MICROBIOLOGÍA E

INMUNOLOGÍA
LABORATORIO N° 1
LABORATORIO N° 3
Fluidos corporales estériles
en el diagnostico microbiológico

1
LOGROS DEL APRENDIZAJE

1.- Conocer la importancia del Hemocultivo en el diagnóstico de las

infecciones en la sangre (bacteriemia, fungemia).

2.- Entender la importancia del estudio del Líquido Cefalorraquídeo en

el diagnóstico de las infecciones del Sistema Nervioso.

3.- Saber la importancia del estudio del líquido Pleural en el diagnóstico

de las enfermedades que cursan con derrame pleural

4.- Aprender la importancia del estudio del líquido articular en el

diagnóstico de los procesos infecciosos e inflamatorios intraarticulares.

5.- Conocer la importancia del estudio del líquido peritoneal como

parte del diagnóstico diferencial de las enfermedades que cursan con
ascitis.
1. Conocer la importancia del Hemocultivo en el
diagnóstico de las infecciones en la sangre
permitirá el diagnóstico microbiológico de las
principales infecciones sistémicas

2. Entender la importancia del estudio del Líquido

Cefalorraquídeo en el diagnóstico de las
infecciones del Sistema Nervioso permitirá el
diagnóstico rápido y oportuno de las meningitis.
 FLUIDOS CORPORALES ESTÉRILES
Sustancias que se producen y pueden fluir en el interior de los seres vivos
sin microorganismos.

LCR Liquido Pleural

Liquido Peritoneal
Liquido Articular

Hemocultivo
 FLUIDO
CORPORAL

FISICO QUIMICO CITOLÓGICO MICROBIOLOGICO

Visualización
GLUCOSA DIRECTO directa
COLOR PROTEINAS RECUENTO DE
LEUCOCITOS (GRAM)
ASPECTO ELECTROLITOS
ENZIMAS FORMULA Cultivos
DIFERENCIAL

ANÁLISIS DE UN FLUIDO CORPORAL

CONCEPTOS
➢ BACTERIEMIA:
Es la presencia de bacterias circulando en
la sangre.

❖ FUNGEMIA:
Es la presencia de hongos circulando en
la sangre.

➢ SEPSIS:
Disfunción orgánica potencialmente mortal
causada por una respuesta anómala del
huésped a la infección.

➢ SHOCK SÉPTICO:
Hypotension e hipoperfusión mantenida
con fracaso multiorgánico (Shock)
secundario a sepsis.
TIPOS DE BACTERIEMIAS
 FACTORES DE RIESGO
RELACIONADOS CON
BACTERIEMIA
FUENTE DE INFECCIÓN: FACTORES DE RIESGO:

➢ Catéter intravenoso ➢ Cirugía

➢ Genitourinaria ➢ Traumatismo
➢ Sonda de Foley ➢ Diabetes mellitus
➢ Herida quirúrgica (quemadura) ➢ Insuficiencia Renal
➢ Abscesos ➢ Neoplasia
➢ Infección intraabdominal ➢ Cirrosis
ETIOLOGIA DE LA BACTERIEMIA

▪ Los agentes causales de bacteriemia

están cambiando.
▪ Actualmente los cocos Gram + están
superando en frecuencia a los bacilos
Gram negativos probablemente
condicionados por la amplia utilización de
antibióticos de amplio espectro y el uso
generalizado de catéteres intravasculares.

Gram +: Estafilococo Aureus,

estafilococo epidermidis y oros
coagulasa negativos, Enterococo
faecalis.
Gram negativos: E. Coli, Klebsiella sp.,
P. Aeruginosa, Acinetobacter.
Hongos: Cándida sp.
HEMOCULTIVO
➢ Es una Técnica de laboratorio y herramienta diagnóstica, que tiene
como finalidad identificar la presencia de un microorganismo (bacteria,
hongo) en la sangre.

➢ El tiempo promedio de identificación: 3 - 5 días.

IMPORTANCIA

❖ Diagnóstico preciso

❖ Encontrar el microorganismo causante de la bacteriemia

❖ Realizar la prueba de Sensibilidad

❖ Guiar el tratamiento

Hemocultivo: Gold estándar en el diagnóstico de sepsis

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¿CUÁNDO SOLICITAR HEMOCULTIVOS?
• Paciente febril sin foco.
• Shock sin causa aparente.
• Neumonía nosocomial, pielonefritis, meningitis,
infección abdominal, infecciones complicadas de piel.
• Leucopenia o leucocitosis no relacionada con
enfermedades hematológicas.
• Hipertermia (> de 39,5°C) en TODO lactante menor de
03 meses.
• Síndrome febril en inmunodeprimidos.
• Paciente febril portador de catéter venoso.

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MATERIALES
FRASCOS DE HEMOCULTIVO

Medios:

✓ Caldo Columbia

✓ Infusión cerebro corazón

✓ Caldo de peptona
suplementado

➢ Llevan incorporado un
anticoagulante usualmente
Polietanol sulfato sódico.
HEMOCULTIVO
• FASE PRE ANALÍTICA

• FASE ANALÍTICA

• FASE POST ANALÍTICA

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 HEMOCULTIVO

FASE PRE ANALÍTICA

– ORDEN DE ANÁLISIS

– TOMA DE MUESTRA

– FACTORES A TENER EN CUENTA

– TRANSPORTE

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TOMA DE LA MUESTRA
 ORDEN DE ANÁLISIS
Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil: ---------
H.C. ------------------ Procedencia: --------Dirección: ------------------------- Teléfonos: ----------- DNI: ------------
Correo electrónico: ------------------------- Aviso en caso de emergencia: ------------------------------
Antecedentes patológicos familiares:

Antecedentes patológicos personales:

Impresión diagnóstica:
Tratamiento con antibióticos o antisépticos u otros deinterés:

Condiciones sanitarias y epidemiológicas:

Descripción detallada de las lesiones :

• Muestra: Sangre venosa periférica.

• Indicaciones para la toma de la muestra:
_
• Fecha Indicación:
• Fecha toma de muestras :

Médico Firma

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LAVADO DE MANOS

Con una buena técnica

aséptica el porcentaje
hemocultivos
contaminantes no debe
sobrepasar el 3%.
MOMENTO DE LA TOMA DE LA MUESTRA
TÉCNICA
TÉCNICA
 TOMA DE MUESTRA
• Bioseguridad.
• Asepsia y antisepsia.
• Número de muestras Adulto: 02
• Volumen de muestra Adulto: 10
mL.
• Volumen de muestra pediátrico: 1
- 2 ml (según peso y edad).
• Inicio de pico febril.
• Sangre venosa periférica.
• Inocular primero la botella
anaeróbica (evitar la entrada de
aire)
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RETROCULTIVO
 HEMOCULTIVO
FASE ANALÍTICA

• Aislamiento e identificación.
• Sensibilidad y resistencia a los
antimicrobianos.

1. Sistemas manuales

2. Sistemas automatizados

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23/09/2019
Fuente: Manual de bacteriología clínica SEIMC 27
PROCEDIMIENTO

Del frasco que esta creciendo, se retira de 3 a 5 ml para coloración y subcultivo

SUBCULTIVO
¿CÓMO DISMINUIR LA
CONTAMINACIÓN?
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IDENTIFICACIÓN POR
TÉCNICAS MOLECULARES
 HEMOCULTIVO
• FASE POST ANALÍTICA:
– Reporte de resultados
– Interpretación de resultados
– Toma de decisiones

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 FASE POST ANALÍTICA
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
• Correlación
clínica.

• Falsos
positivos.

• Falsos
negativos.

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 ESTUDIO DEL LCR

➢ El estudio del líquido cefalorraquídeo (LCR) sigue siendo

de gran utilidad en el diagnóstico de enfermedades
infecciosas, neurológicas y oncológicas.

➢ Los valores normales de proteínas, glucosa y células van

a depender de la edad del paciente.

➢ Existen distintas pruebas de laboratorio para la

identificación de agentes microbiológicos, unas de
detección rápida (tinción de Gram) útiles para un
diagnóstico inicial y otras más tardías (cultivo), estudios
con reacción en cadena de la polimerasa para un
diagnóstico definitivo.
LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO NORMAL

✓ Formación: Plexos coroideos de los ventrículos cerebrales y

epéndimo (500 ml/dia, recambio 3 veces al dia)

✓ Reabsorción: Granulaciones aracnoideas

✓ Volumen Normal: Adultos (100 - 150 ml), recién nacido (10 – 60

ml)

✓ Obtención: Punción Lumbar (L3 – L5)

✓ Color: Incoloro

✓ Presión Normal: Depende de la posición y edad (6-18 cm agua:

adulto en decúbito lateral)

✓ Proteínas: 10 – 45 mg/dl

✓ Glucosa: 40 – 80 mg/dl (50-75% de la concentración en sangre)

CAUSAS FRECUENTES DE INFECCIONES DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL

Fuente: Manual de bacteriología clínica SEIMC

 ASPECTO EXTERNO DEL LCR

❖ TURBIO: Inflamatorio, infeccioso

❖ HEMORRAGICO: Hemorragia Subaracnoidea, traumático

❖ XANTOCRÓMICO: Sangrado en evolución

EXAMEN DE LCR

• Coloraciones:
– Gram
– Wayson
– Naranja de
acridina
– Tinta china
– Ziehl Neelsen

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23/09/2019 40
 CULTIVO DE LCR
• FASE POST ANALÍTICA:
– Reporte de resultados
– Interpretación de resultados
– Toma de decisiones

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DIAGNÓSTICO

DIFERENCIAL
LIQUIDO PLEURAL

✓ Formación: Pleura parietal

✓ Reabsorción: Vía linfática (pleura parietal)

✓ Volumen Normal: 5 – 15 ml.

✓ Obtención: Punción Pleural

✓ Color: Incoloro

✓ Proteínas: 1 – 1.5 g/dl

✓ Células: 1500 células /microlitro, monocitos (30-75%), células

mesoteliales (3 – 70%), linfocitos (2 – 30%)
 LIQUIDO PLEURAL
ESTUDIO BIOQUIMICO:

➢ Albumina suero y liquido pleural

➢ LDH suero y liquido pleural

CRITERIOS DE
LIGHT
TRASUDADO Y EXUDADO
ESTUDIO DEL
LIQUIDO
PLEURAL
 ESTUDIO DEL
LIQUIDO SINOVIAL

Importancia:
➢ Diagnostico de enfermedades
Reumatológicas (artritis, artropatía por
cristales., artrosis etc)

➢ Procedimiento: Artrocentesis

➢ Indicación principal: Descarte de

artritis séptica.
CARACTERISTICAS EXTERNAS DE
LIQUIDO SINOVIAL

NORMAL INFLAMATORIO

HEMORRAGICO SEPTICO
LIQUIDO SINOVIAL
Diagnóstico Diferencial
 LIQUIDO PERITONEAL

PARACENTESIS

CARACTERISTICAS NORMALES ASCITIS

ESTUDIO DEL LIQUIDO ASCITICO

ESTUDIO BIOQUIMICO

ALBUMINA EN SUERO
ALBUMINA EN LIQUIDO ASCITICO
GRADIENTE DE ALBUMINA: ALBUMINA SERICA – ALBUMINA ASCITIS
ALTERACIONES DEL LIQUIDO ASCITICO
APLIQUEMOS LO APRENDIDO

1.- Es un factor de riesgo relacionado con bacteriemia, excepto:

a.- Insuficiencia Renal
b.- Diabetes Mellitus
c.- Cirrosis
d.- Hipertensión arterial
2.- En relación a la toma de muestra del Hemocultivo, todo es cierto, Excepto:
a.- Se usan 2 frascos de hemocultivo
b.- El volumen de la muestra de sangre en el adulto es de 10 ml
c.- El volumen recomendado en lactantes es de 5 ml.
d.- Usualmente la toma de la muestra se realiza con la presencia del pico febril
3.- En relación al procesamiento del Líquido Cefalorraquídeo todo es cierto,
excepto:
a.- Del sedimento se obtiene la muestra para el estudio del Gram
b.- Del sobrenadante se obtiene la muestra para el estudio serológico
c.- Del sobrenadante se obtiene la muestra para el estudio de cultivo
d.- Del sedimento se obtiene la muestra para el estudio de tinta china
INTEGREMOS LO APRENDIDO

Usted plantea un diagnóstico de meningitis probablemente neumocócica y

realiza una punción lumbar. ¿Cuál de los siguientes valores apoya su
diagnóstico?
a.- Células a predominio neutrófilos, proteínas elevadas, glucosa
disminuida.
b.- Células a predominio linfocitos, proteínas elevadas, glucosa normal
c.- Células a predominio linfocitos, proteínas elevadas, glucosa disminuida
d.- Células a predominio linfocitos, proteínas normales, glucosa disminuida
ACTIVIDAD VIRTUAL ACTIVA (AVA) N° 3

Caso Clínico:
Paciente masculino, 30 años de edad, con antecedente de Fiebre
Reumática hace 10 años, quién refiere desde hace 30 días fiebre no
cuantificada, disminución de peso, hiporexia y astenia. Hace 1 semana
acude a la consulta ambulatoria de medicina, en el examen físico se
evidencia un paciente pálido y le encuentran un soplo cardiaco a nivel
del foco mitral. Le solicitan hemocultivo y es referido al Hospital para
su reevaluación.
Preguntas:
1.- ¿Qué consideraciones particulares debe tener la toma del
hemocultivo en un paciente con Endocarditis infecciosa?
2.- Considerando la importancia del cuadro clínico ¿Qué errores
debería prever para evitar la contaminación y resultados poco fiables?
3.- Si el resultado del hemocultivo es negativo ¿Cuáles serían las
probables explicaciones?
ACTIVIDAD VIRTUAL ACTIVA (AVA) N° 3

Bibliografía
Lamas C., Fournier P., Zappa M., Brandao T. Januario-da-Silva C., Correia M. Diagnosis
of blood culture-negative endocarditis and clinical comparison between blood
culture-negative and blood culture-positive cases. Infection [Publicación periódica en
línea] 2015. December [Cited 2021 Feb 8]; [8 pp.]. Available from:
https://link.springer.com/article/10.1007/s15010-015-0863-x
Liesman R., Pritt B., Leibach E., Maleszewski J., Patel R. Laboratory Diagnosis of
Infective Endocarditis. Clinical Microbiology Reviews [Publicación periódica en línea]
2017. September [cited 2021 Feb 8]; 55 (9) [10 pp.]. Available from:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5648697/pdf/zjm2599.pdf
Sexton D., Chu V. Endocarditis de válvula nativa: epidemiología, factores de riesgo y
microbiología [en línea]. UpToDate. Revisión de la literatura vigente hasta enero de
2021. [Citado: 2021 febrero 7]. Endocarditis Infecciosa. Disponible en
https://www.uptodate.com/contents/native-valve-endocarditis-epidemiology-risk-factors-
and
microbiology?search=endocarditis%20infecciosa&source=search_result&selectedTitle=5
~150&usage_type=default&display_rank=5
“CAMBIAS TUS PENSAMIENTOS
Y CAMBIARAS TU MUNDO”

Norman Vincent Peale

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