Estandarización de un método espectrofotométrico y Análisis y

cuantificación de mezclas por espectrofotometría.

Santiago Pérez castillo

[email protected]
Programa: tecnología en química industrial
Angela Mayerli
[email protected]
Programa: tecnología en regencia en farmacia
Docente:
Carlos David Oviedo León
Asignatura:
Análisis instrumental

Resumen: durante esta práctica se estableció como objetivo principal

establecer la relación entre la energía radiante y la composición de las
muestras estudiadas teniendo como base la ley de Lambert beer y los métodos
espectrofotométricos vistos en clase, de los cuales se utilizó el método de
patrón interno, para determinar la concentración de una muestra problema que
contenía, permanganato de potasio y dicromato de potasio , lo cual hace que
se presente el fenómeno de aditividad de absorbancias , una aplicación que se
estudio previamente de la ley de Lambert beer.
Palabras clave: métodos espectrofotométricos, patrón interno, ley de Lambert
beer , absorbancias, concentración , permanganato de potasio , dicromato de
potasio.
Introducción: Los métodos de espectrofotometría se basan en la capacidad
que tiene una sustancia en absorber radiación y poder determinar la
concentración de un producto o un reactivo. Que consiste en un equipo que
detecta la cantidad de luz absorbida a través de las celdas y la compara con la
que emite una sustancia de referencia o blanco. Podemos encontrar unos que
solo pasan a una determinada longitud de onda llamados fotómetros
colorímetros y los que permiten variar la longitud de onda llamados
espectrofotómetro.
En la espectrofotometría encontramos dos fenómenos:
Absorción que es la interacción de una sustancia con un haz de luz y pasa de
estado en reposo a un estado excitado.
Emisión: es cuando algunos compuestos des pues de estar en estado excitado
vuelven a su estado natural y emiten la energía.
Marco teórico
Absorbancia
Absorbancia uv vis y visible: proporciona información cualitativa y cuantitativa
sobre moléculas se puede clasificar en absorción por compuestos orgánicos:
que se debe a dos tipos de electrones los compartidos por varios átomos y que
participan directamente en los enlaces y los electrones externos no
compartidos que se localizan principalmente en los átomos de oxígeno.
Absorbancia por especies inorgánicas esta absorbe bandas amplias de
radiación visible debido a transiciones en los orbitales llenos y vacíos de ion
metálico.
Transmitancia Óptica
Es la cantidad de energía que atraviesa un cuerpo en una determinada longitud
de onda es decir cuando un haz de luz atraviesa un cuerpo una parte de esta
luz es absorbida y la otra atraviesa el cuerpo.
Ley Beer
Es la relación que hay entre la absorción de la luz con las propiedades del
material atravesado es decir la absorbancia de una solución es directamente
proporcional a la concentración y a la longitud de paso de la luz.
Materiales y Métodos
MATERIALES REACTIVOS
Balones aforados de 50,100,250 y Agua destilada
500ml

Frasco lavador Dicromato de potasio

Pipetas aforadas de 1,5,10 y 25ml Permanganato de potasio

Pipetas graduadas 1 y 5ml

Vaso de precipitado de 100 y 250ml

Vidrio de reloj

Probeta de 100ml

Preparación de soluciones
Solución stock: se preparó una solución de 1000ppm de dicromato de potasio
en donde se tomó 100 gramos de dicromato y se llevaron a 100ml.
A partir de esta se preparó 10 soluciones a concentraciones de 10, 20, 30, 40,
50, 60, 70, 80, 90 y 100ppm y se aforo a 50ml. Se escogió la solución de
90ppm para realizar la linealidad y sensibilidad de la prueba, para la precisión
se realizó la repetibilidad se hicieron 10 mediciones.
Se realiza un procedimiento similar par permanganato de potasio se prepara
una solución de 1000ppm y se realizan 10 disoluciones para realizar la curva
ringbom y se determinó el intervalo lineal y a partir de esta se construye la
curva de de calibración para dicromato de potasio y permanganato de potasio.
Resultados y análisis:

La solución stock de Dicromato de potasio (K2Cr2O7) que se preparó tubo una

concentración de 1000 ppm (±1,000), a partir de la cual se prepararon las
disoluciones que se muestran a continuación en la tabla Nº1.
Tabla Nº1 concentraciones de las diluciones en ppm y sus respectivas
incertidumbres finales.
Incertidumbre
volumen volumen concentración de la
Disolución alícuota (ml) incertidumbre balón (ml) incertidumbre (ppm) disolución
blanco 0,00 0 50,00 0,06 0,00 0,00
1 0,500 0,007 50,00 0,06 10,00 1,00
2 1,000 0,007 50,00 0,06 20,00 1,01
3 1,50 0,10 50,00 0,10 30,00 1,01
4 2,00 0,10 50,00 0,10 40,00 1,01
5 2,50 0,10 50,00 0,06 50,00 1,01
6 3,00 0,10 50,00 0,10 60,00 1,01
7 3,50 0,10 50,00 0,10 70,00 1,01
8 4,00 0,10 50,00 0,06 80,00 1,01
9 4,50 0,10 50,00 0,10 90,00 1,01
10 5,00 0,10 50,00 0,10 100,00 1,01
Estas concentraciones aplican para las 10 disoluciones de permanganato y
para las 10 de dicromato ya que el material que se nos entrego tenia
incertidumbres similares y en muchos casos igual y aun cuando esta variaba en
los balones de 50 ml principalmente, no afecta el resultado de la incertidumbre
final, ya que no aparece dentro de las cifras significativas de modo que esta
tabla aplica para las disoluciones de ambas sustancias.

Luego de preparar las disoluciones se procedió con el barrido espectral con las
disoluciones de 90 ppm (±1,01) de dicromato de potasio y de permanganato de
potasio. A continuación, se muestran las curvas obtenidas a partir de las
absorbancias obtenidas a diferentes longitudes de onda de entre 380 y 800
nm.
Grafico Nº1

Barrido espectral del dicromato de potasio

0.6

0.5

0.4
Absorbancia

0.3

0.2

0.1

0
380 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 620 640 660 680 700 720 740 760 780 800
Longitud de onda (nm)

En el grafico Nº1 vemos como el máximo punto de absorción del dicromato de

potasio es 380 nm , ya que de ahí en adelante presenta lecturas mas bajas de
absorbancia , hasta llegar a 0 en los 510 nm , donde ya no absorbe radiación.

Gráfico Nº2

Barrido espectral para el permanganato de potasio

1.4

1.2

1
Absorbancia

0.8

0.6

0.4

0.2

0
380 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 620 640 660 680 700 720 740 760 780 800
longitud de onda (nm)

en el grafico Nº2 se muestra el barrido llevado a cabo al KMnO4 y cómo

podemos ver en el grafico el punto de máxima absorción es en 530 nm. Y luego
de este punto observamos un decaimiento en la absorbancia constante.

Una vez determinado los puntos de máxima absorbancia de ambos

compuestos se procedió a realizar las correspondientes curvas de ringbom
para determinar los intervalos de concentración optima en donde la
absorbancia tenga un comportamiento lineal.
Grafico Nº3 curva de ringbom para el dicromato de potasio a una longitud de
onda de 380 nm.

80
70
absortancia

60
50
40
30
20
10
0
0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50

Log10 de la concentración

En este grafico observamos que desde 1,00 hasta 1,60 aproximadamente se

da un comportamiento semilineal ya que en 1,70 se desvía demasiado dando
un R² demasiado lejos de 1 en la curva de calibración. Por lo tanto se toma
únicamente hasta ese valor.

Tabla Nº2
absortancia
Concentración
de dicromato
de potasio
(ppm) Ã1 Log (ppm)
0 0 0,00
10 12,30 1,00
concentración
intervalo de

20 21,30 1,30
30 30,50 1,48
40 37,48 1,60
50 40,71 1,70
60 46,30 1,78
70 54,61 1,85
80 56,55 1,90
90 61,27 1,95
100 69,52 2,00
Basándonos en lo visto en el Grafico Nº3, nos dirigimos a la Tabla Nº2 para
determinar a que concentraciones corresponde ese intervalo y nos damos
cuenta que corresponde de 10 a 40 ppm, y tomamos esos cuatro valores para
realizar la curva de calibración.
Gráfico Nº4

Curva de calibracion a 380 nm para el k2Cr2o7

0.25

0.2
Absorbancia

0.15

y = 0.005x + 0.007
0.1 R² = 0.9991

0.05

0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
Concentracion ppm

En este grafico se presenta la ecuación de la recta que se obtuvo , el valor de

m=0,005 y el valor de R²=0,9991.

Se hace exactamente lo mismo con el Permanganato de potasio, pero a una

longitud de onda de 490 nm, a pesar de que su longitud de onda máxima fue
de 530 como se vio en el Grafico 2, es necesario tomar una longitud de onda a
la cual también absorba el dicromato de potasio y ya que el dicromato no
absorbe después de 510 nm, se opto por hacer la curva de ringbom para el
permanganato de potasio a una longitud de onda más baja.

Gráfico Nº5 curva de ringbom para el permanganato de potasio a 490 nm

curva de ringbom
90
80
70
Absortancia

60
50
40
30
20
10
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5
Log10 de la concentracion
En este grafico se ve un comportamiento lineal prácticamente en toda la curva,
solo un dato es anormal, y es el primero, por lo tanto el intervalo se toma desde
1,3 a 2 , luego nos dirigimos a la tabla Nº3 presentada a continuación para
determinar a qué concentraciones corresponde.

Tabla Nº3
Kmno4
absorbancia a
ppm log (ppm) 490 nm absortancia
10 1 0,064 13,7021452

intervalo de concentración
20 1,30103 0,127 25,3551242
30 1,47712125 0,201 37,0493817
40 1,60205999 0,269 46,1730217
50 1,69897 0,332 53,4413906
60 1,77815125 0,409 61,0058013
80 1,90308999 0,535 70,8257299
90 1,95424251 0,605 75,1686689
100 2 0,684 79,2985865
Observamos que el intervalo de concentraciones esta entre 10 ppm y los 100
ppm, procedemos a realizar la curva de calibración con estos valores.

Gráfico Nº6

Curva de Calibración del KMnO4

0.8
y = 0.0069x - 0.0074
Absorbancia a 490 nm

0.7
R² = 0.9995
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 20 40 60 80 100 120

Concentración de permanganato en ppm

en este grafico vemos la ecuación de la recta, y el valor de m=0,0069 y el de

R²= 0,9995.
Una vez realizadas las curvas de calibración de los patrones internos, se
procedió a elaborar una muestra problema de concentración desconocida.

Grafico Nº7 barridos espectrales superpuestos

1.4

1.2

1
Absorbancia

0.8

0.6

0.4

0.2

0
380 430 480 530 580 630 680 730 780
Longitud de onda

En este grafico podemos ver con cierta claridad que 380 nm y 490 nm son
longitudes de onda aptas para que ambas sustancias puedan absorber
radiación del espectro visible, por lo tanto, se tomaron absorbancias a esas 2
longitudes de onda.

Tabla Nº4 resultados de absorbancia de la muestra problema

Longitud
de
onda(nm) absorbancia

490 0,285

380 0,46

Con los datos obtenidos en la tabla anterior y teniendo en cuenta el principio de

aditividad de absorbancias el cual se puede aplicar con la ley de beer , se
puede proceder a calcular la concentración , pero primero se tiene que saber el
valor de la absortividad molar.
Tabla Nº5 valores de Ɛ (absortividad molar) para el dicromato y para el
permanganato.
Equipo 1 K2Cr2O7 KMnO4
absortividad
molar a 380
nm 0,0052 0,0031
absortividad
molar a 490
nm 0,00028 0,007
El valor de Ɛ para el dicromato a 380 nm es igual a la pendiente de la curva de
calibración es decir 0,0052 ppm-1*cm-1 y el valor de Ɛ para el permanganato a
490 es igual a la pendiente es decir 0,007 ppm-1* cm-1 , y para determinar las
otras dos absortividades restantes solamente dividimos la absorbancia en el
barrido a esa longitud de onda , sobre la concentración que fueron 90 ppm.

Una vez compilados todos los datos podemos elaborar una matriz y determinar
el valor de la concentración de dicromato y de permanganato en la muestra
como se muestra a continuación:
Tabla Nº6 matriz para la determinación de la concentración.
A= E* b* Cx + E* b* Cy
absortividad absortividad
concentración Longitud concentración
Absorbancia molar Longitud de molar del
de K2Cr2O7 de la celda de KMnO4
a 380 nm k2Cr2O7 a 380 la celda (cm) KMnO4 a 380
(ppm) (cm) (ppm)
nm nm
0,460 0,0052 1 66,26 0,0031 1 38,064
absortividad absortividad
concentración Longitud concentración
Absorbancia molar Longitud de molar del
de K2Cr2O7 de la celda de KMnO4
a 490 nm k2Cr2O7 a 490 la celda (cm) KMnO4 a 490
(ppm) (cm) (ppm)
nm nm
0,285 0,00028 1 66,26 0,007 1 38,064
En la tabla observamos la concentración en ppm de cada compuesto.
Por ultimo se determino la sensibilidad del método , el límite de detección y el
límite de cuantificación los cuales son mostrados en la Tabla Nº6 .

TABLA Nº6
longitud de
onda (380 nm ) espectrofotómetro 1
1 0,009
2 0,010
3 0,011
4 0,010
5 0,010
6 0,010
7 0,011
8 0,010
9 0,011
10 0,010
promedio 0,010
desviación
estándar (S) 0,000632456
límite de
detección 0,431219681
límite de
cuantificación 1,437398936

Conclusiones:
 se logró estandarizar el método utilizando las soluciones madre como
patrón interno, aunque se obtuvo una incertidumbre relativamente alta
en las concentraciones (±1,00) debido a la bascula y a la propagación de
la incertidumbre, así que se puede decir que es un error sistemático y no
es culpa de quien realiza la práctica.
 Se logro determinar el contenido de permanganato de potasio y de
dicromato de potasio en la muestra problema, usando los principios de la
aditividad de absorbancias por lo tanto se puede decir que se entendió el
concepto y se llevó a la práctica satisfactoriamente.
 Se utilizo la absortividad molar que se despejo del barrido debido a que
si vemos el valor de Ɛ380 nm para el dicromato en el anexo 1 es muy
similar al valor de la pendiente lo que nos da confianza para usar el valor
a 490 nm ya que presenta una desviación estándar inferior a 0,0001 un
valor que es aceptable para ser un dato experimental. Pasa lo mismo en
el anexo 2 donde se ve el valor de Ɛ490nm para el permanganato que
es de 0,00714 y en la curva de calibración la pendiente es de 0,007.
Bibliografía
HARVEY D. Química Analítica moderna. Ed. McGraw Hill. Madrid. 1202.
HARRIS D. Análisis Químico Cuantitativo. Ed. Reverté. 2007.
Anexo Nº1 barrido espectral del dicromato de potasio

concentración Longitud Absorbancia absortividad

ppm de onda del dicromato molar €
90 380 0,539 0,00599
90 385 0,472 0,00524
90 390 0,379 0,00421
90 395 0,296 0,00329
90 400 0,224 0,00249
90 405 0,17 0,00189
90 410 0,14 0,00156
90 415 0,126 0,00140
90 420 0,119 0,00132
90 425 0,119 0,00132
90 430 0,118 0,00131
90 435 0,118 0,00131
90 440 0,116 0,00129
90 445 0,112 0,00124
90 450 0,103 0,00114
90 460 0,085 0,00094
90 470 0,067 0,00074
90 480 0,046 0,00051
90 490 0,025 0,00028
90 500 0,013 0,00014
90 510 0,002 0,00002

Anexo Nº2 barrido espectral del permanganato

Absorbancia del absortividad

concentracion longitud de onda permanganato molar €
90 380 0,279 0,0031
90 385 0,229 0,002544444
90 390 0,173 0,001922222
90 395 0,13 0,001444444
90 400 0,092 0,001022222
90 405 0,069 0,000766667
90 410 0,064 0,000711111
90 415 0 0
90 420 0,056 0,000622222
90 430 0,067 0,000744444
90 440 0,09 0,001
90 450 0,141 0,001566667
90 460 0,203 0,002255556
90 470 0,311 0,003455556
90 480 0,439 0,004877778
90 485 0,559 0,006211111
90 490 0,643 0,00714
90 495 0,714 0,007933333
90 500 0,848 0,009422222
90 505 0,988 0,010977778
90 510 1,019 0,011322222
90 515 1,017 0,0113
90 520 1,149 0,012766667
90 525 1,225 0,013611111
90 530 1,26 0,014
90 535 1,162 0,012911111
90 540 1,21 0,013444444
90 550 1,149 0,012766667
90 560 0,586 0,006511111
90 570 0,723 0,008033333
90 580 0,402 0,004466667
90 590 0,19 0,002111111
90 600 0,147 0,001633333
90 610 0,129 0,001433333
90 620 0,12 0,001333333
90 630 0,116 0,001288889
90 640 0,106 0,001177778
90 650 0,092 0,001022222
90 660 0,084 0,000933333
90 670 0,074 0,000822222
90 680 0,062 0,000688889
90 690 0,056 0,000622222
90 700 0,044 0,000488889
90 720 0,034 0,000377778
90 740 0,026 0,000288889
90 760 0,022 0,000244444
90 780 0,021 0,000233333
90 800 0,023 0,000255556