Microbiologia Basica para El Area de La-154-172
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Virus
decir, que los virus solo se activan cuando infec la respuesta defensiva contra una infección viral;
tan una célula viva pues su información genética 2) a temperaturas superiores a 45° C; 3) al éter
es suficiente, en ese momento, para duplicar su que inactiva los virus que poseen la membrana
ácido nucleico y lograr invadir y, posteriormente, rica en lípidos que envuelve a la cubierta proteica
salir de la célula hospedera. de protección o cápside; 4) al formaldehído que
9. Cristalizables. Es una propiedad que destruye la infectividad del virus al reaccionar
contribuye a los estudios de la virología, porque con el ácido nucleico.
permite analizar la organización de las sub- 11. No son sensibles. 1) A los antibióticos;
unidades proteicas que conforman la cápside o 2) a las sulfonamidas antibacterianas, y 3) a las
cubierta proteica protectora del material genético temperaturas bajas.
del virus, quienes informan si los virus que se es
tudian poseen cápsides helicoidales, poliédricas, Morfología
combinaciones más complejas de ambas formas
como los virus bacterianos o bacteriófagos que Con los adelantos del microscopio electrónico
generalmente muestran una “cabeza” poliédrica y el perfeccionamiento de las técnicas de con
y una “cola” helicoidal. traste, se ha logrado observar gran variedad de
10. Sensibles. 1) A una proteína producida morfologías virales altamente simétricas (véase
por las células humanas, excepto por los glóbulos figura 6.2). En los virus se reconocen dos tipos
rojos, llamada interferón, que pertenece a esa de simetrías: la cilindrica y la esférica corres
gran familia de las citoquinas que inhiben la pondientes a las dos formas primarias que poseen
duplicación viral porque, los interferones, son los casi todos ellos. Los virus con forma cilindrica
primeros que actúan en el cuerpo (en horas) en poseen simetría helicoidal (virus del mosaico
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Virus / 143
del tabaco o TMV), y los esféricos, simetría del genoma viral de la acción de las enzimas
icosaédrica (virus del papiloma humano o HPV). intracelulares de la célula hospedera como las
Esta morfología muestra una estructura simétrica nucleasas, por ejemplo.
casi esférica, compuesta por veinte caras y se 3. Lípidos. Los virus no pueden producir
constituye en el modo más eficiente de ordenar sus propios lípidos, por consiguiente, deben
las subunidades proteicas (los capsómeros) en obtenerlos a expensas de las células que infectan
una cubierta cerrada (la cápside), utilizando el y pueden ser diversos tipos de lípidos, según la
menor número de unidades y la mayoría de los célula que estén infectando.
virus tienen más ácido nucleico del que puede Los virus que presentan envoltura rica en
empaquetarse en otro tipo de simetría. lípidos se describen como virus cubiertos o en
vueltos y son sensibles a los disolventes de grasas
Composición como el éter, cloroformo y sales biliares. Los que
no la poseen son virus desnudos y son resistentes
El estudio de la composición química de los a esas sustancias (véase figura 6.4).
virus ha sido posible gracias a los adelantos 4. Carbohidratos. Estas sustancias también
tecnológicos y al empleo de diversas técnicas son obtenidas a expensas de las células infec
analíticas que han logrado purificar y concentrar tadas y se ubican en la cubierta viral en forma
los virus, sin desnaturalizar sus componentes. de glucoproteínas conformadas por diferentes
Estos estudios han permitido observar que los monosacáridos como fructosa, mañosa, gluco-
virus están compuestos por: ácido nucleico, samina, galactosa. Los carbohidratos o glúcidos
diversas proteínas y en algunos casos por car que se encuentran en los virus hacen parte de los
bohidratos y lípidos. azúcares que componen el ácido nucleico.
1. Acido nucleico. Es el soporte de la info- Además de las sustancias mencionadas, los
mación genética, de la capacidad de replicación virus más complejos presentan huellas de me
y por consiguiente de la infecciosidad. Como los tales y sustancias vitaminoides.
virus únicamente posee un solo tipo de ácido nu
cleico, ADN o ARN, pero en ningún caso los dos Estructura
al mismo tiempo, los científicos los clasificaron en
dos grandes grupos: 1) desoxirribovirus cuando Los virus están compuestos por:
su ácido nucleico es ADN, y 2) ríbovirus cuando su Cápside. Es una cubierta proteica, simétrica y
ácido nucleico es ARN. rígida que protege el ácido nucleico componente
Los ríbovirus son el único ejemplo en la del genoma viral. Las cápsides están constituidas
naturaleza de agentes infecciosos, en los cuales de una manera altamente simétrica, es decir, que
el ARN es el portador de toda la información las formas de las unidades proteicas se ordenan
genética. en forma perfectamente regular.
Este ácido nucleico puede estar constituido Capsómeros. Son subunidades proteicas que
por una sola cadena de nucleótidos (ácido nu se unen para formar la cápside.
cleico monocatenario), o por una doble cadena Material genético. Se encarga de la transmi
de nucleótidos (ácido nucleico bicatenario). sión de la información genética contenida en uno
El peso molecular y longitud del ácido nu de los ácidos nucleicos, bien sea, ADN o ARN.
cleico se relacionan con el tamaño del virus y Nucleocápside. La conforman la cápside y
puede presentarse como una gran molécula lineal el ácido nucleico. Actualmente se sabe que la
o circular (véase figura 6.3). membrana lipídica o envoltura no hace parte
2. Proteínas. Estos compuestos constituyen del virión.
cuantitativamente la fracción más importante Envoltura. Es una estructura membranosa
de los virus, de 50 a 90% del total de sus com que poseen solo algunos virus llamados cu
ponentes, y tienen como función la protección biertos y su composición es una bicapa lipídica
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durante meses. A temperaturas de -196 °C, que algunos fármacos antivirales, aunque no resultan
es la temperatura de congelación del nitrógeno ideales, pues, todavía no han podido desarrollar
líquido, pueden conservarse activos durante se exitosamente.
años. 3. pH. Los virus son muy sensibles a los
2. Radiaciones. Tanto las radiaciones no cambios de acidez y basicidad ocurridos en el
ionizantes (luz ultravioleta), como las ionizantes medio donde se encuentran, por esta razón, es
(los rayos X) inactivan los virus porque alteran la muy importante tener en cuenta factores químicos
cadena de nucleótidos, produciendo roturas, forma como el pH, cuando se requiere hacer cultivos
ción de dímeros, entre otras alteraciones. Los virus virales en el ámbito del laboratorio. Los viras
más sensibles a las radiaciones son los que poseen son sensibles a los cambios drásticos de pH, sólo
ácido nucleico monocatenario, es de anotar que soportan límites entre 5,0 y 9,0, por debajo o por
las dosis de radiación cambian para los diferentes encima, respectivamente, de estos rangos los viras
virus. Las partículas irradiadas, que ya no tienen se inactivan.
capacidad de replicación, pueden ser aún capaces
de manifestar algunas funciones muy específicas Cultivo de los virus
en las células hospederas.
Estas partículas infecciosas solo se desarrollan
Agentes químicos en el interior de células vivas. Para aislar y culti
var los virus en el laboratorio se utilizan diversos
Entre los agentes químicos se consideran los procedimientos.
disolventes lipídicos, los antibióticos. Es impor
tante tener en cuenta el efecto que causa el pH Animales de experimentación
sobre los virus.
1. Disolventes lipídicos. Los virus que poseen Es el método más antiguo para aislar y conservar
envoltura lipoprotéica se pueden inactivar fácil los virus. Los viras se inoculan en animales de
mente con los disolventes de grasa, como el éter, experimentación y se produce, casi siempre, una
el cloroformo, los detergentes amónicos como el enfermedad con lesiones características que se
desoxicolato sódico y los detergentes no iónicos puede transmitir en serie. Pero por el alto costo, a
como Nonidet P40® y Tritón X-100®. la presencia de virus latentes y por dichos anima
En cambio, los viras desnudos son resistentes les presentar respuesta inmunitaria, los métodos
a la mayoría de los desinfectantes que se emplean de inoculación se emplean cada vez menos y
para bacterias y otros microorganismos. Pero quedan reducidos a la inoculación intracerebral
son muy sensibles a agentes oxidantes como de ratones adultos y lactantes. Sin embargo, los
hipocloritos y compuestos yodóforos, al formol, animales se utilizan actualmente en investiga
el glutaraldehído y a los ácidos en general, prin ciones experimentales sobre virus oncógenos
cipalmente al ácido clorhídrico diluido. (productores de tumores), sobre la patogenia e
2. Antibióticos. Estos fármacos que se utili inmunidad de las virosis o infecciones causadas
zan exitosamente en infecciones bacterianas, no por los virus y para la obtención de antisueros
son eficaces contra los virus. Solamente existe (véase figura 6.5).
un tipo de antibióticos que podría inactivar a los
virus y son los que interferirían la síntesis de Huevos embrionados
ADN y ARN porque impedirían el mecanismo
de replicación viral. Pero dichos antibióticos Los huevos embrionados presentan la ventaja de
también interfieren en el metabolismo de la ser animales embriológicamente estériles, con
célula hospedera y son altamente tóxicos para escaso riesgo de virus latentes y sin producir
ser utilizados en los tratamientos de infecciones respuesta inmunitaria. Los virus pueden inocu
virales humanas. Sin embargo, se dispone de larse en huevos embrionados entre 7 y 14 días de
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incubación; haciendo un pequeño agujero en el la mayoría de los viras y se utilizan los cultivos
cascarón, se alcanza la zona necesaria, según el de órganos para el aislamiento de virus de difícil
virus que se investiga: en la cavidad alantoidea, el desarrollo o en casos especiales.
virus de la gripa; en la membrana corioalantoidea,
el virus de la viruela; en la cavidad amniótica, Cultivos celulares
o sea, directamente en las vías respiratorias del
embrión, el viras de la gripa y las paperas; o Cuando Enders descubrió que los virus eran ca
en el saco vitelino, el virus del herpes (véase paces de replicarse en cultivos de células aisladas
figura 6.6). o disociadas, este descubrimiento se constituyó
Actualmente los estudios en este tipo de medio en el método fundamental para ei cultivo de los
de cultivo se encuentran bastante restringidos, virus. Estos cultivos pueden ser:
principalmente, para el virus de la gripa. 1. Cultivos celulares primarios. Esta técnica
consiste en cultivar células aisladas proceden
Cultivos tisulares tes de tejidos normales. Los tejidos u órganos
normales de origen animal o humano, se tratan
Aunque los cultivos de tejidos y de células se con tripsina (enzima que rompe el cemento
conocen desde hace mucho tiempo, solo pudie intracelular) y las células del tejido se separan
ron utilizarse de manera sistemática cuando se o disgregan. Se obtienen así suspensiones de cé
descubrieron los antibióticos que permitieron lulas aisladas que una vez lavadas y contadas se
evitar las contaminaciones bacterianas. siembran en tubos, matraces, botellas especiales,
Las células pueden cultivarse a partir de que contengan en su interior un medio de cultivo
fragmentos de tejidos o explantes (cultivos tisu adecuado por ejemplo el medio de Hanks.
lares) o también de células aisladas o disociadas Las células se sedimentan, se adhieren al vidrio
(cultivos celulares) o de cortes de órganos que y se multiplican alrededor de una división diaria,
conservan su arquitectura (cultivos de órganos). y forman islotes de crecimiento que se extienden
En la actualidad, los cultivos celulares constitu progresivamente hasta que entran en contacto,
yen el método de elección para el desarrollo de momento en el cual se inhibe su crecimiento (fe-
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nómeno de inhibición por contacto), por último, tripsina; obtienen células aisladas, lo que permite
se forma una monocapa en la pared del recipiente iniciar un nuevo cultivo que se conoce como
que constituye el sustrato sobre el cual se desa cultivo secundario.
rrollan los virus. Este tipo de cultivos no tienen 3. Cultivos celulares permanentes o de
duración indefinida, por lo que deben prepararse capa continua. Se obtienen utilizando células
cultivos nuevos a partir de material fresco cada tumorales, por ejemplo, las células He La, que son
vez que el estudio lo requiera. células neoplásicas o cancerosas de cuello uterino.
2. Cultivos celulares secundarios. Los culEste tipo de cultivos crece de forma indefinida y
tivos primarios se mantienen vivos cambiando son los más utilizados en investigaciones virales,
el medio dos o tres veces por semana. Cuando porque suministran material de estudio de forma
están muy desarrollados se tratan de nuevo con continua.
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Tabla 6.1 Clasificación de los virus según su tropismo o afinidad por diferentes tejidos
Tropismo
Tejido Tejido nervioso Piel Visceras y Vías y tejidos Muchos tipos de Promueven de
afectado órganos internos respiratorios células y tejidos sarrollo tumoral
Verrugas
diferentes según la infección viral que sufra la con el medio ambiente: la piel, las mucosas y
célula. A veces su tamaño es mayor que el de la cavidad bucal. Las mucosas más importantes
la partícula viral y tienen afinidad por ciertos son: la digestiva y la respiratoria. Existen tam
colorantes de carácter químico ácido como la bién dos superficies menos extensas que son la
eosina. Pueden ser detectados en el núcleo, en conjuntiva y el aparato genitourinario.
el citoplasma o en ambos. La presencia de los Para que el virus pueda invadir el organismo
cuerpos de inclusión en las células pueden tener debe infectar células de una de estas superficies.
una considerable importancia en el diagnóstico La infección viral cumple con las siguientes
médico, por ejemplo, el virus de la rabia produce etapas: 1) proliferación de los virus en el sitio de
los cuerpos de Negri y el de la viruela los cuer entrada; 2) proliferación en los ganglios linfáti
pos de Guarnieri, ambos son patognomónicos cos regionales; 3) viremia, es decir, penetración
de las dos entidades virales. del virus al torrente sanguíneo, y 4) asentamiento
Los cuerpos de inclusión detectados en el cito en el órgano afectado (véase tabla 6.1).
plasma de la célula pueden ser producidos por los
virus de la viruela humana, la viruela ovina, de las Virus bacterianos
gallinas, la rabia y otras. Las inclusiones intranu-
cleares detectadas pueden provenir de la infección Según los hospedadores u organismos infectados
de los virus de la varicela o el herpes, entre otros. se conoce la clasificación de los virus, en: virus
Estos efectos citopáticos que se observan animales, virus vegetales o de las plantas y virus
in vitro son exactamente iguales a los que se bacterianos o bacteriófagos o abreviadamente
producen in vivo. fago, que viene del griego phagein y significa
comer. De estos grupos, tal vez el más estudiado
Patogenia viral es el de los virus bacterianos o bacteriófagos. Estos
virus infectan bacterias del grupo entérico, como
En general, el cuerpo de los vertebrados posee Escherichia coli y Salmonella thyphimurium.
tres grandes superficies que están en contacto Sin embargo, se conocen virus que infectan tanto
Virus / 151
al dominio Bacteria como al Archaea. El viras bacteriófago T4. El virión del fago T4 es estructu
bacteriano con el mayor genoma conocido es el ralmente complejo y consta de una cabeza de forma
bacteriófago G (la G mayúscula, indica gigante) icosaédrica y una cola compleja, la cual, posee un
que infecta a Bacillus megaterium. La mayoría de tubo helicoidal con una vaina contráctil, que se une
los bacteriófagos estudiados en detalle contienen a la cabeza por medio de un collar y termina en una
genomas de ADN bicatenaiio y hasta el momento placa basal o platina dotada de unas espículas y al
es el tipo de virus bacteriano más común en la final de la cola se encuentran unas fibras caudales
naturaleza. Uno de ios más conocidos es el coli- que se fijan a la platina. En la figura 6.12 se observa
fago, que en virología y genética se conoce como una representación esquemática del fago T4 y su
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forma de infectar a la bacteria E. coli. ponentes necesarios para “fabricar” más virus.
Muchos de los conceptos básicos existentes Luego los componentes se ensamblan formando
en la virología actual se originaron de trabajos virus nuevos y estos nuevos virus deben salir de
realizados con bacteriófagos y posteriormente se la célula para infectar nuevas células.
aplicaron a virus de organismos superiores. Los virus han desarrollado diferentes méto
dos para lograr la multiplicación en las células
Infección viral hospederas parasitadas por ellos. Aunque los de
talles varían de un grupo a otro, el patrón general
Los virus solo se replican en células vivas y de los ciclos de replicación es semejante.
pueden ser lisogénicos cuando se integran al cro
mosoma de la bacteria, así cada vez que esta se Ciclo lítico
reproduce lleva el virus en su material genético
transmitiéndolo de generación en generación, Se toma como ejemplo la replicación del virus
este ciclo se conoce como ciclo lisogénico. Cuan bacteriófago conocido como colifago para esque
do los virus lisan o destruyen la célula hospedera, matizar el ciclo lítico viral pues, generalmente,
el ciclo se denomina ciclo Utico. los pasos de la infección viral son comunes a la
Los virus que realizan este último ciclo utili mayoría de los bacteriófagos.
zan la maquinaria metabólica del hospedero para Los virus infectan a las bacterias inyectando
obtener energía y los precursores de bajo peso el ácido nucleico, utilizan el tubo para abrir un
molecular para la síntesis de proteínas y ácido agujero al punzar la pared celular. El ácido nu
nucleico viral, es decir, que el virus induce a cleico viral comienza a controlar el metabolismo
la célula hospedera a sintetizar todos los com de la célula y “dirige” a la bacteria en la síntesis de
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Etapa 1: adsorción
Etapa 2: infección
E tapa 3: replicación
más ácido nucleico viral, para fabricar partículas Se presenta inmediatamente después de la in
de viras completas. En corto tiempo, las partícu yección del ácido nucleico a la célula bacteria
las de viras recién formadas se liberan, mediante na. Esta fase del ciclo también se conoce como
la ruptura o lisis repentina de la pared celular, así periodo de eclipse. Esta etapa es un estadio de
quedan libres para infectar a otras bacterias sus intensa actividad sintética, el virus se encarga
ceptibles y dar inicio a un nuevo ciclo. El ciclo de la maquinaria metabólica de la bacteria ha
lítico se produce en cinco etapas: 1) adsorción, ciéndola fabricar ácido nucleico virale, en vez de
2) infección, 3) replicación, 4) ensamblaje, 5) los ácidos nucleicos bacterianos, necesarios para
lisis (véase figura 6.13). que la bacteria fabrique cada una de sus partes.
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tado con el virus o sin ella. Ejemplos: fiebre del Sin embargo, Iwanowoski pudo demostrar que
Colorado causada por picadura de garrapata y el agente causal del mosaico del tabaco pasaba a
encefalitis de La Crose (véase figura 6.21). través de los filtros para bacterias, no podía culti
varse en los medios conocidos ni se podía ver en
Virus: sumario el microscopio de luz.
Luego se comprobó que si la fiebre añosa podía
Hacia finales del siglo xix se formuló la teoría de transmitirse de un animal a otro, el agente causal
que cada enfermedad se produce por un germen. tenía que “reproducirse” y no podía ser, por tanto,
Se tenía, entonces, la seguridad de que para cada una toxina bacteriana, puesto que los experimentos
enfermedad infecciosa habría de encontrarse un se habían realizado con un grado muy elevado en
microorganismo que podría verse con ayuda del cada paso, es decir, utilizando la tecnología más
microscopio, cultivarse en un medio nutritivo y avanzada de la época. Así la primera definición del
ser retenido por los filtros. Pero los investigadores nuevo tipo de agentes infecciosos, los virus, se ex
reconocían que había un conjunto de organismos, puso en términos totalmente negativos: no podían ser
tan molestos como los anteriores, que no eran vistos, no podían ser cultivados y, lo más importante,
susceptibles de ser cultivados in vitro. no eran retenidos por los filtros para bacterias.
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