mitótico y dirige la división celular, cilios y flagelos,

PRÁCTICA que cumplen funciones de defensa, movimiento y

EL CITOPLASMA CELULAR
MOVIMIENTOS, E captura del alimento.

7 IDENTIFICACIÓN DE
INCLUSIONES CELULARES
Las vacuolas son sacos cuya función principal es el
almacenamiento de sustancias
organicas,inorganicas y gases están muy
desarrolladas en las células vegetales y muchas
I. INTRODUCCIÓN veces ocupan casi todo el volumen citoplasmático ,en
El citoplasma de la célula es el conjunto formado algunos organismos como protozoos regulan el
por el hialoplasma y los organelos celulares. El gradiente osmótico evitando la destrucción del
citoplasma tiene dos compartimentos principales; protoplasma.
un sistema de membranas hidrófobas y una matriz Esta práctica tiene por objetivos:
citoplasmática hidrófila. - Demostrar los movimientos citoplasmáticos:
ciclosis, ameboides, ciclios y flagelar;
Un sistema de membranas lipoide cubre la - Observar las inclusiones citoplasmáticas :
superficie de la célula y encierra el núcleo, las sustancias orgánicas (carbohidratos y proteínas)
mitocondrias y el complejo del retículo e inorgánicas (drusas, rafideos y cristales de
endoplasmático y el aparato de Golgi y sus oxalato).
productos, que incluyen los lisosomas, los
- Observar e identificar orgánelos citoplasmáticos:
peroxisomas y las vacuolas en las células ribosomas, mitocondrias, lisosomas.
vegetales. - Extraer y reconocer los pigmentos fotosintéticos,
El citoplasma de la célula también contiene diversas - Observación de cilios y flagelos en células vivas
estructuras organizadas llamados organelos,alguno y preparados histológicos.
de los cuales pueden verse con el microscopio óptico
otro 5% se observa con el microscopio II. MATERIAL Y MÉTODO
electronico.Cada tipo de organoide parece tomar
2.1 Material, equipos y reactivos:
parte en una actividad química especifica.
A) MOVIMIENTOS CITOPLASMÁTICOS
Con aumento grande, el microscopio electrónico
1. Ciclosis: Flores y hojas de hiedra, alfiler,
muestra muchas estructuras diminutas y granulosas
estiletes, microscopio.
adheridas al retículo endoplasmatico,son los
2. Pseudópodos de la ameba.
Ribosomas ,los cuales contienen cantidades de ARN
3. Paramecium : agua estancada
y enzimas que participan directamente en la síntesis
de proteínas.
B) INCLUSIONES CITOPLASMÁTICAS
Asimismo ,se pueden observar organelos en forma
SUSTANCIAS ORGÁNICAS:
de bastón denominados mitocondrias que son los
centros de reparación celular y de producción CARBOHIDRATOS:
transformación y almacenamiento de energía(ATP) , 4. Almidón: tubérculos de papa (fréjol, maíz).
que la célula utiliza en todos sus procesos 5. Granos de Inulina: tubérculo de dalia,
metabólicos. Las mitocondrias poseen unidad de alcohol.
membrana y químicamente poseen 6. Glucógeno en hígado de rata, KOH (30%),
proteinas,enzimas,lipidos,vitaminas,ARN y etanol, microscopio
pequeñas cantidades de ADN, además iones como
Mg,Na,K,Ca,etc. PROTEÍNAS
7. Granulos de aleurona: semilla de
El citoplasma de la mayoría de las células contiene higuerilla, Lugol. Microscopio
organoides redondos,denominados Lisosomas,
estos un poco mas pequeños que las mitocondrias y SUSTANCIAS INORGÁNICAS.
tienen una sola membrana. Contiene enzimas que CRISTALES DE OXALATOS.
realizan la digestión de proteinas.Por lo general, las 8. Drusas: peciolo de begonia
enzimas contenidas en los Lisosomas se utilizan para 9. De rafideos:peciolo de la hoja de hiedra
digerir las bacterias y otras sustancias extrañas,
además de que aceleran la desintegración de los ORGANÉLOS
tejidos desgastados. 10. Ribosomas: medula espinal de rata,
alcohol de 96%, Tinción con azul de
Existen otros organoides como los Plastidios que en
Tionina.
los vegetales cumplen funciones de vital importancia
y están relacionados con los procesos
fotosinteticos.El Centriolo que forma del aparato
 11. Lisosomas: pus de abscesos o de infección Experimento 3: Locomoción por cilios en el
cutánea, Tinción Gram (violeta de genciana, paramecio
lugol, Alcohol- acetona, Sol. Safranina) Colocar sobre una lámina portaobjeto una
12. Pigmentos vegetales: hojas frescas de muestra de cultivo de infusorios (agua
espinaca, acetona, carbonato de calcio. estancada).
éter etílico, agua destilada, hidróxido de potasio Cubrir la muestra con el cubreobjetos.
20% en 1 ml metanol, bureta. Observar a menor y mayor aumento la
13. Pigmentos fotosintéticos por cromatografía locomoción del paramecio en virtud del
de papel: mortero, hojas de croto, hojas de movimiento de los cilios.
espinaca, carbonato de calcio, papel de filtro, Esquematizar los movimientos del citoplasma.
vaso de precipitación.
14. Pigmentos fotosintéticos por fluorescencia: B) INCLUSIONES CITOPLASMÀTICAS
mortero, hojas de espinaca, carbonato de calcio,
alcohol etilíco, vaso de precipitación. SUSTANCIAS ORGÀNICAS
15. Cilios y flagelos en protozoarios:
Experimento 4: Observación de ALMIDÓN
Lámina porta objeto, cultivo de infusorios.
(Carbohidratos)
16. CILIOS DE CÈLULAS EPITELIALES DE
Hacer cortes finos de tubérculos de papa
TRÀQUEA
(fréjol, maíz). Preparar en fresco:
Cortes de tráquea de rata, aceite de cedro
Colocar una muestra y agregar una gota de
17. FLAGELOS EN Trypanosoma
agua, luego una laminilla y observe el
Preparado histológico de Trypanosoma, aceite
microscopio a menor y mayor aumento.
de cedro.
Otra muestra colocar en el portaobjetos y
2.2 Método agregar una gota de lugol, cubrir y observar.
A) MOVIMIENTOS CITOPLASMÁTICOS Identifique y esquematice.
Experimento 1: CICLOSIS en pelos
Experimento 5: Observación de GRANOS
estaminales de flor de hiedra:
DE INULINA (Carbohidrato)
Sobre un portaobjetos coloque una flor de
Cortar el tubérculo de dalia en pequeños
hiedra, con la punta de un estilete o un alfiler,
trocitos y colocarlos en alcohol por espacio de
disecte las envolturas florales. (pétalos y
48 horas con el fin de provocar la precipitación
sépalos),
de la inulina.
Ubique los estambres y aíslelos.
De uno de estos trocitos obtener cortes finos y
Seccione las anteras y elimínelas.
realizar un preparado fresco.
Coloque 1 ò 2 gotas de agua sobre los
Observar a menor y mayor aumento e
estambres y cubra con una lámina
identificar los cristales de inulina que se
Observe con objetivo de menor aumento las
presentan en forma de rosetas
células del pelo estaminal que son como toneles
que están en cadena.
Experimento 6: Glucógeno en hígado de
Luego observe con el objetivo de 40x
rata (Carbohidrato)
cuidadosamente en el interior de dichas células,
Hacer un corte histológico de hígado y
las corrientes citoplasmáticas.(La ciclosis es un
colocarlo en una lámina portaobjetos y agregar
movimiento permanente giratorio de los
3 gotas de KOH (30%), calentar a 100°C por 2
cloroplastos, regular o irregular del citoplasma y
minutos, luego agregar 1 gota de solución
los componentes celulares vegetales)
saturada de sulfato de sodio por 1 minuto,
Esquematizar lo observado.
eliminar la gota y agregar 4 gotas de etanol
96% y 2 gotas de Acido tricloroacético 10%.
Experimento 2: Locomoción formando
Observa al microscopio en menor y mayor
pseudópodos en la ameba.
aumento, el glucógeno insoluble.
Colocar sobre una lámina portaobjeto una
Esquematice y explique.
muestra de cultivo de ameba (cultivo de
infusorios).
Experimento 7: Observación de Gránulos de
Cubrir la muestra con el cubreobjeto.
Aleurona (Proteinas)
Observar a menor y mayor aumento, las
Descascare una semilla de higuerilla y obtenga
amebas e identificar los movimientos del
cortes finos y colocarlos en un portaobjetos.
citoplasma. Esquematizar.
Agregar al preparado una gota de Lugol.
Colocar el cubreobjeto. Observar al
microscopio a pequeño y mediano aumento e
identificarl el granulo en forma aislada e

2
 identificar sus partes (globoide y Sobre una lámina portaobjeto, realizar una extensión de la
cristaloide).Esquematice y explique. muestra
Fijar al calor moderado por 1 minuto.
Son reservas proteicas presentes en las semillas de Realizar coloración GRAM, pasos:
diversas plantas para la germinacion, que llenan las Cubrir la preparación con Cristal Violeta 2’.
vacuolas y son visibles al microscopio óptico, Sol. sensibilizante: Bicarbonato de sodio 1’
forman gránulos reguladores o irregulares, se Añadir Lugol (mordiente) durante 1’.
encuentran en el endospermo de las semillas y se Decolorar con alcohol-acetona hasta que no suelte
colorante.Lavar con agua.
hidrolizan las proteínassirviendo de alimento al
Teñir con Safranina 1’. Lavar con agua, dejar secar y
embrión. observar al microscopio con aceite de inmersión.
Esquematizar.
SUSTANCIAS INORGÁNICAS
Cristales de oxalato de calcio en células Experimento 12: Extracción y separación de
vegetales pigmentos vegetales
Experimento 8: Observación DE DRUSAS en Macerar en un mortero 10 g. de hojas frescas de
peciolo de begonia espinaca con 20 ml de acetona y una pequeña pizca
Realizar corte transversal muy fino al peciolo de begonia y de carbonato de calcio. Filtrar el extracto.y colocar
colocarlo en la lámina portaobjeto. Agregar una gota de el filtrado en una bureta (o pera de decantación) y
agua y colocar el cubreobjeto. Observar en el agregar 10 ml. de acetona o hexano. Agitar por
microscopio con objetivos de menor y mayor aumento e inversión suave o rotación. Agregar 20 ml. de agua
identificar las drusas, que se presentan en forma destillada por las paredes del tubo y eliminar la
esferoidal con numerosas formaciones terminadas en parte inferior.
punta. Luego volver a lavar la disolución de pigmentos
Experimento 9: Observación DE RAFIDEOS: agregando 20 ml agua destilada, hacer rotar
Realice un corte fino transversal del peciolo de la hoja de suavemente la pera de decantación a fin de separar
hiedra y colocarlo sobre una lámina porta objetos.Agregar el agua hacia la parte inferior, descartar el agua y
una gota de agua y cubrir con laminilla Observar en el repetir el lavado una vez más.
microscopio con objetos de menor y mayor e identificar A partir de la solución de pigmentos lavados, tomar
los rafideos, de forma circular y agrupados generalmente en un tubo de 5 ml. de la misma y adicionarle una
por paquetes. Esquematice.
solución fresca de hidróxido de potasio al 20% y 1
Discusión: Se denomina rafidios a los ácidos orgánicos ml de alcohol metílico.
y sus sales, presentes en el parénquima de la hoja, fruto y Agitar y dejar en reposo por 10 minutos.
rizomas compuestos por oxalato de calcio. Si se Observar la separación de los pigmentos en capas
cristalizan con una molécula de agua los cristales se superpuestas.
observan como agujas muy finas llamados RAFIDIOS. La
función principal de estos cristales está relacionada a los
NOTA: El caroteno forma una capa de color rojo, la
mecanismos de defensa de los animales herbívoros. El
conjunto de rafidios se forma la DRUSA o macla. Las
clorofila forma una capa de color verde; la xantofila
drusas y rafidios son cristales de oxalato de calcio, que se forma una capa de color amarillo.
producen en el citoplasma, pero cristalizan en las
Vacuolas, donde pude formar cuerpos largados aislados, Experimento 13: Reconocimiento de pigmentos
llamados estiloide. fotosinteticos por cromatografia en papel
Para la extracción de clorofilas y carotenoides:
Experimento 10: observación de Ribosomas:
pesar dos gramos de hojas de espinaca fresca y
Sacrificar la rata y extraer rápidamente la medula
triturar en mortero con una mezcla de acetona-
espinal.Hacer cortes muy fino de 1 a 2 cm. Con los
hexano a partes iguales (5 ml cada uno) añadir una
cortes, hacer un frotis o extensión tratando de que
pizca de carbonato de calcio
queden las células nerviosas o de lo contrario
Filtrar con papel de filtro o Filtrar con vacío,
practicar cortes muy finos.
Colocar 1 ml del filtrado en un tubo de ensayo
Fijar con alcohol de 96% durante 10 min.
y poner en contacto con la tira (papel) de
Lavar con agua destilada.Colocar con azul de
cromatografía, de tal manera que solo 1 o 2 cm. de
Tionina. Observar con el microscopio.
un extremo de la tira se empape con la solución; el
Esquematice lo observado.
otro extremo se ata a un hilo que fijara la tira en la
El azul de tionina da un color azul-violáceo regiones
parte superior del vaso, sin que toque las paredes
basófilas de las células del tejido nervioso.
del mismo; tapar el tubo a fin de evitar la
evaporación .
Experimento 11: observación de lisosomas :
Dejar en reposo por 30 minutos
Demostracion de la fagocitosis de
Observar y esquematizar.
microorganismos en los leucocitos.
Muestra: pus de abscesos o de infección cutánea.

3
Experimento 14: Reconocimiento de pigmentos
fotosinteticos por Fluorescencia:
Macerar 10 gramos de espinaca con 10 ml de
alcohol etílico al 95 %, decantar y filtrar (con papel
de filtro). Al filtrado agregar 10 ml de alcohol etílico,
y seguir macerando.
Observar: en el filtrado obtenido la fluorescencia de
la clorofila, cuando se ilumina con una fuente de luz
paralelo (aparato de proyección, lámpara de
microscopio, etc.).

Experimento 15: Observación de cilios y flagelos

en celulas y preparados histológicos
Colocar sobre una lamina porta objeto una muestra
de cultivo de infusorios.
Luego cubrir la muestra con una laminilla cubre
objeto. Observar a menor y mayor aumento.
Identificar a un paramecio, tratar de ver los cilios,
haciendo pequeños movimientos giratorios del
macro y micrométrico.
Esquematizar.

Experimento 16: Observación de cilios de

células epiteliales de tráquea
Realizar cortes muy fino de tejido traqueal
Colocar un corte en un portaobjetos y agregar una
gota de aceite de cedro.
Observar el epitelio cilíndrico seudoestratificado
ciliado y localizar los cilios en la parte apical de las
células.
Esquematizar.

Experimento 17: Observación de flagelos en

Trypanosoma
Colocar al microscopio un preparado histológico de
Trypanosoma.
Colocar una gota de aceite de cedro.
Observar con el objetivo de inmersión e identificar el
flagelo y demás elementos estructurales.
Esquematizar.

4
III. RESULTADOS

EXPERIMENTO Nº 01: CICLOSIS en pelos estaminales de flor de hiedra

PELOS
ESTAMINALES MUESTRA: Flor de hiedra (estambres)
Nombre científico: Hedera
Familia: Araliaceae

OBJETIVO 10X

DESCRIPCION: Se observó a menor aumento y

no se logró observar la ciclosis debido a un mal
mantenimiento del microscopio óptico.

EXPERIMENTO Nº 02: LOCOMOCION formando

AMEB PSEUDOPODOS en la AMEBA
A

MUESTRA: Cultivo de ameba

(cultivo de infusorios)
N. Científico: Amoeba

OBJETIVO: 20X

DESCRIPCION: Se observó a menor aumento a una sola ameba que se

movía muy energéticamente de un lado a otro y que
ALGAS
VERDES además digirió unos pequeños microorganismo de la
muestra.

PARAMECI EXPERIMENTO Nº 03: LOCOMOCION por CILIOS en el

O
PARAMECIO

MUESTRA: Cultivo de infusorios (agua estancada)

N. Científico: Paramecium

OBJETIVO: 20X

DESCRIPCION: Se observó a menor

aumento al paramecio que
se desplazaba lentamente,
esto lo hacía gracias a los
cilios que posee.

5
 EXPERIMENTO Nº 04: Observación de ALMIDON / Sin tinción

MUESTRA: Tubérculo de papa (corte fino)

N. Científico: Solanum tuberosum

OBJETIVO: 20X

DESCRIPCION: Se observó en el microscopio a menor aumento

a los gránulos de almidón que se encuentran
contenidos dentro de los leucoplastos.
*Leucoplastos y amiloplastos: Plastidios sin
pigmentos que almacenan sustancias incoloras.
E: Almidón, proteínas o aceites.

G. INULINA
EXPERIMENTO Nº 05: Observación de GRANOS de INULINA

MUESTRA: Tubérculo de dalia

N. Científico: Dahlia

OBJETIVO: 20X

DESCRIPCION: Se observó a menor aumento los

cristales de inulina con forma de
roseta en el tubérculo de dalia.

EXPERIMENTO Nº 06: GLUCOGENO en hígado de rata

MUESTRA: Corte histológico de hígado

OBJETIVO: 20X

DESCRIPCION: No se logró observar con mucha

claridad al glucógeno debido a que
el hígado estaba lleno de mucha
sangre y no se podía lavar bien con
el cloruro de sodio.
Lo que se debía observar

2
EXPERIMENTO Nº 07: Observación de GRANULOS de
ALEURONA (proteína de reserva en semillas)

MUESTRA: Semilla de higuerilla (corte fino)

Nombre científico: Ricinus
communis

OBJETIVO: 10X

DESCRIPCION: Se observó en menor aumento a

muchas células de la semilla de
higuerilla, las cuales cada una
contiene aisladamente a los gránulos de aleurona
que son los puntitos de color blanquecino.

EXPERIMENTO Nº 08: Observación de DRUSAS

(Conjunto redondeado de cristales de oxalato de calcio)

MUESTRA: Peciolo de begonia (corte

transversal)
Nombre científico: Begonia.
Familia: Begoniaceae

OBJETIVO: 10X

DECRIPCION: Se observó con el objetivo de menor tamaño y se

observó a las drusas de forma esferoidal de color
amarillo medio oscuro.

EXPERIMENTO Nº 09: Observación de RAFIDIOS

MUESTRA: Peciolo (pie de una hoja) de la

hoja de hiedra.
Nombre científico: Hedera

OBJETIVO: 10X

DECRIPCION: Se observó con el objetivo de

menor aumento a los rafideos,
aparentemente a uno solo y de
forma alargada.

*Los rafidios son cristales aciculares (con forma

de aguja) de oxalato de calcio.

3
EXPERIMENTO Nº 8-9: Observación de CRISTALES DE
OXALATOS en células vegetales

MUESTRA: Peciolo de begonia (corte transversal)

Nombre científico: Begonia.

OBJETIVO: 10X

DECRIPCION: Se observó a pequeño aumento los cristales de

oxalato hubo uno con forma de prisma y otros
con forma granular (circular)

EXPERIMENTO 10: No se trabajo

EXPERIMENTO Nº 11: Observación de LISOSOMAS

MUESTRA: Mucosa bucal

OBJETIVO: 10X

DESCRIPCION: No se observó la
actividad lisosomal
debido a que no existía
una herida en la que
podemos observar la
fagocitosis de
microorganismos en
leucocitos.

EXPERIMENTO Nº 12: Extracción y separación de pigmentos

vegetales
1º Se machacó en un mortero 10 g de hojas frescas de espinaca con 20 ml de
acetona y una pequeña pizca de CaCO3
2º Se filtró y coloco 10 ml del filtrado en una bureta + 10 ml de éter etílico.
3º Se agito por un momento
4º Se agregó 20 ml de agua destilada por las paredes del tubo
5º Se descargó la capa inferior y lavo la disolución de pigmentos agregando
20 ml de agua destilada, se repitió varias veces.
6º Se extrajo 5 ml de los pigmentos lavados y añadió una solución fresca de:
Hidróxido de sodio 20% + alcohol metílico (1ml)
7º Finalmente agito y dejo en reposo por 10 min.

4
 EXPERIMENTO Nº 13: Reconocimiento de PIGMENTOS
FOTOSINTÉTICOS por CROMATOGRAFIA en papel
Científico: Spinacia oleracea
1º Se pesó 2 g de hojas de espinaca fresca y trituro en un mortero con una
mezcla de acetona-hexano a partes iguales (5 ml cada uno) + una pizca de
Caco3
2º Se filtró con papel de filtro
3º Coloco 1 ml de filtrado en un tubo de ensayo y coloco en contacto con la
tira de cromatografía (se sumergió 2 cm del papel)

EXPERIMENTO Nº 14: Reconocimiento de PIGMENTOS

FOTOSINTÉTICOS por FLUORESCENCIA

N. Científico: Spinacia oleracea

1º Se macero 10 gr de espinaca con un poco de alcohol etílico al 95%

2º Luego se decantó y filtro con gasa y/o algodón
3º Luego se agregó más alcohol etílico y macero un par de veces
más.
4º El producto formado se utilizó para observar la fluorescencia de la
clorofila
5º Se ilumino con una fuente de luz paralelo para observar la
fluorescencia

EXPERIMENTO Nº 15: Observación de CILIOS y flagelos en

células y preparados histológicos

MUESTRA: Cultivo de infusorios

OBJETIVO: 20X

DESCRIPCION: Se observó menor aumento al

paramecio fácilmente y no se
pudo apreciar a los cilios ya
que son demasiados pequeños
para verlos al objetivo que se
eligió. Los paramecios no tienen flagelos.
CILIOS PARAMECI
O
*Infusorio: Se trata de animales unicelulares de tamaño microscópico,
muy pocos de los cuales pueden verse a simple vista, y no son más que
Protozoos acuáticos microscópico

5
IV.DISCUSIÓN

V.CONCLUSIONES

VI.BIBLIOGRAFÍA
https://concepto.de/citoplasma/
Word Reference. 2005. «citoplasma». Consultado
el 26 de octubre de 2007.
Diccionario Ecológico. Ambiente Ecológico.
Consultado el 26 de octubre de 2007. ISSN 1668-
3358
Osorio, Mario Andrés. «Membrana
citoplasmática». monografias.com. Consultado el
26 de octubre de 2007.
Green, E.R. y K. Bobrowsky. 1970. Laboratorio de
Biología. Investigaciones, Publicaciones Culturales
S.A Méjico. 246 pp.

6
ACTIVIDADES EXTRA-AULA:
Citoplasma celular. Pigmentos fotosinteticos por cromatografia

Cilios y flagelos en celulas

Ciclios de cèlulas epiteliales de tràquea

Funciones del citoplasma

Inclusiones citoplasmáticas
Flagelos en Trypanosoma

Definir los organelos subcelulares y sus BIBLIOGRAFÍA DE LA ACTIVIDAD

funciones
Ribosomas

Aparato de Golgi

Fagocitosis de microorganismos en los

leucocitos

Pigmentos vegetales