Este documento describe los procedimientos para aislar y caracterizar Staphylococcus aureus en una muestra, incluyendo diluciones seriadas, siembra en placas de agar Baird Parker, identificación de colonias típicas y atípicas, pruebas de coagulasa y termonucleasa, y recuento de colonias.
0 calificaciones0% encontró este documento útil (0 votos)
162 vistas8 páginas
Este documento describe los procedimientos para aislar y caracterizar Staphylococcus aureus en una muestra, incluyendo diluciones seriadas, siembra en placas de agar Baird Parker, identificación de colonias típicas y atípicas, pruebas de coagulasa y termonucleasa, y recuento de colonias.
Este documento describe los procedimientos para aislar y caracterizar Staphylococcus aureus en una muestra, incluyendo diluciones seriadas, siembra en placas de agar Baird Parker, identificación de colonias típicas y atípicas, pruebas de coagulasa y termonucleasa, y recuento de colonias.
Este documento describe los procedimientos para aislar y caracterizar Staphylococcus aureus en una muestra, incluyendo diluciones seriadas, siembra en placas de agar Baird Parker, identificación de colonias típicas y atípicas, pruebas de coagulasa y termonucleasa, y recuento de colonias.
Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
Descargar como pdf o txt
Está en la página 1/ 8
STAPHYLOCOCCUS
AUREUS GRUPO 4 JUDITH PAOLA GARZON LEÓN LAURA VALENTINA VALBUENA RECUENTO DE ESTAFILOCOCOS AUREUS 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
10 gr muestra Peptona
9 ml
9 ml
9 ml 9 ml 90 ml
1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
Partiendo de las diluciones decimales,
Agar Baird Parker (BP). 0,3 ml sembrar 0,1 ml por duplicado, en placas Baird Parker, mediante extensión en superficie. •Caldo cerebro corazón (Brain Heart incubar a 37ºC durante 48 ± 2 Infusión: BHI). 0,3 ml horas. Después de la incubación, examinar las placas para ver la •Plasma de conejo con presencia de colonias sospechosas de S. aureus ácido etilen diamino tetraacético (EDTA) 0,4 ml
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5
RECUPERACIÓN DE LA CEPA. PRUEBA DE LA PRESENCIA DE LA ENZIMA COAGULASA.
0.2 ml infusion 0.2 ml Solucion caldo BHI Plasma de conejo salina estéril típicas entre colonias
15 Y150
Caldo BHI incubar entre 35 y 37º C Incubar y observar durante 6 h. 24 h 37°C Siembra de P N colonias con Caldo O E BHI S G I A T T I I V V A O LAS COLONIAS TÍPICAS
Staphylococcus aureus sobre agar Baird-Parker son redondas,
de bordes lisos, convexas, de 2-3 mm de diámetro, húmedas, brillantes, negras, con un borde blanco fino, rodeadas de una zona opaca y de un halo claro de 2-5 mm.
LAS COLONIAS ATÍPICAS
Las colonias que no presentan ese color negro brillante o que
no tienen alrededor un halo claro de lipolisis son consideradas atípicas y desechadas.
RECUENTO DE COLONIAS SOSPECHOSAS
Después del periodo de incubación, examinar las placas y seleccionar las
placas que contengan hasta 50 colonias típicas de S. aureus (y hasta 150 colonias totales típicas y no típicas). Para realizar el cálculo se eligen las placas de dos diluciones sucesivas donde al menos una placa de las seleccionadas contenga un mínimo de 10 colonias típicas. A continuación, debemos hacer confirmación/identificación de las colonias sospechosas contadas. 0.3 ml infusion PRUEBA DE LA PRESENCIA caldo BHI DE LA Una de estas dos muestras de ENZIMA TERMONUCLEASA debe calentar a 100°C por un tiempo de 15 minutos y luego dejar enfriar. Muestra 1 Muestra 2
Se toma unas pocas gotas de
cada porción para llenar los Incube a 37°C por 1 a 4 horas. orificios respectivos de una lámina cubierta con el agar.
Un resultado positivo para la termonucleasa estará dado por un halo rosado alrededor de los reservorios de cultivo, tanto el calentado como el no calentado. REFERENCIAS http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/patogNOM Staphylococcusaureus_17365.pdf
