Universidad De Oriente

Núcleo Bolívar
Escuela de ciencias de la salud
“Dr. Francisco Battistini Casalta”
Departamento de Bioanálisis

Determinación de salicilatos en muestra de orina

Profesora: Integrantes:

Lic. Odalis Hernández Aguilera, Nathasha CI. 27110932

López, Fiorella CI. 26139297
López, Luis CI. 27077030
Muñoz, Luisiana CI. 27437096
Noel, Gianna CI. 26922219
Salazar, Miranda CI. 26291758

Ciudad Bolívar, 15 de Noviembre de 2021

 INTRODUCCIÓN

Los salicilatos, especialmente el ácido acetilsalicílico, han sido ampliamente

prescritos y utilizados como analgésicos, antiinflamatorios y antipiréticos de primera
elección por millones de personas a nivel mundial. Su venta libre y fácil acceso a la
población los convierte en un elemento común en los botiquines de primeros auxilios
en la mayoría de los hogares, por este motivo a menudo son causantes de
intoxicaciones de diferentes tipos.
Algunos factores como la susceptibilidad del niño a los cambios hidroeletrolíticos y su
escaso poder de desintoxicación, hacen que la administración de salicilatos adquiera
especial importancia en la edad pediátrica. Algunos infantes pueden desarrollar el
síndrome de Reye que consiste en una inflamación cerebral (encefalopatía) y
hepática que se presenta en niños a los que se ha tratado con salicilatos.
El efecto analgésico, antipirético y antiinflamatorio producido por los salicilatos,
ocurre predominantemente por inhibición de la ciclooxigenasa, con una subsecuente
disminución en la producción de prostaglandinas y sus respectivos autacoides. Entre
los síntomas más comunes que presenta un paciente con intoxicación por salicilatos
se pueden citar los siguientes: molestias gastrointestinales (vómito, irritación y
hemorragia), hiperpnea, tinitus, alcalosis respiratoria y acidosis metabólica; en caso
de una intoxicación grave pueden manifestarse convulsiones, coma, hipoglucemia (o
en ocasiones hiperglucemia), hipertermia y edema pulmonar.
Recientemente se han encontrado nuevas aplicaciones terapéuticas al ácido
acetilsalicílico, incluyendo terapia profiláctica para migrañas y cáncer de colon, como
un agente antiplaquetario para la prevención de isquemia coronaria y cerebro-
vascular. Estos usos hacen que este fármaco adquiera mayor popularidad en la
población que se ve afectada por los padecimientos anteriormente mencionados,
convirtiendo a sus nuevos consumidores en un grupo expuesto a intoxicaciones.
Cuando se sospecha u ocurre una intoxicación por salicilatos, es necesario
cuantificar y monitorear sus niveles séricos y otra medida es su detección por orina
del medicamento, para determinar el tratamiento de soporte y el pronóstico de la
intoxicación.
SALICILATOS
Principal representante: ácido acetilsalicílico (aspirina).
Uso: en el tratamiento reumatoide, artritis y artrosis, neuralgia, mialgia, cefalalgia y
otras enfermedades en las que se manifiesta reacciones inflamatorias y febriles.
Son utilizados como profilácticos en el tratamiento de los fenómenos
tromboembolicos.

CARACTERÍSTICAS FÍSICO-QUÍMICAS:
El ácido acetilsalicílico (ácido ortohidróxibenzoico): polvo blanco, cristalino,
solubilidad variable en agua, alcohol y éter, altamente irritante, (limita su uso
externo), han sintetizado algunos derivados del ácido, (éteres y sales) para uso
sistémico.

MÉTODOS DIRECTOS. ENSAYOS CUALITATIVOS.

Reacción de Trinder
1. A 1 ml de muestra de orina, adicione 0,5 ml de solución al 10% de cloruro
férrico.
Resultado: positivo púrpura persistente.
Nota: cuerpos cetónicos pueden interferir, se eliminan calentando la muestra de
orina.

2. A 1 ml de orina, se le añaden gotas de percloruro de hierro al 10%.

Resultado positivo color morado.

3. A 0,1 ml de muestra colocados en cápsula de porcelana se le añade 1 gota

de Nitrato férrico al 1% en ácido nítrico 0,01 N.
Resultado color púrpura o violeta.

4. Mida 5 ml de sangre, añádele 0,l ml HCl y 10 ml de dicloroetileno, mezcle

suavemente, separa las 2 capas y adicione luego al extracto orgánico 2 ml
de nitrato férrico al 0,2%.
Resultado: en caso positivo se formará una coloración púrpura o violeta.
 5. Tome una muestra y acidifíquela, diluya 1/10 en agua destilada, fíltrela y
tome 5 ml, agregue una gota de solución acuosa al 1% de cloruro férrico.
Resultado: en presencia de salicilatos se obtiene una coloración violeta fugas, o
persistente de acuerdo a su concentración.

6. A 1 mg de muestra de se disuelve en unas gotas de acetona en 1 o 2 ml

de agua destilada luego adicionar 1 o 2 gotas de solución al 0,5% de
sulfato de cobre en ácido acético al 10%, luego agregar un cristal de nitrito
de sodio mezclar, calentar.
Resultado: color rojo para aspirina y ácido salicílico.

El ácido acetílsalicílico es la causa de más intoxicaciones accidentales en niños

que cualquier otra sustancia. Este analgésico tan extraordinariamente útil se usa
con tanta amplitud y se dispone de él con tanta facilidad que los niños con
frecuencia ingieren una cantidad tóxica por comer las tabletas saborizadas como
si fueran caramelos.

Las dosis tóxicas de salicilatos producen inicialmente estimulación del

sistema nervioso central, este podría reflejarse en hiperventilación, rubor y fiebre.
Por desgracia en un caso no reconocido de envenenamiento por salicilatos puede
pensarse en un caso de infección y entonces se le administra más aspirina al
paciente por un vano intento por bajar la fiebre. La estimulación del sistema
nervioso central va seguida de depresión.
OBJETIVO
Cuantificar por el método de colorimetría de Trinder el ácido acetil salicílico en
orina de sujetos sanos. Comprobando las concentraciones obtenidas contra otra
muestra de un paciente que no tomado aspirina.

PRUEBA RAPIDA CUALITATIVA:

Los salicilatos se pueden determinar en los fluidos biológicos mediante una
prueba rápida basada en la formación de un complejo de color morado-violeta entre
el Fe+++ y los fenoles.
MATERIALES Y REACTIVOS
 Cloruro de mercurio
 Cloruro férrico al 10%
  Ácido clorhídrico (0.1 mol / l)
 Nitrato férrico
 NaOH 0.1 mol/L
 Muestra
 Soporte universal y nueces
 Malla de asbesto
 Beaker
 Embudo de filtración
 Papel filtro
 Mechero
PROCEDIMIENTO
Lleve 5ml de orina a un tubo de ensayo, agregue 1ml de reactivo cloruro férrico
al 10%, la aparición de un color morado-violeta persistente nos indicará la presencia
de salicilatos. Esta prueba es muy sensible y es positiva en orina después de la
ingestión de solamente 300 mg de ácido acetil salicílico. Es sensible para ácido
acetíl salicílico, salicilatos de sodio, fenilo, metilo, y los derivados fenólicos.

DETERMINACION CUANTITATIVA:
El procedimiento se basa en la formación de un complejo de color violeta entre el
hierro férrico y los fenoles. Esta reacción no es especifica de los salicilatos, pero no
ocurre falsos negativos.
En este método y con el objeto de precipitar las proteínas séricas, el reactivo
lleva incorporado cloruro mercúrico y ácido clorhídrico. La presencia de nitrato férrico
en altas concentraciones previene la inhibición del desarrollo del color producido por
la presencia de fosfatos y oxalatos.

PROCEDIMIENTO PARA LA ORINA:

Para determinar salicilatos en orina, deben tenerse en cuenta los siguientes
puntos:
La orina debe diluirse con agua destilada antes del análisis, la manera corriente
de trabajar es hacer diluciones del 1:2 (1ml de orina + 1mlde agua), o del 1:5 (1ml de
orina + 4ml de agua).
La orina diluida debe calentarse suavemente antes del análisis con el objeto de
eliminar los cuerpos cetónicos. Dejar enfriar completamente.

Es necesario hacer un blanco biológico de orina diluida, esto se hace

determinando la D.O de una mezcla de 1ml de orina diluida y 5ml del reactivo de
Trinder. En caso de presentarse turbidez la mezcla debe centrifugarse y determinar
la D.O del sobrenadante.
1. tubo muestra (orina problema) 1ml + 5ml reactivo color.
2. tubo blanco (agua destilada) 1ml + 5ml reactivo color.
3. tubo blanco biológico 1ml + 5 ml reactivo color.
4. tubo estándar ácido salicílico 1ml + 5ml reactivo color.

Muestra de Orina:

Muestra de Orina + Cloruro férrico:

Formación del complejo coloreado:

Los salicilatos y sus metabolitos se eliminan principalmente por vía renal, siendo
excretada por la orina la mayor parte de la dosis. Aproximadamente el 75% de la
dosis se encuentra en forma de ácido salicilúrico, mientras que el 15% está en forma
de conjugados, sobre todo mono- y diglucurónidos. El 10% restante está constituido
por salicilato libre. Cabe resaltar que La Aspirina (Ácido acetilsalicílico) y de formula
molecular C6H4 (OCOCH3) COOH, contiene en su estructura fenol, como mucho
otros compuestos. Mediante el Ácido acetilsalicílico podemos reconocer el fenol, si le
agregamos cloruro de hierro (III), por esta razón se formó un complejo de
coordinación del hierro con los metabolitos del ácido acetil salicílico.
 CONCLUSIÓN

Los salicilatos son fármacos muy utilizados a nivel mundial, pues tratan el dolor
que afecta algunas áreas como músculo, articulaciones, nervios, cabeza, además de
enfermedades en las que se presenta inflamación y fiebre, las cuales son muy
frecuentes. Se absorben principalmente por vía oral, su distribución se lleva a cabo
por difusión pasiva, se metaboliza en hígado y se elimina por la orina. A pesar de su
gran utilidad, estos pueden llegar a ser tóxicos si se les consume en una dosis
superior a la indicada, pudiendo ocasionar problemas a nivel del tracto
gastrointestinal respiratorio, sistema nervioso, renal y sanguíneo.

Pueden determinarse mediante métodos cualitativos como la reacción de

Trinder, en la cual la muestra de orina se mezcla con un reactivo que contiene sales
férricas y produce una coloración morada si es positiva. En el caso del método semi-
cuantitativo, que es la reacción de Phenestix, la coloración obtenida es directamente
proporcional a la concentración del fármaco, la cual varía entre los tonos canela, café
y púrpura; y en función de esta, hay un rango de valores expresados en mg/dl. En el
método cuantitativo, se realizan diluciones con la orina y el reactivo; y debe de
realizarse en caso de ser positiva por el método cualitativo, para así confirmar.

La determinación de los salicilatos en orina es de suma importancia, pues esta

nos brinda información acerca de una posible intoxicación que podría provocar
enfermedades y en el peor de los casos, la muerte.
 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
 Barceloux D, McGuigan M, Hartigan-Go K. Position statement: cathartics.
American Academy of Clinical Toxicology; European Association of Poisons
Centres and Clinical Toxicologists. J Toxicol Clin Toxicol 1997; 35: 743-752.
 Córdoba D. Toxicología. Ed. Corporación de Estudios Médicos. Medellín,
1986.
 Dreisbach, H. R. y Robertson, W. 1988. Manual de Toxicología Clínica
“Prevención, diagnóstico y tratamiento”. Trad. Q.B.F.
 María del Rosario Carsolio 12ª. ed. México. El Manual Moderno S.A. de C.V.
pp. 267-271.