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    Aguas - P Aeruginosa UNE EN ISO 16266-2008

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    Este documento describe el procedimiento para la detección y enumeración de Pseudomonas aeruginosa en muestras de agua mediante filtración de membrana e incubación. Se filtran volúmenes de muestra a través de un filtro de membrana y se incuban en placas de agar selectivo para identificar colonias de P. aeruginosa mediante color, fluorescencia y pruebas confirmatorias como la oxidasa y la producción de amoniaco.

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    Este documento describe el procedimiento para la detección y enumeración de Pseudomonas aeruginosa en muestras de agua mediante filtración de membrana e incubación. Se filtran volúmenes de muestra a través de un filtro de membrana y se incuban en placas de agar selectivo para identificar colonias de P. aeruginosa mediante color, fluorescencia y pruebas confirmatorias como la oxidasa y la producción de amoniaco.

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    Aguas - P aeruginosa UNE EN ISO 16266-2008

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    Pseudomonas aeruginosa.

    Detección y enumeración por


    filtración de membrana. UNE EN ISO 16266-2008.
    Confirmada en 2015.
    Procedimiento

    Filtración e incubación

    Filtrar los volúmenes de la muestra de agua a través de un filtro de membrana de éster de


    celulosa de 45 µm (ver ISO 8199) y colocar la membrana sobre una placa con agar CN

    CM0559B Pseudomonas Agar base (ISO) (500 g) +


    Inscrita el 31 octubre de 2012, en el Registro Mercantil de Valladolid,  tomo 1429, folio 218, inscripción 1ª, hoja VA‐25213.  

    SR0102E Pseudomonas CN Selective Supplement (ISO) (10 viales)


    PO5076A Agar Cetrimida (20 placas)

    Incubar a 36ºC ± 2ºC durante 44 ± 4 h

    Examinar el crecimiento en las membranas tras 22 ± 2 h y 44 ± 4 h

    Bajo luz natural Bajo luz U.V

    Contar todas las colonias Contar todas las colonias rojo / Contar todas las colonias
    con color azul / verde marrón como presuntivas fluorescentes no
    (piocianina), como Pseudomonas aeruginosa. productoras de piocianina
    Pseudomonas aeruginosa. como presuntivas
    Confirmación Pseudomonas
    aeruginosa.
    Subcultivo en Nutrient Agar
    CM00003B Nutrient Agar 500 g Confirmación
    PO5025A Nutrient Agar 20 placas
    Incubar a 36ºC ± 2ºC durante 22 ± 2 h
    Subcultivo en Nutrient Agar
    CM00003B Nutrient Agar 500 g
    Reacción de la oxidasa (+): PO5025A Nutrient Agar 20 placas
    MB0266 Oxidase Detection Strips Incubar a 36ºC ± 2ºC durante 22 ± 2 h
    ISO 50 tiras

    Caldo Acetamida.
    Caldo Acetamida.
    40101012 Acetamide Broth ISO
    40101012 Acetamide Broth ISO (500 g)
    (500 g) Incubar a 36ºC ± 2ºC hasta 5 días
    Incubar a 36ºC ± 2ºC hasta 5 días

    Medio King’s B.
    4019612 Pseudomonas Agar F
    (King’s B modificado (500 g)
    Incubar a 36ºC ± 2ºC durante 22 ± 2 h

    Recuento: Contar todas las colonias que producen piocianina, o que sean oxidasa (+), fluorescentes bajo luz U.V. y
    productoras de amoniaco en Caldo Acetamida.

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    02012018

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