ANTIBIOGRAMA

Sensibilidad
Bacteriana
MICROBIOLOGIA GENERAL
Paul Ehrlich (1908):

Creó el primer compuesto químico sintético Estructura química del Salvarsan
(Salvarsan) que podía curar una infección, la sífilis (“La bala mágica”)
(Treponema pallidum).
Alexander Fleming (1928): Penicillium notatum
Observó que el hongo Penicillium notatum impedía el
crecimiento de Staphylococcus aureus
Florey y Chain (1939): aislaron Penicilina G
Foto original tomada por Fleming Foto actual
El hongo Penicillium notatum impide el crecimiento de

Staphylococcus aureus...
Cracterísticas de un antimicrobiano
Clasificación :
POR SU ORIGEN
POR SU
ESPECTRO
POR FORMA DE
ACCIÓN
“Sustancia o Agente capaz de actuar sobre los microorganismos, ya sea
inhibiendo su crecimiento o causando su muerte”
ANTIMICROBIANOS
(a) Bacteriostáticos…
Inhiben el crecimiento del microorganismo
(b) Bactericidas…
Matan a los microorganismos sin necesidad de destruirlos o lisarlos
(c) Bacteriolíticos…
Matan a los microorganismos por lisis
POR SU
ESTRUCTURA
POR SU
MECANISMO
FACTORES A TENER EN CUENTA ANTES DE ELEGIR EL TTº
ANTIMICROBIANO
• Clínica sugestiva de infección bacteriana

• Localización de la infección
• Posible etiología
• Sensibilidad más probable del patógeno
• Experiencia clínica en el tratamiento
• Factores subyacentes del paciente
• Riesgos potenciales del tratamiento
• Dosis y vías de administración/Coste
Antimicrobiano
TRIÁNGULO DE DAVIS
Infección
Huesped
Microbio Inmunidad
ANTIBIOGRAMA o PRUEBAS DE
SENSIBILIDAD
Definen la actividad in vitro de un antibiótico (o antimicrobiano de origen natural o
sintético) frente a un microorganismo determinado y reflejan la única capacidad de
inhibir la creación de una bacteria o población bacteriana.
El antibiograma tiene el objetivo de evaluar en el laboratorio la respuesta de un

microorganismo con una variedad de antimicrobianos, para traducir, en una primera
aproximación, el resultado con un factor predictivo de eficacia clínica.
ANTIMICROBINOS
Sustancias que inhiben el

Sustacias capaces d’e crecimiento de los
INACTIVAR microorganismos
microorganismos
Bactericida Bacteriostáticos
En el laboratorio se puede estudiar la susceptibilidad a
antimicrobianos que presentan bacterias aisladas desde
una muestra biológica...
La susceptibilidad a antimicrobianos, junto con la identidad

de la bacteria aislada y ciertos factores del hospedero
constituyen las bases para la elección de una terapia
antimicrobiana adecuada…
Pruebas de susceptibilidad antimicrobiana in vitro:

Test por dilución
Test por difusión
MÉTODOS BASICOS PARA EL ESTUDIO DE
SENSIBILIDAD
• Métodos de difusió´n: • Concentración mínima bactericida:
• Método antibiograma disco-placa • Macrodilución en tubo
• Mètode del test d’Epsilon (E-test) • Microdilución en placa
• Mètodes de dilució
• Curva de letalitat
CMB
CMI
Concentración inhibitoria mínima (CIM)

Corresponde a la menor concentración de antimicrobiano que inhibe el
crecimiento bacteriano luego de 18 a 24 horas de incubación.
Concentración bactericida mínima (CBM )

Corresponde a la menor concentración capaz de matar un 99,9% la población
bacteriana.
Factores que afectan la actividad
antibacteriana “in vitro”…
pH del medio de cultivo Algunos antibióticos son activos a pH ácido (nitrofurantoína) y otros lo
son a pH alcalino (aminoglucósidos).
Pueden antagonizar al antibiótico (extracto de levadura antagoniza Componentes del medio de cultivo
a sulfonamidas).
Estabilidad del medicamento Algunos antibióticos se inactivan a la temperatura de cultivo

(clortetraciclina, en menor grado penicilina)
Si hay muchas bacterias, la susceptibilidad es menor y pueden Tamaño del inóculo

aparecer mutantes resistentes.
Tiempo de incubación Si es muy breve los m.o. no mueren; si es muy largo, pueden aparecer
mutantes resistentes o inactivarse el medicamento.
• Cualitativo: difusión con
discos (S, I, R)
• Cuantitativo (CMI en mg/L)

- Dilución en agar
- Dilución en caldo
- Épsilon-test
método de Kirby-Bauer
• Se han desarrollado tablas de interpretación que están

respaldadas por datos clínicos y de laboratorio.
• Es más accesible y de uso común en los laboratorios de

diagnóstico clínico
Muller-Hinton
Agar
Manualment Automàticament
Relación CMI versus dimetro de los halos observados en placa

CONCENTRACIÓ MÍNIMA INHIBITORIA
• SENSIBLES: cuando la CMI de un antibiótico para una bacteria se puede conseguir in vivo, a dosis
terapéuticas.
• RESISTENTES: Cuando el m.o no es inhibido por las concentraciones que normalmente se pueden
obtener en el sitio de infección
• INTERMEDIA: Cuando las bacterias no se inhiben a concentraciones normales, pero pueden inhibirse a
concentraciones mas altas sin resultar tóxicas para el animal
(2018-Actualitat)
(2002-2018)
MÉTODO DISCO PLACA
NO PERMITEN una lectura directa del valor de la CMI.
Contración en el sistema disco placa para Recta de concordancia

Como cuantificar? determinar CMI (recta de regreción
(CMI/diametro))
[Conc] preixente
C1 C2 C3 C4
Metodo de dilución Valor diàmetre de la
soca problema
Estandarización del método
https://www.youtube.com/watch?v=
S0nAVS5gxyg
ANTIBIOGRAMA: DIFUSIÓN CON DISCOS
ANTIBIOGRAMA: DIFUSIÓN CON DISCOS
Antibiograma por Difusión
“(Técnica de Kirby-Bauer)”
Es el método más usado

Es práctico y sencillo de realizar e implementar
Permite analizar un gran número de
antibióticos al mismo tiempo y bajo las mismas
condiciones
Entrega un resultado cualitativo (bacteria
sensible o resistente)
Análisis de Resistente Sensible
varios antibióticos en un (No hay halo de inhibición) (Presencia de halos de
mismo ensayo inhibición)
Salmonella sp.
Pseudomonas sp.
método de Dilución
Los métodos de búsqueda están fundamentalmente en la determinación del crecimiento del microorganismo en presencia de concentraciones
existentes de antimicrobianos, que se diluyen en el medio de cultivo .
❖ Macrodilución: Las primeras determinaciones se van a realizar tomando bacterias de tubos de cultivo a un intervalo determinado de
antimicrobiano.
❖Microdilución: Utilizar placas con micropipetas y microtitulación. Métodos automatizados.
❖Diluido en agar: Cada placa, presenta una cierta concentración de antimicrobiano, permite la inoculación simultánea de un gran número de
microorganismos. Múltiples sistemas de inoculación .
Tradicionalmente, los métodos más acuosos se utilizan para la determinación de la CMI y la concentración bactericida mínima (CMB) de
antimicrobianos.
Diluciones del
Inoculación Incubación Lectura
antimicrobiano en
progresión
geométrica .
La gran cantidad de variables (dependientes del microorganismo, del medio de cultivo, del inoculo) que influyen en los métodos más sólidos son
responsables de oscilaciones en el resultado final obtenido. Para evaluar de forma estandarizada.
método de Dilución
Dilución en medio
METODO DE MACRODILUCIÓN MÉTODO DE MICRODILUCIÓN

En este método s e u t i l i z a u n a b a te r í a d e t u b o s c o n
En cada uno de los compartimentos presenta microtitulación de
d i fe re n te s c o n c e n t ra c i o n e s d e combinación de
antibioticos y microorganismos
microorganismos/antimicrobianos.
ANTIBIOGRAMA: DILUCIÓN EN CALDO
Antibiograma por Dilución
Técnica de referencia en la mayoría de los estudios clínicos de susceptibilidad a
antimicrobianos.
Entrega un resultado cuantitativo, ya que permite determinar la concentración inhibitoria
mínima (CIM).
Se puede realizar en medio líquido (dilución en caldo) o en medio sólido (dilución en agar).
Método complejo y de alto costo.
Lectura del CIM
Dilución seriada en caldo CIM

MÉTODO DE MICRODILUCIÓN EN CALDO
Video:
https://www.youtube.com/watch?v=96_eZQQuwbM
CURVA DE LETALIDAD
❑ Es un método cinético de determinación del poder bactericida.

❑ Evaluar la capacidad de matar en relación al tiempo y diferentes concentraciones fijas de antimicrobianos.
❑ Este método es complementario de CMB.
❑ Proporciona una importante información sobre la dinámica del acción bactericida de un antimicrobiano y sobre la relación entre la concentración
de antimicrobiano y la actividad microbicida.
❑ El poder bactericida se determina en 3 logaritmos decimales (99,9%) en un tiempo fijo.
❑ Básicamente se utiliza en la investigación de antimicrobianos o patógenos emergentes estadounidenses.
Método del epsilómetro E-Test
https://www.youtube.com/wat
ch?v=K0nrFj8lFfA
ANTIBIOGRAMA: E-TEST
tarea
• Realizar un PPT donde se vea el paso a paso de evaluación de la
determinación de CMI y CBM de un producto natural.
• Son dos productos por grupo.
• Buscar y pegar en el mismo PPT tablas de diámetros de halos en
Infecciones Urinarias e Infecciones respiratorias
• Describa 5 Mecanismos de resistencia del microorganismo que usted
considere.

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Paul Ehrlich (1908):

El hongo Penicillium notatum impide el crecimiento de

• Clínica sugestiva de infección bacteriana

El antibiograma tiene el objetivo de evaluar en el laboratorio la respuesta de un

Sustancias que inhiben el

La susceptibilidad a antimicrobianos, junto con la identidad

Pruebas de susceptibilidad antimicrobiana in vitro:

Concentración inhibitoria mínima (CIM)

Concentración bactericida mínima (CBM )

Estabilidad del medicamento Algunos antibióticos se inactivan a la temperatura de cultivo

Si hay muchas bacterias, la susceptibilidad es menor y pueden Tamaño del inóculo

• Cuantitativo (CMI en mg/L)

• Se han desarrollado tablas de interpretación que están

• Es más accesible y de uso común en los laboratorios de

Relación CMI versus dimetro de los halos observados en placa

NO PERMITEN una lectura directa del valor de la CMI.

Contración en el sistema disco placa para Recta de concordancia

Es el método más usado

❖Microdilución: Utilizar placas con micropipetas y microtitulación. Métodos automatizados.

METODO DE MACRODILUCIÓN MÉTODO DE MICRODILUCIÓN

Lectura del CIM

Dilución seriada en caldo CIM

❑ Es un método cinético de determinación del poder bactericida.

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