ad-bio Sífilis Ab Combo Rapid Test - (Suero / Plasma / Sangre Total) Página 1 de 2

2. Goteros desechables
3. Un diluyente de muestra (REF SB-R0031, 5 mL)
4. Un inserto (instrucciones de uso).
AD0031C
MATERIALES QUE SON REQUERIDOS Y NO SON SUMINISTRADOS

1. Control Positivo
2. Control Negativo
Diagnóstico In vitro
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO SE SUMINISTRAN
USO
1. Reloj o cronómetro
La prueba rápida ad-bio Sifilis Ab Combo es un inmunoensayo de cromatográfia de 2. Dispositivo de punción para la prueba de sangre total
flujo lateral para la detección cualitativa de anticuerpos incluyendo IgG, IgM e IgA contra
el Treponema pallidum (Tp) en suero, plasma humano y sangre total. Este método es ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
usado para el tamizaje y como ayuda diagnóstica para la detección de infección por
Tp. Cualquier muestra que de resultado reactivo con la prueba rápida ad-bio Sifilis Ab Para uso de Diagnóstico in Vitro
Combo debe ser confirmada con métodos alternativos y con la sintomatología clínica. 1. Este inserto debe ser leído completamente antes de la realización de la prueba. Si
no se sigue el inserto se pueden generar resultados erróneos.
RESUMEN Y EXPICACION DE LA PRUEBA 2. No abra el empaque sellado hasta que no se vaya a realizar la prueba.
3. No use los dispositivos si se encuentran vencidos
El Tp, una bacteria espiroqueta, es el agente causal de la enfermedad venérea sífilis. 4. Atempere los reactivos de 15 a 30°C antes de usarlos.
Aunque las tasas de sífilis están disminuyendo en los Estados Unidos después de un 5. No utilice los componentes de otro tipo de prueba como sustituto de los
1
brote epidémico entre 1986 y 1990 , la incidencia de sífilis en Europa ha aumentado componentes de este kit.
desde 1992, especialmente en los países de la Federación Rusa, donde se registran 6. No utilice sangre sangre hemolizada para la prueba.
2
263 casos por 100.000 . En 1995, la WHO reportó 12 millones de nuevos casos de 7. Use ropa protectora y guantes desechables mientras manipule los reactivos del kit
sífilis3. En la actualidad, ha aumentado la tasa de las pruebas serológicas positivas y las muestras clínicas. Lave sus manos después de realizar la prueba.
para sífilis en personas infectadas con VIH. 8. Los usuarios de esta prueba deben seguir las precauciones universales del CDC
de Estados Unidos para la prevención de transmisión del VIH, el VHB y otros
La detección serológica de anticuerpos anti-Tp ha sido reconocida para el diagnóstico patógenos de transmisión sanguínea.
de la sífilis desde su curso natural de infección caracterizada por periodos sin 9. No fume, beba ni coma en las áreas donde se manipulen muestras o reactivos del
manifestaciones clínicas. Ambos anticuerpos IgM e IgG fueron detectados en el suero kit.
de pacientes con sífilis primaria y secundaria. Los anticuerpos IgM pueden ser 10. Deseche todas las muestras y los materiales del kit usados como residuos
detectados hacia la segunda semana de la infección, mientas que los IgG aparecen biológicos peligrosos.
después, cerca de las 4 semanas4. Estos anticuerpos permanecen durante muchos 11. Manipule los controles positivos y negativos de la misma forma como a las
años o décadas en el suero de los pacientes con sífilis latente no tratada 5 . muestras de los pacientes.
12. Los resultados de las pruebas deben ser leídos 15 minutos después de agregar la
Los antígenos como los de Cardiolipina Rápida en plasma (RPR) y los extractos de muestra al pozo de muestra. Leer los resultados después de los 20 minutos puede
bacteria Tp han sido usados para las pruebas serológicas de sífilis por décadas. Sin generar resultados erróneos.
embargo, el antígeno RPR es no-treponémica, derivada de corazón bovino. Los 13. No procese la muestra en un lugar con fuerte corriente de aire, con ventiladores o
anticuerpos contra el antígeno RPR no se producen sino hasta 1-4 semanas después de aire acondicionado.
la aparición del chancro, por lo que este antígeno carece de la sensibilidad en la sífilis
primaria. Los extractos Tp son preparados de la inoculación de testículo de conejo y PREPARACION DE REACTIVOS E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
contienen cierta cantidad de materiales contaminantes como flagella, que pueden
conducir a reacciones cruzadas con borreliae y leptospiras en la prueba serológica. Todos los reactivos vienen listos para ser usados. El almacenamiento de los
Además, la composición de los extractos puede variar de lote a lote. Recientemente, la dispositivos cerrados debe ser de 2-30°C. Si se almacena de 2-8°C, asegúrese de que el
alta inmunogenicidad de los antígenos específicos de Tp han sido identificados y dispositivo de prueba se lleva a temperatura ambiente antes de la apertura. El dispositivo
utilizado como una alternativa a los antígenos tradicionales con las ventajas de una alta de prueba es estable hasta la fecha de caducidad impresa en la bolsa. No congele el kit ni
especificidad y reproducibilidad6-9. exponer el kit a más de 30°C.
La prueba rápida ad-bio Sifilis Ab Combo permite la medición de los anticuerpos (IgM, RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA Y MANIPULACIÓN
IgG e IgA) contra los antígenos recombinantes de Tp en sangre de forma rápida y fiable
sin instrumentación. Considere todos los materiales de origen humano como infecciosos y manipúlelos
siguiendo los procedimientos de bioseguridad.
PRINCIPIO DE LA PRUEBA
Plasma
La prueba rápida ad-bio Sifilis Ab Combo en un inmunoensayo de cromatografía de 1. Recolecte la muestra en un tubo tapa lila, azul o verde (que contenga EDTA,
flujo. La prueba de casete consiste en: 1) una almohadilla coloreada de borgoña que Citrato o Heparina) por venopunción.
contiene el conjugado con los antígenos recombinantes de Tp conjugados con oro 2. Separe el plasma por centrifugación.
coloidal (conjugados Tp) y un control de anticuerpos conjugados con oro coloidal 2) una 3. Cuidadosamente transfiera el plasma a un tubo nuevo.
membrana de nitrocelulosa que contiene una banda de prueba (banda T), y una banda
de control (banda C). La banda T está pre-recubierta con antígenos recombinantes de Suero
Tp no conjugados, y la banda C está pre-recubierta con una línea de anticuerpos de 1. Recolecte por venopunción la muestra en un tubo tapa roja (sin anticoagulantes)
control. 2. Espere la formación del coagulo
Identificación Banda de Línea de Pozo de
de la muestra Control prueba muestra 3. Separe el suero por centrifugación
4. Cuidadosamente transfiera el suero a un tubo nuevo

Las muestras deben ser procesadas lo más pronto posible después de la recolección.
Almacenar de 2-8°C si no se va a procesar inmediatamente. Guarde de 2-8°C hasta 5
días. Las muestras pueden ser congeladas a -20°C para un almacenamiento más
prolongado.
Cuando un volumen adecuado de muestra es dispensada en el pozo de muestra del
casete, la muestra migra por acción capilar a través del casete. Los anticuerpos Anti- Evite los múltiples ciclos de descongelación. Antes de la prueba, descongelar las
Tp si están presentes en la muestra se unirán con los conjugados Tp. El muestras a temperatura ambiente y mézclelas bien. Si la muestra presenta partículas
inmunocomplejo es entonces capturado en la membrana pre-recubierta por el antígeno visibles, retírelas por centrifugación. No use muestras lipémicas, hemolizadas o turbias
Tp, formando la banda T coloreada, indicando anticuerpos Tp positivos en el resultado ya que pueden presentar interferencia en la interpretación de los resultados.
de la prueba. La ausencia de la formación de la banda T sugiere un resultado negativo.
Sangre
La prueba contiene un control interno (banda C), la cual muestra una banda coloreada Las gotas de sangre total pueden obtenerse por punción digital o venopunción. No use
de borgoña por el inmunocomplejo de los anticuerpos de control que se debe formar muestras hemolizadas para la prueba.
independientemente de la banda T. El resultado es inválido si la línea T no aparece, y Las muestras de sangre total pueden refrigerarse (2°C-8°C) si no se van a procesar
debe ser repetida la prueba en un nuevo casete. inmediatamente. La muestra debe procesarse entre las 24 horas después de
recolectada.
REACTIVOS Y MATERIALES SUMINISTRADOS PROCEDIMIENTO
1. Cada bolsa de aluminio sellada contiene: Paso 1: Lleve las muestras y componentes del ensayo a temperatura ambiente si es
a. Un dispositivo de casete. refrigerada o congelada. Mezcle bien la muestra antes del ensayo una vez
b. Un desecante descongelado.
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Paso 2: Cuando esté preparado para realizar la prueba, abra el empaque y saque el CARACTERISTICAS DE RENDIMIENTO
dispositivo. Colóquelo sobre una superficie limpia y plana.
1. Rendimiento clínico
Paso 3: Asegúrese de marcar el dispositivo con la identificación del paciente. Un total de 1055 muestras de pacientes susceptibles fueron probados con la prueba
rápida ad-bio Sifilis Ab Combo y por la prueba TPPA (Treponema Pallidum Particle
Paso 4: Llene la pipeta con la muestra. Agglutination). La comparación se muestra en la siguiente tabla:

Con el gotero dispuesto en forma vertical, agregue 1 gota de sangre total (40-50 µL Prueba Rápida ad-bio Sifilis Ab Combo
aprox) de suero/plasma o 1 gota de sangre total (40-50 µL aprox) dentro del pozo TPPA Positivo Negativo Total
de muestra. Asegúrese de que no se formen burbujas. 318 0 318
Positivo
Negativo 2 735 737
Inmediatamente adicione 1 gota (35-50 µL aprox) de diluyente de muestra con la
botella posicionada verticalmente. Total 320 735 1055
Sensibilidad Relativa: 100%, Especificidad Relativa: 99.7%, Concordancia: 99.8%

2. Precisión
ó Con las corridas y entre estas se procesaron 15 duplicados con tres muestr as: una
negativa, una positiva débil, y una positiva fuerte. La negativa, la positiva débil y el
positive fuerte fueron correctamente identificados en todas las pruebas realizadas .

LIMITACIONES DE LA PRUEBA
1 gota de sangre total 1 gota de diluyente de muestra
1. El procedimiento y la interpretación de los resultados de la prueba deben seguirse
cuidadosamente cuando indiquen la presencia de anticuerpos anti-Tp en el suero o
plasma de los pacientes. La falla en el seguimiento puede generar resultados
inexactos.
Resultado 2. La prueba rápida ad-bio Sifilis Ab Combo se limita a la detección cualitativa de los
anticuerpos anti-Tp en suero, plasma o sangre total humana. La intensidad del
15 minutos color de la banda no tiene correlación lineal con la cantidad de anticuerpos
presentados en la muestra.
1 gota de suero/plasma 1 gota de diluyente de muestra 3. Un resultado negativo indica la ausencia de anticuerpos detectable de anti-Tp.
Sin embargo este no excluye la posibilidad de la exposición o infección
Paso 5: Contabilice el tiempo. con Tp.
4. Un resultado negativo puede ocurrir si la cantidad de anticuerpos anti-Tp
Paso 6: Los resultados deben ser leídos a los 15 minutos. Los resultados positivos o presentes en la muestra es menor a los límites de detección de la prueba, o los
reactivos se hacen visibles transcurrido 1 minuto anticuerpos que son detectados no están presentes en la etapa de la
enfermedad en la que es recolectada la muestra
No lea los resultados después de 20 minutos. Para evitar confusiones descarte el 5. Algunas muestras que contienen alto título inusual de anticuerpos heterófilos o
casete después de leer el resultado. de factor reumatoideo pueden afectar los resultados.
6. Los resultados obtenidos con esta prueba deben ser interpretados junto con otros
CONTROL DE CALIDAD procedimientos diagnósticos y la sintomatología clínica.
1. Control Interno: Esta prueba contiene un control incluido, la banda C. esta se REFERENCIAS
desarrolla después de adicionar la muestra y el diluyente de muestra. De lo
contrario, revise el procedimiento y repita la prueba con un nuevo dispositivo. 1. Centers for Disease Control and Prevention. Chlamydia trachomatis infections: policy guidelines
from prevention and control. Morbid. Mortal. Weekly Rep. 1995; 34:53S-74S.
2. Control Externo: las Buenas Prácticas de Laboratorio recomiendan el uso de 2. Tichonova, L., K. Borisenko, H.Ward, A.meheus, et al. Epidemics of syphilis in the Russian
controles externos, positivos y negativos, para asegurar el funcionamiento Federation: Trends, origins, and priorities for control. Lancet 1997; 350:210-213.
adecuado de la prueba, particularmente en las siguientes circunstancias: 3. Gerbase, A. C., J. T. Rowley, D. H. Heymann, S. F. Berkley, and P. Piot. Global prevalence and
incidence estimates of selected curable STDs. Sex. Transm. Infect 1998; 74:S12-S16.
a. Cuando un Nuevo operador utiliza el kit, antes de que procese las muestras.
4. Luger AFH. Serological Diagnosis of Syphilis: Current methods. In: Young H, McMillan A, eds.
b. Cuando se inicia un nuevo kit. Immunological diagnosis of sexually transmitted diseases. New York: Marcel Decker, 1988: 249-
c. Un nuevo envío de kits es utilizado. 274.
d. Cuando la temperatura de almacenamiento se sale del rango de 2°C - 30°C 5. Baker-Zander SA, Hook EW 3rd, Bonin P, Handsfield HH, Lukehart SA. Antigens of Treponema
e. La temperatura del sitio de procesamiento esta por fuera de 15°C -30°C pallidum recognized by IgG and IgM antibodies during syphilis in humans. J Infect Dis. 1985;
f. Para verificar una frecuencia mayor que la esperada de los resultados positivos o 151(2):264-72.
6. Norgard MV, Chamberlain NR, Swancutt MA, Goldberg MS. Cloning and expression of the major
negativos.
47-kilodalton surface immunogen of treponema pallidum in Escherichia Coli. Infect Immun 1986;
g. Investigar la causa de resultados no válidos repetidos. 54:500-506.
7. Purcell BK, Chamberlain NR, Goldberg MS, Andrews LP, Robinson EJ, Norgard MV, Radolf JD.
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS Molecular cloning and characterization of the15-kilodalton major immunogen of Treponema
pallidum. Infect Immun. 1989; 57(12):3708-14
8. Bailey MJ, Thomas CM, Cockayne A, Strugnell RA, Penn CW. Cloning and expression of
1. RESULTADO NEGATIVO: Si solo se desarrolla color en la banda C, la prueba Treponema pallidum antigens in Escherichia coli. J Gen Microbiol 1989; 135 ( Pt 9):2365-78.
indica que no hay anticuerpos detectables de anti-Tp presentes en la muestra. El 9. Sambri V, Marangoni A, Simone MA, D'Antuono A, Negosanti M, Cevenini R. Evaluation of
resultado es negativo o no reactivo. recomWell Treponema, a novel recombinant antigen-based enzyme-linked immunosorbent
assay for the diagnosis of syphilis. Clin Microbiol Infect 2001; 7(4):200-5.
10. Rufli T. Syphilis and HIV infection. Dermatologica 1989; 179:113-117.

Índice de Símbolos
2. RESULTADO POSITIVO: Ambas bandas C y T desarrollan color, la prueba indica
la presencia de anticuerpos anti-Tp en la muestra. El resultado es positivo o Consulte las Para uso diagnóstico
Utilice por
instrucciones de uso in vitro únicamente
reactivo.
N
Pruebas por
REF Catálogo número Número de Lote
kit
Almacenar de 2 a Representante
No reutilizar
30°C Autorizado

Fabricante Fecha de fabricación

Las muestras con resultados reactivos deben ser confirmadas con métodos alternativos y
junto con la sintomatología clínica antes de hacer una determinación como positiva.

3. RESULTADO INVALIDO: Si la banda C no se colorea, el ensayo se considera

CTK Biotech, Inc. MDSS GmbH
inválido a pesar de que las otras bandas se tiñan. Se debe realizar nuevamente la
10110 Mesa Rim Road Schiffgraben 41, 30175 Hannover, Germany
prueba en otro casete. San Diego, CA 92121, USA Tel.: (+49)-511-6262 8630
E-mail: [email protected]

AD0031C Rev. E
Effective date: 2014-04-18
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