0% encontró este documento útil (0 votos)
622 vistas

Leishmania

Este documento presenta un informe de práctica sobre leishmaniasis realizado por estudiantes de laboratorio clínico e histopatológico. El documento describe los objetivos, fundamentos teóricos, agente etiológico, vector, reservorios, ciclo de transmisión, manifestaciones clínicas, diagnóstico y tratamiento de la leishmaniasis. Los estudiantes aplicaron la técnica de raspado cutáneo para investigar leishmania y recopilaron información sobre los métodos y tratamientos de esta enfermedad.
Derechos de autor
© © All Rights Reserved
Formatos disponibles
Descarga como PDF, TXT o lee en línea desde Scribd
0% encontró este documento útil (0 votos)
622 vistas

Leishmania

Este documento presenta un informe de práctica sobre leishmaniasis realizado por estudiantes de laboratorio clínico e histopatológico. El documento describe los objetivos, fundamentos teóricos, agente etiológico, vector, reservorios, ciclo de transmisión, manifestaciones clínicas, diagnóstico y tratamiento de la leishmaniasis. Los estudiantes aplicaron la técnica de raspado cutáneo para investigar leishmania y recopilaron información sobre los métodos y tratamientos de esta enfermedad.
Derechos de autor
© © All Rights Reserved
Formatos disponibles
Descarga como PDF, TXT o lee en línea desde Scribd
Está en la página 1/ 14

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO

INFORME DE PRÁCTICA

PERÍODO ACADÉMICO MAYO-OCTUBRE 2020


ASIGNATURA HEMATOLOGÍA II SEMESTRE: PARALELO:
SEXTO “B”
NOMBRE DEL DOCENTE Mgs. Mercedes Balladares Saltos
FECHA 28-05-2020
NÚMERO DE PRÁCTICA 2 HORA: 17:00-2000 DURACIÓN: 3
Broncano Carolina
NOMBRE/S ESTUDIANTES
Mora Carlos
AULA VIRTUAL MOODLE
LUGAR DE LA PRÁCTICA

TÍTULO DE LA UNIDAD
HEMOPARÁSITOS
TEMA DE LA PRÁCTICA LEISHMANIA
 Aplicar adecuadamente la metodología para la toma de muestra
OBJETIVO GENERAL
para la investigación de leishmania.
OBJETIVOS ESPECÌFICOS:
 Aplicar la técnica de raspado para investigación de leishmania.
 Recopilar información de los métodos y tratamientos acerca de leishmania.
FUNDAMENTO TEÓRICO:

Las leishmaniasis son un conjunto de enfermedades infecciosas,


parasitarias, con manifestaciones patológicas que difieren, tanto en su
presentación clínica, como en su pronóstico, causadas por protozoarios
flagelados del género Leishmania, pertenecientes a la familia
Trypanosomatidae (que abarca también al género Trypanosoma).
Causadas por diferentes especies de protozoos del género Leishmania y
transmitidos de una persona infectada a una sana mediante la picadura de
insectos hematófagos de la familia Psychodidae, subfamilia Phlebotominae del género Lutzomyia.
Las leishmaniosis son enfermedades de los animales y del ser humano, endémicas y de transmisión
vectorial. Las leishmaniosis están presentes en una gran variedad de animales que actúan como reservorios,
según la especie de Leishmania involucrada, pudiendo ser: caninos, roedores, desdentados y marsupiales,
entre otros. En América las personas no se comportan como buenos reservorios y el papel que cumplen en el
ciclo de transmisión es aún discutido. Las personas pueden ser contagiadas si entran en contacto con el ciclo
zoonótico de transmisión de las leishmaniosis.
Las leishmaniosis son enfermedades que se encuentran presentes en 88 países, 72 de los cuales son países
en vías de desarrollo y 13 de los más pobres del mundo. La Organización Mundial de la Salud estima que en
todo el mundo hay alrededor de 350 millones de personas que se encuentran en riesgo de contraer
leishmaniosis, con una incidencia aproximada de 2 millones de casos nuevos por año. Actualmente está
considerada como una de las endemias más importantes del planeta.
2
Desde el punto de vista clínico, en América, podemos hablar de dos tipos de leishmaniasis: leishmaniasis
visceral americana (LVA) o Kala-azar Neotropical y leishmaniasis tegumentaria americana (LTA) que
incluye la leishmaniasis cutánea (LC) y la leishmaniasis mucocutánea (LM). Las características y
manifestaciones clínicas de las leishmaniasis varían según la especie de Leishmania que produce la
infección y el estado inmunológico del paciente. La LVA se presenta primordialmente como una forma
epidemiológica de villas, suburbios y zonas netamente urbanas, pero también de zonas rurales, en menor
proporción. (1)
MANIFESTACIONES
La manifestación de las dos formas básicas de esta
enfermedad, leishmaniasis cutánea (cutánea localizada,
cutánea difusa y mucocutánea) y la leishmaniasis visceral,
depende de la especie de Leishmania de que se trate y de
la respuesta inmunitaria del hospedero a la infección. La
leishmaniasis visceral, es la forma más grave de esta
enfermad, resulta fatal en casi todos los casos, si no se trata. (2)
 Leishmaniasis cutánea localizada (LCL) o úlcera de los chicleros: se caracteriza por úlceras presentes en
cualquier parte del cuerpo expuestas a las picaduras de los insectos, de bordes indurados, de fondo
limpio, cuando afecta los cartílagos de nariz y orejas su evolución es crónica y mutilante; responde bien
al tratamiento.
 Leishmaniasis cutánea difusa (LCD): se caracteriza por lesiones cutáneas nodulares o en placas que
tienden a diseminarse en la piel de todo el cuerpo; su curación es difícil.
 Leishmaniasis mucocutánea (LMC): se caracteriza por lesiones iniciales de piel que, aunque lleguen a
cicatrizar, producen metástasis que varios años después destruyen mucosas y cartílagos, particularmente
en la nariz y en faringe con efectos invalidantes, su curación es difícil.
 Leishmaniasis visceral (LV) o Kala-azar: cursa con fiebre, pancitopenia, lesiones de órganos internos
como hígado, bazo, médula ósea y ataque grave al estado general; los casos no tratados se asocian con
padecimientos intercurrentes y conducen a la muerte.
La combinación de leishmaniasis con la infección del VIH es un nuevo cuadro patológico que debe
abordarse con urgencia; incluso cuando los pacientes coinfectados son tratados, las recaídas son
frecuentes y el desenlace suele ser fatal. (2)
Agente Etiológico
El agente etiológico de la Leishmaniasis es un protozoario de la familia Trypanosomatidae, Leishmania. Es
un parásito digenético, en su ciclo de vida se encuentran dos formas o estadios.
 Promastigote: la forma infectante, elongado, extracelular, alargada, se desarrolla y multiplica en el
tracto digestivo de los insectos transmisores. De 20-30 μm, flagelado para su movilidad en el intestino
de los insectos vectores.
 Amastigote: la forma replicativa, redondo u oval, carece de flagelo, intracelular, se encuentra en los
macrófagos donde se dividen, mide de 2-5 μm.
3
Vector
Los transmisores de las Leishmaniosis son insectos hembras hematófagas pertenecientes a la familia
Psychodidae, subfamilia Phlebotominae compuesto por seis géneros, pero Lutzomyia es el vector más
importante en las Américas.
Reservorios
Esta parasitosis es considerada una zoonosis donde pequeños mamíferos silvestres y cánidos domésticos son
reservorios importantes. En algunas zonas endémicas el hombre se ha convertido en reservorio accidental de
la enfermedad (para LV y posiblemente LCD). En las zonas de LV el perro es un importante reservorio, a
diferencia de las áreas endémicas de las otras variedades clínicas donde roedores, marsupiales y otros
mamíferos son los principales reservorios.
Ciclo de Transmisión y Biológico de la Leishmania
Etapas en el ser humano. La leishmaniasis es transmitida por la picadura de un insecto hematófago. El
insecto inyecta en la sangre la forma infecciosa y flagelada del parásito llamadas promastigotes.
Posteriormente, el promastigote, al ser fagocitados por los macrófagos del huésped, pierde su flagelo y se
convierte en amastigote. Estos se multiplican en las células infectadas hasta romperla e invaden otros
macrófagos y afectan a distintos tejidos, dependiendo en parte de la especie de Leishmania. Esto origina las
manifestaciones clínicas de la leishmaniasis. En los casos de leishmaniasis cutánea localizada la infección se
limita a la piel, pero en otras variedades clínicas los macrófagos infectados con parásitos se diseminan por
toda la piel, mucosas o vísceras.
Etapas en el insecto. El insecto se infecta al ingerir sangre con macrófagos infectados por amastigotes. En el
intestino del insecto, las células se desintegran liberando los amastigotes que rápidamente se transforman
nuevamente en promastigotes, que se multiplican y migran a la probóscide. Si el insecto realiza otra
picadura, los promastigotes pasan a la sangre del huésped, completándose el ciclo (3)
Otros mecanismos de transmisión: LCL por autoinoculación y LV por transplantes de tejidos y órganos.
Los principales factores determinantes de las Leishmaniasis son los procesos migratorios, la
deforestación (contracción de carreteras, explotación de minas, agricultura) y cambio climático).
Se ha observado dos patrones de transmisión:
Selvático: ocurre cuando el hombre penetra en el bosque o la selva y es picado por los vectores infectados.
Domestico-rural y domestico-urbano: áreas de foco residuales, bosque primario o de colonización no
reciente, en que los vectores llegan al peridomicilio, ingresan en las viviendas y transmiten la infección,
pudiéndose adaptar o no en el peridomicilio.
Diagnostico Laboratorial
 Directos: frotis o examen directo, cultivo, anatomía patológica y Reacción en Cadena de la Polimerasa.
 Indirectos: inmunofluorescencia indirecta IFI, ELISA.

Sensibilidad
Sensibilidad variable depende de:
 Experiencia del técnico.
 Especies del parásito.
4
 Tejido de donde proviene la muestra.
 Técnica usada para toma y procesamiento.
 Tiempo de evolución lesiones, contaminación.
 Tratamientos previos.

Pruebas Directas
Frotis O Examen Directo
Principio: El objetivo es visualizar las formas amastigotes de Leishmania, en frotis de lesiones de LC y LM
(raspado y biopsias) y aspirados de médula ósea, ganglio o bazo para LVA, coloreadas con tinción de
Giemsa.
Procedimiento para lesiones cutáneas:
1. Limpiar en forma cuidadosa, con un trozo de algodón embebido en etanol al 70%, el borde
indurado, sano y eritematoso de la lesión, en donde se realizará la toma de muestra.
2. Presionar esta zona, apretándola entre el dedo índice y el pulgar, hasta conseguir la isquemia.
3. Efectuar un raspado con bisturí en el borde interno o en el centro de la úlcera o proceder mediante
un corte con bisturí, de 1 a 2 mm de profundidad por 2 a 3 cm de largo (el corte no debe sangrar).
4. Recoger el tejido y líquido que exuda y colocarlo en tres láminas portaobjetos y en cada lámina tres
muestras. Dejar secar espontáneamente.
5. Una vez secas las láminas, fijar con alcohol absoluto o metanol y dejar secar espontáneamente.
6. Rotular la lámina con el nombre del paciente y la fecha.
7. Colocar las láminas en una caja porta láminas, a fin de evitar que se rompan (4)

Recomendaciones:
Seleccionar la lesión que tenga menos tiempo de evolución con bordes bien indurados que indican que la
lesión está activa. Lo ideal es que la lesión esté libre de sobre-infección bacteriana. Si se observa
sobreinfección bacteriana en la lesión se debe informar al médico para el uso de antibióticos y realizar la
toma de muestra para frotis cuando la lesión esté libre de sobreinfección bacteriana una vez que el paciente
terminó el tratamiento con antibióticos. Hacer un total de tres láminas con frotis por pacientes con tres
impresiones por lámina portaobjeto de 8 a 10 mm de diámetro aproximadamente cada impresión.
5

Reporte de resultado del examen directo:


+ Positivo
Se observaron amastigotes de Leishmania sp. en la muestra examinada.
- Negativo
No se observaron amastigotes de Leishmania sp. En la muestra examinada. Importante: Un resultado
negativo no excluye el diagnóstico de leishmaniasis.
Toma De Muestra De Biopsia De Piel O Mucosa Por Sacabocado
Principio: Biopsia es la obtención de tejidos u otros materiales de cualquier organismo vivo a ser analizado
microscópicamente con el fin de obtener un diagnóstico sobre el mismo. Este método es el más apropiado
para diagnosticar enfermedades de la piel debido a que proporciona una información muy útil para definir el
diagnóstico del paciente.
La técnica de biopsia de piel por sacabocado es una técnica muy recomendada para especímenes de piel o
mucosa.
Para la toma de muestra de biopsia de piel escoger la lesión que tenga el menor tiempo de evolución con los
bordes bien indurados.
En las lesiones con úlcera que son características de leishmaniasis cutánea tomar la biopsia en el 1/3 de piel
sana y 2/3 del borde de la lesión.
1. Limpiar el área de la toma de muestra con solución desinfectante.
2. Aplicar anestésico local en el área donde se tomará la biopsia según el tamaño y el sitio de la lesión y
obtener la biopsia, sosteniendo el sacabocado verticalmente sobre la piel y ejerciendo presión hacia
abajo y al mismo tiempo haciendo rodar con los dedos de la mano. Se retira el sacabocado cuando se
alcanza la grasa subcutánea.
3. Sacar la muestra de piel obtenida con pinzas cuidando de no apretar o presionar la misma. Luego cortar
la muestra de piel con una tijera para aislarlo de los tejidos subcutáneos, teniendo en cuenta que el corte
debe realizarse por debajo de la dermis.
4. Colocar el espécimen en el recipiente con la solución de conservación de acuerdo a la técnica a ser
6
utilizada. Si la biopsia (muestra) es para histopatología usar formol salino tamponado al 10%, si es para
cultivo o PCR usar un vial con alcohol al 70% o solución salina estéril. Las biopsias para cultivo deben
ser refrigerado solamente por 24 horas. En cambio, la biopsia para biología molecular debe conservarse
en congelación hasta su procesamiento y la biopsia para histopatología puede mantenerse a temperatura
ambiente hasta el momento de su proceso.
5. Cerrar la herida con una gasa limpia, aplicar crema con antibiótico o cicatrizante, cubrir con gasa y
esparadrapo microporoso.

Toma de muestra de biopsia de mucosa: Para la toma de biopsia de mucosa se recomienda que sea
realizado por un médico especializado (otorrinolaringólogo) porque se necesita contar con un equipo
médico muy especial como el rinoscopio. Una vez realizado la toma de muestra (biopsia) se recomienda
enviar lo más pronto posible al patólogo, para su procesamiento.

Reporte de resultados
 Positivo: Se observa amastigotes de Leishmania sp., en la muestra examinada.
 Sugestiva: Se observan cambios inflamatorios, granulomatosis crónica, que sugieren la infección, pero
no la confirma por la ausencia del parásito en la preparación examinada.
 Negativo: No se observan amastigotes de Leishmania sp., en la muestra examinada. Ni cambios
compatibles con reacción granulomatosa crónica.
 Importante: Los resultados positivos deben ser informados inmediatamente al Servicio de Vigilancia o
al Programa local de Leishmaniasis.

Cultivo
Principio: El objetivo es la observación de formas promastigotes de Leishmania que se desarrollan a partir
de muestras provenientes de pacientes sospechosos de leishmaniasis, en el medio de cultivo NNN.
7

Generalidades
 Procedimiento costoso, requiere de tiempo para reporte del resultado (cinco días a un mes).
 Sensibilidad alrededor 70%.
 Medios más usados: NNN, Senekjie, Schneider, RMPI, otros.
 Utilidad: en diagnóstico, caracterización de la cepa, investigación.
 Muestras usadas: aspirado de lesión y biopsia.

Reporte de resultado del cultivo:


+ Positivo: Se observan promastigotes de Leishmania sp., en la muestra examinada.
- Negativo: No se observan promastigotes de Leishmania sp., en la muestra examinada.
Limitaciones del cultivo:
 Exceso de sangre en las muestras: proteínas séricas inhiben crecimiento.
 Temperatura inadecuada, no supere 28°C.
 Medios preparados con más de un mes son ineficientes.
 Contaminación con bacterias y hongos: Penicilina: 100 U/mL - Streptomicina 100 µg/mL. Gentamicina:
100 mg/dL - 5 - fluorocitocina 500 mg/dL.

Interpretación: Se considera positivo al cultivo que presenta crecimiento de forma promastigotes,


observadas al microscopio hasta 30 días después del cultivo inicial. Un resultado positivo de cultivo
confirma un caso probable. Las cepas de Leishmania aisladas pueden tipificarse para averiguar la especie y
la variedad a fin de conocer cuáles son las que circulan en las distintas regiones del país. La especificidad
del cultivo es muy elevada, pudiendo llegar a cifras cercanas al 100%, por otro lado, la sensibilidad del
método se encuentra alrededor del 70% tanto para LC y LVA. Para la LM la sensibilidad es menor.
8

Toma De Muestra Para Leishmaniasis Visceral


La punción para biopsia de médula ósea debe ser realizada por un profesional capacitado para dicho efecto a
través del aspirado de médula ósea para su posterior análisis parasitológico por un examen directo,
histopatológico, cultivo o PCR.
Punción aspirativa de médula ósea (PAMO), puede ser realizada en forma ambulatoria o en el hospital por
un médico entrenado.
1. Utilizar guantes y ropa de cirugía estéril se procede a la desinfección del lugar de la punción con alcohol
al 70% u otro antiséptico utilizado en cirugía (iodopovidona), limpiando del centro hacia la periferia.
2. Anestesiar el lugar de la punción con 0,5 mL de lidocaína al 2%. La punción puede realizarse en el
esternón, hueso ilíaco (huesos no recomendados para niños menores de 2 años) o tibia (hueso
recomendado para niños menores de 2 años). La punción del esternón se puede realizar en el manubrio
esternal o a la altura del primero, segundo o tercer espacios intercostales. En el caso del hueso ilíaco,
punzar en la cresta iliaca y en la tibia punzar en el tercio superior a 1 ó 2 cm debajo de la tuberosidad
tibial.
3. Utilizar una aguja de punción de tamaño adecuado, con mandril, sujetando con firmeza la aguja e
introduciéndola en la médula ósea. Cuando la aguja se encuentra firmemente introducida en el hueso,
retirar el mandril y conectar una jeringa de por lo menos 10 mL y aspirar. Cuando la punta de la aguja
se encuentra en la posición correcta, dentro de la médula ósea, la aspiración produce un dolor intenso en
el lugar de la punción.
4. Después de aspirar la médula, se deben realizar los frotis en forma rápida, ya que el material se coagula
velozmente. La confección de los frotis en tres laminas porta objetos debe ser lo suficientemente fina
como para poder visualizar correctamente las formas del parásito, en forma extendida. Este último
punto es importante, ya que de este detalle depende la sensibilidad del diagnóstico, frotis gruesos
impiden una visualización correcta. Posteriormente se secan los frotis a temperatura ambiente para su
posterior coloración.
5. En el caso de niños pequeños que no colaboran con la punción debe procederse a la sedación de los
mismos para evitar accidentes.

Los riesgos de la punción de médula ósea son muy raros, en el caso de la punción del esternón se podría
traspasar el hueso y alcanzar los vasos sanguíneos importante detrás del mismo (si la punción es en el
manubrio del esternón, el riesgo es menor); en el caso de la cresta iliaca el riesgo es alcanzar alguna porción
del intestino; además existen riesgos de producir osteomielitis, hematomas, abscesos subcutáneos y
9
fracturas.
Envío de las Muestras: Los frotis secos deben ser remitidos al laboratorio de referencia lo antes posible,
para su análisis parasitológico.
Interpretación: Se considera positiva a toda muestra que presenta al menos una forma amastigote de
Leishmania en por lo menos 2000 campos observados, utilizando el objetivo de 100 aumentos en el
microscopio óptico.
Un resultado positivo por frotis, realizado por un profesional capacitado, confirma un caso de leishmaniasis.
Reacción En Cadena De La Polimerasa
Principio: La PCR se fundamenta en la reacción específica de un fragmento conocido de ADN del parásito
(o “sonda”), con el ADN extraído de una muestra biológica, en la cual se desea averiguar la presencia del
agente; y la posterior producción de varias copias del ADN de dicho agente (amplificación), contenido en la
muestra, por intermedio de una ADN-polimerasa.
Pruebas Indirectas:
Los métodos indirectos detectan en el organismo anticuerpos principalmente del tipo IgG, específicos contra
Leishmania. Esto se realiza mediante pruebas serológicas, o través de la evaluación de la respuesta celular
con la prueba cutánea de hipersensibilidad retardada, más conocida como prueba de *Montenegro o
leishmanina.
Inmunofluorescencia Indirecta (IFI) Para Leishmaniasis
Principio: La IFI es un método utilizado para todos los tipos de leishmaniasis, para detectar y medir los
anticuerpos (inmunidad humoral), en contra de antígenos de Leishmania sp., por medio de una reacción in
vitro, que utiliza como antígenos a formas promastigotes de Leishmania sp. Obtenidas de cultivo axénicos.
En el método se utiliza un microscopio con luz ultravioleta que incide sobre la reacción serológica, en una
lámina portaobjetos, interpretándose como positivas las muestras que emiten fluorescencia.
Toma de muestra: Para la realización de la prueba serológica por IFI, se debe obtener sangre venosa. La
sangre extraída debe ser centrifugada y el suero sanguíneo debe ser separado lo antes posible (no más de
una hora) en un recipiente limpio y seco, con tapa, con la correcta identificación del paciente. Los sueros así
separados se pueden refrigerar (2 a 8º C) o congelar (-10 a -20º C) hasta su procesamiento o su envío al
laboratorio de referencia. El envío de las muestras al laboratorio de referencia debe ser realizado en una
conservadora con suficiente material refrigerante, a fin de evitar la desnaturalización de la misma.
10

Tratamiento
 Antimoniales Pentavalentes.
 Anfotericina B.
 Pentamidina.
 Aminosidina.
 Miltefosina.
 Alopurinol.
MATERIALES Y MÉTODOS
Equipos Materiales Reactivos
 Microscopio  Normas de bioseguridad como el gorro, guantes,  Reactivo de
mascarilla, gafas, mandil. Wright, giemsa
 Kit de extracción sanguínea  aceite de
 Algodón inmersión
 Alcohol
 Gradillas,
 tubos de ensayo,
 placas portaobjetos
 bisturí
PROCEDIMIENTO / TÉCNICA
TECNICA
RASPADO DE PIEL
1. Limpiar en forma cuidadosa, con un trozo de algodón embebido en etanol al 70%, el borde
indurado, sano y eritematoso de la lesión, en donde se realizará la toma de muestra.
2. Presionar esta zona, apretándola entre el dedo índice y el pulgar, hasta conseguir la isquemia.
3. Efectuar un raspado con bisturí en el borde interno o en el centro de la úlcera o proceder mediante
un corte con bisturí, de 1 a 2 mm de profundidad por 2 a 3 cm de largo (el corte no debe sangrar).
4. Recoger el tejido y líquido que exuda y colocarlo en tres láminas portaobjetos y en cada lámina tres
muestras. Dejar secar espontáneamente.
5. Una vez secas las láminas, fijar con alcohol absoluto o metanol y dejar secar espontáneamente.
11
6. Rotular la lámina con el nombre del paciente y la fecha.
7. Colocar las láminas en una caja porta láminas, a fin de evitar que se rompan

GOTA GRUESA:
1. Limpiar con alcohol el dedo medio de la mano
2. Puncionar con lanceta o aguja el borde lateral del dedo más debajo de la uña
3. Limpiar la primera gota con gasa o alcohol seco
4. Presionar para obtener una nueva gota de sangre
5. Recoger la gota de sangre con un porta-objetos (2 o 3 gotas)
6. Distribuir la sangre con la punta de otra porta objetos formando un rectángulo llegar hasta los bordes
7. Recoger otra gota con la punta del porta-objetos
8. Hacer otro rectángulo por debajo del anterior
9. Limpiar el sitio sangrante
10. Dejar secar la sangre y colorear con Wright o Giemsa
11. Observar al microscopio.

Extendido :
Pasos 1 al 5 igual al anterior
6. Se realiza un frotis o extendido de la sangre de la misma forma como se hace para los diferentes
estudios hematológicos
7. Recoger otra gota de sangre y hacer otro extendido
8. Limpiar el sitio sangrante
12
9. Dejar secar el frotis
10. Colorear con Wright o Giemsa

Tinción giemsa
 Colocamos la gota gruesa en la gradilla de tinción, en posición horizontal.
 Para fijar la muestra cubrimos el porta con metanol durante 3 minutos. Escurrimos y lo dejamos secar al
aire.
 Se cubre el portaobjetos con el colorante Giemsa, dejándolo actuar de 10-15 minutos.
 Escurrimos y lavamos con agua destilada y se deja secar. Posteriormente se le coloca una gota de aceite
de inmersión y se observa al microscopio.

Tinción Wright
 Teñir el frotis con colorante Wright por 3 minutos
 Sin tirar el colorante, añadir agua destilada por dejarlo reposar por 1 minutos
 Realizar la técnica del espejo
 Enjuagar con abundante agua destilada y observar al microscopio.
RESULTADO (Gráficos, cálculos, etc.)
13

OBSERVACIONES
GLOSARIO
1. VECTOR
Es cualquier agente (persona, animal o microorganismo) que transporta y transmite un patógeno a otro
organismo vivo
2. PROTOZOO
Grupo de animales eucariotas formados por una sola célula, o por una colonia de células iguales entre
sí, sin diferenciación de tejidos y que vive en medios acuosos o en líquidos internos de organismos
superiores.
3. LA TINCIÓN DE FIELD
Colorantes A y B de Field sirve tanto para la gota gruesa como para el frotis. Debido a su rapidez y
sencillez, es la preferida por los laboratorios de los hospitales tropicales que analizan gran número de
muestras. Sin embargo, no siempre permite observar el punteado de Schüffner presente en P. vivax y P.
ovale.
4. ACNEIFORME
Afección de la piel por la que se producen bultos pequeños sobresalientes parecidos al acné, que a
menudo surgen en la cara, el cuero cabelludo, el pecho y la parte superior de la espalda.
5. HOMÓLOGA
Que es semejante a otra cosa por tener en común con ella características referidas a su naturaleza,
función o clase.
6. EL MÉTODO DE LEISHMAN
Incluye metanol por lo que sólo puede utilizarse para el frotis.
7. EL SISTEMA DE QBC
(Quantitative Buffy Coat System, Becton Dickinson) se basa en la concentración por gradiente de
densidad de los eritrocitos parasitados mediante la centrifugación de un capilar impregnado de heparina
y naranja de acridina, al que se añade un flotador
8. LA METACICLOGÉNESIS
Es un proceso que experimentan naturalmente los promastigotes de Leishmania en el tracto digestivo
del insecto vector y cuya finalidad es transformar los promastigotes en formas altamente infectivas y
14
capaces de sobrevivir en el hospedero vertebrado, donde es sometido a los ataques por parte del sistema
inmune. (5)
CONCLUSIONES

 Se aplicó la técnica de raspado, gota gruesa en la investigación de leishmania obteniendo resultados


positivos. Se llegó a determinar que la leismaniasis son un conjunto de enfermedades infecciosas,
parasitarias, con manifestaciones patológicas que difieren, tanto en su presentación clínica, como en su
pronóstico, causadas por protozoarios flagelados del género Leishmania, pertenecientes a la familia
Trypanosomatidae (que abarca también al género Trypanosoma)
 Se logró recopilar la información acerca de los métodos y del tratamiento para la leishmania, fue una
investigación muy fructífera ya que pudimos informarnos más acerca del mismo.

RECOMENDACIONES

 Utilizar todas las medidas de prevención para manipular los materiales, con el correcto uso de las
normas de bioseguridad como: gorro, guantes, mascarilla, mandil para evitar accidentes.
 Realizar paso a paso todos los procedimientos para obtener una buena lectura de la muestra a través
del microscopio.
 Realizar una correcta tinción respetando los tiempos adecuados.
 Al concluir la práctica dejar limpios todos los instrumentos del laboratorio.

Bibliografía
1. Pndcdl. L. Diagnóstico Y Tratamiento De Las Leishmaniosis. Paraguay: Viceministerio De Salud Pública,.
Ministerio De Salud Pública Y Bienestar Social. 2011.

2. R. C. Diagnóstico De Laboratorio De La Enfermedad De Mexico. Cont Lab Clín. 2013 abril.

3. CpeCdIyC. O. Manual de Diagnóstico y Tratamiento de las Leishmaniasis Paraguay. OPS/OMS/PRY


CpeCdIyC.. 2018.

4. Morelos Jm P. Diagnostico, Tratamiento Y Control De Las Leishmaniasis. Subsecretaría De Prevención Y


Promoción De La Salud Centro Nacional De Programas Preventivos Y Control De Enfermedades,
Secretaria De Salud. 2015.

5. López-Vélez CTyR. ASPECTOS PRÁCTICOS DEL DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO Y PROFILAXIS DE LA


MALARIA. Unidad de Medicina Tropical y Parasitología Clínica. Hospital Ramón y Cajal. Madrid. 2016.

También podría gustarte