga estancia.

Enterobacteriaceae
Bacilo gram negativo
Anaerobia facultativa, inmóvil encapsulada
Enfermedades: infecciosas oportunistas

CAUSAS
Básicamente se asocia a la neumonía lobal, enfermedades nosocomiales como
infecciones respiratorias, urinarias.
PATOGENOCIDAD
Son patógenos oportunistas y causa infecciones como neumonías, infección del
tracto urinario, tracto respiratorio, septicemias o meningitis en neonatos (recién
nacidos), principalmente este tipo de padecimientos se adquieren en hospitales
(nosocomio)

HABITAT
Habita en el intestino del hombre como parte de su microbiota

CARACTERISTICAS

- Klebsiella spp. forma parte de las enterobacterias, son bacilos, Gram (-)
negativos, crecen en diversos medios de cultivo, son bacterias
oportunistas, las especies importantes en la salud del humano son:

K. pneumoniae,
K. ozanae,
K. rhinoscleromatis,
K. oxytoca.

- Son bacterias de la flora normal gastrointestinal, sin embargo su

importancia médica radica debido a que son oportunistas (osea se
aprovechan del debilitamiento del sistema inmunológico) y pueden producir
enfermedades nosocomiales como infecciones respiratorias, urinarias,
neumonías, etc.

ESCHERICHIA COLI

MORFOLOGIA
E. coli es una bacteria mesófila, su óptimo de desarrollo se encuentra en el
entorno de la temperatura corporal de los animales de sangre caliente (35-43 ºC).
La temperatura límite de crecimiento se sitúa alrededor de 7 ºC, lo que indica que
un control eficaz de la cadena de frío en las industrias alimentarias es esencial
para evitar el crecimiento de E. coli en los alimentos. La congelación tiene pocos
efectos sobre la población de E. coli en el alimento, y no garantiza la destrucción
de un número suficiente de bacterias viables para asegurar su inocuidad. Sin
embargo, E. coli es sensible a temperaturas superiores a 70 ºC, a partir de la cual
son fácilmente eliminadas; por ello, es muy importante la pasteurización de
alimentos como la leche, zumos, etc., para garantizar su eliminación.

Dominio: BACTERIA
Clase: gammaproteobacteria
Orden: enterobacteriales
CARACTERÍSTICAS
- E. coli se caracteriza por poseer bacilos Gram negativos, no esporulante,
producción de indol a partir de triptófano, no utilización de citrato como
fuente de carbono y no producción de acetoína. Además, fermenta la
glucosa y la lactosa con producción de gas.

- Como todas las bacteria Gram -, la cubierta de E. coli consta de tres

elementos: la membrana citoplasmática, la membrana externa y, entre
ambas, un espacio periplásmico constituido por péptido-glucano. Esta
última estructura confiere a la bacteria su forma y rigidez, y le permite
resistir presiones osmóticas ambientales relativamente elevadas.

CAUSAS
Puede causar infecciones intestinales y extra intestinales generalmente graves
Septicemia
Meningitis neonatal

PATOGENICIDAD
Patógenos oportunistas: cuando perforan el intestino y las bacterias acceden a la
cavidad peritoneal
Los principales patógenos intestinales, que se describen en función de los
síntomas clínicos que generan y de los factores de patogenicidad que se expresan
son los siguientes: E. coli enterotoxigénicas (ETEC), E. coli enteropatógenas
(EPEC), E. coli enteroagregativas (EAggEC), E. coli enterohemorrágicas (EHEC) y
E. coli enteroinvasivas (EIEC).

HABITAT
Intestino, bacteria común del colon.

CONTAMINACION
Presentarían una acción tóxica directa sobre las células del epitelio intestinal.

STAPHYLOCOCCUS
La morfología de esta bacteria se caracteriza por:
• Colonias lisas, brillantes y convexas.
• Poseer un endopigmento color amarillo naranja a blanco porcelana color dorado
al
Cual se le conoce como”aureus”.
• Fermenta glucosa, lactosa y maltosa.
• El crecimiento ocurre en un amplio rango de
Temperatura 6,5 a 50º C, siendo optimo 30-
40º C.

Staphylococcus aureus es un microorganismo que se encuentra ampliamente

diseminado en el ambiente ya que posee características particulares de virulencia
y resistencia contra antibióticos, lo cual representa un grave problema de salud,
esto es, gracias a que su distribución se extiende a nivel mundial y el impacto en
la morbimortalidad es considerable a nivel comunitario e intrahospitalario.

CONTAMINACIÓN
Respecto de la intoxicación provocada por S. aureus, se sabe que la mayoría de
los brotes son originados por Staphylococcus aureus coagulasa positiva, ya que
muy pocas cepas coagulasa negativa son capaces de producir enterotoxinas
(intoxicación alimentaria estafilocócica, IAE)

PATOGENICIDAD
Las enfermedades entéricas no solo se contagian de esta manera, sino que la
gravedad del problema se pone en evidencia al considerar que los agentes
patógenos potenciales se encuentran en diversos ambientes, incluyendo la
presión osmótica elevada y la humedad reducida, lo que explica por qué pueden
sobrevivir y desarrollarse en las secreciones nasales (9) del portador

CARACTERÍSTICAS
- Coco inmóvil, de 0.8 a 1 micrómetro de diámetro, que se divide en tres
planos para formar racimos de uvas, responde positivamente a la tinción de
Gram, es aerobio y anaerobio facultativo por lo que puede crecer tanto en
una atmósfera con o sin oxígeno
- no presenta movilidad ni forma cápsula.
- Es capaz de crecer hasta con un 10 % de sal común. Por esto puede crecer
en el agua del mar.

HABITAT
Habita tanto en la mucosa como en la piel de los seres humanos

SALMONELLA
El género Salmonella se ubica dentro del Orden Enterobacteriales y la Familia
Enterobacteriaceae. Sus miembros son bacilos Gram negativos, generalmente
móviles por flagelos peritricos (excepto S. Gallinarum), anaerobios facultativos no
encapsulados y no esporulados.
CONTAMINACION
Se conoce como salmonelosis al grupo de infecciones producidas por bacilos del
género Salmonella, las cuales se adquieren por la ingesta de alimentos o bebidas
contaminados.

CAUSAS
La causa más común de fiebre entérica, que también incluye a la fiebre
paratifoidea, ocasionada por S. paratyphi A, B y C. Los serotipos de Salmonella
typhi y paratyphi son patógenos comunes en países en desarrollo.

HABITAT

Suelos y aguas

CARACTERISTICAS
- La mayoría de los serotipos de Salmonella crecen en un rango de
temperatura que va desde 5ºC a 47ºC
- Se desarrollan bien a una actividad de agua (aw) de 0.99 a 0.94, pueden
llegar a sobrevivir en alimentos secos con un aw de <0.2.

- Se caracterizan por ser de amplia distribución, altamente patógenos y de

difícil aislamiento, con más de 2500 serotipos identificados en el actual
sistema de Kauffmann-White

PATOGENOCIDAD

Produce salmonelosis con un período de incubación de entre cinco horas y cinco

días, diarrea y dolor abdominal. A través de las heces (excremento) del enfermo
se elimina gran cantidad de bacterias, y se presenta fiebre entérica con un periodo
de incubación de siete a veintiocho días, causante de dolor de cabeza, fiebre,
dolor abdominal y diarrea, erupción máculo-papulosa en pecho y espalda. Los
enfermos presentan un período de convalecencia entre una y ocho semanas y las
personas curadas eliminan Salmonella. También puede ocasionar fiebres
entéricas o infección intestinal por intoxicación con algunos alimentos. Se
reproducen por bipartición.