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Informe de laboratorio bioquimica Mo

Bioquímica (Universidad Nacional Abierta y a Distancia)

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BIOQUIMICA
Laboratorio De Bioquímica

Monica Alejandra Aguilar Ibague

Código: 1097994722

Bac. Rolando Diaz Diaz

Universidad Nacional Abierta Y A Distancia

Escuela De Ciencias De La Salud
Administración En Salud
Octubre 2019

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INTRODUCCION
La bioquímica es la ciencia que estudia los componentes químicos de los seres vivos,
especialmente las proteínas, carbohidratos, lípidos y ácidos nucleicos, además de otras
pequeñas moléculas presentes en las células. La bioquímica se basa en el concepto de que
todo ser vivo contiene carbono y en general las moléculas biológicas están compuestas
principalmente de carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno, fósforo y azufre.
De acuerdo con lo establecido en la Guía Integrada de Actividades y el Syllabus del curso
de Bioquímica, este informe de laboratorio, permite visualizar el trabajo realizado, los
logros y conocimientos adquiridos durante el desarrollo de las jornadas del componente
práctico inscrito.
Temáticas que aborda componente práctico Practica 1. Seguridad y normas de laboratorio
Practica 2: Propiedades bioquímicas de los aminoácidos Practica 3. Bioquímicas de las
proteínas Práctica 4: Identificación de carbohidratos Practica 5. Características de los
ácidos grasos
Todas las técnicas, procedimientos y actividades efectuadas, se adelantaron atendiendo las
sugerencias y recomendaciones teóricas y presenciales para el manejo de equipos e
instrumentos de laboratorio. De igual manera, se prestó especial atención a las medidas de
seguridad y los instructivos “paso a paso” que contenía la guía del laboratorio para conocer
el tema de biomoléculas.

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OBJETIVOS
 Leer las guías del laboratorio para entender los procedimientos a realizar.

 Cumplir con las normas de bioseguridad dentro del laboratorio.

 Desarrollar los procedimientos referidos en las guías de laboratorio de Bioquímica.

 Comprender cada uno de los temas referidos por la guía para el correcto desarrollo
del laboratorio

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1. Seguridad y normas de laboratorio Practica

Bioseguridad en el Laboratorio de biología es el conjunto de normas y procedimientos que
debe seguirse, para conservar la salud y seguridad del personal que labora en el laboratorio
y de la comunidad frente a los riesgos de infección para evitar contaminarse y contaminar a
los demás con agentes potencialmente patógenos.
 Utilizar la "bata de Laboratorio" debidamente abotonada y limpia y retirarla antes
de salir del laboratorio.
 Usar guantes para manipular muestras, evitar contaminar el área de trabajo y los
implementos personales (esfero, libros, apuntes); descartarlos cuidadosamente en la
caneca roja.
 Utilizar anteojos de protección
 Utilizar mascarillas de respiración.
 No comer, beber, fumar ni colocar otros objetos en la boca, mientras esté en el
Laboratorio.
 Mantener el Laboratorio limpio y aseado.
 Lavarse las manos luego de manipular cultivos, muestras, animales y, antes de
abandonar el Laboratorio.
 Conocer las reglas del uso y cuidado de todos los equipos.

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2. PROPIEDADES BIOQUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS

Los aminoácidos se denominan así por tener un grupo amino (-NH2) y un grupo
carboxilo (-COOH). Es posible agrupar los aminoácidos en clases principales
basadas en las propiedades de sus grupos R, en especial de su polaridad, o
tendencia a interaccionar como el agua a pH biológico (cerca del pH 7.0). La
polaridad de los grupos R varía enormemente desde totalmente apolar o
hidrofóbico (insoluble en agua) hasta altamente polar o hidrofílico (soluble en
agua).

2.1 Reacción de ninhidrina:

El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con la
ninhidrina: violeta azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo grupo amino es
primario, amarillo para la prolina e hidroxiprolina y café para la asparagina que
tiene un grupo amido en la cadena lateral. Esta reacción también identifica los
grupos alfa-amino libres presentes en péptidos y proteínas. Precauciones la
ninhidrina es toxica. Permite identificar la presencia de proteínas y aminoácidos
libres
Se preparará 4 soluciones en tubos de ensayo, a cada tubo se le agrega 5 gotas de
ninhidrina y se pone al baño maría durante 5 min, para observar los cambios.

a. 1.5ml de glicina : ( positivo ) cambio de color morado es proteína, polipéptido o

aminoácido
b. 1.5 ml de albumina : (positivo) cambio de color es proteína, polipéptido o
aminoácido
c. 1.5 ml de gelatina : (negativo no paso nada) No es proteína ni aminoácido
d. 1.5 ml de Clara de huevo: (positivo )cambio de color es proteína, polipéptido o
aminoácido

ANTES DE LA NINHIDRINA
DESPUES DE LA NINHIDRINA

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2.2 Reacción de biuret

Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se
debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los
aminoácidos. El reactivo de Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y sosa. El Cu, en un medio
fuertemente alcalino, se une con los enlaces peptídicos formando un complejo de color
violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas
vamos a preparar 3 tubos de ensayo con 1; 1.5ml de glicina 2; 1.5ml de
albumina
3; 1.5ml gelatina 4; clara de huevo Agregue a cada tubo de ensayo agregue 1 ml
de NaOH 2,5N de la solución correspondiente. Agregue 3 gotas de solución de
sulfato cúprico al 1% a cada tubo de ensayo. Agite cada tubo de ensayo. Observar
los cambios.

1.5ml de glicina+ NaOH 2,5N (negativo no hubo cambio) no es proteina

1.5 albumina+ NaOH 2,5N : (positivo ) se puso morado claro es Proteínas y
polipéptidos
1.5ml gelatina+ NaOH 2,5N: ( positiva) se puso morado es insoluble Proteínas y
polipéptidos
1.5ml de huevo+ NaOH 2,5N : ( positiva hubo color pero no se mezclo con la
clara) Proteínas y polipéptidos

Antes del reactivo despues del reactivo

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3. Reacción xantoproteica
Los anillos aromáticos presentes en algunos aminoácidos reaccionan con ácido
nítrico concentrado formando nitroderivados de color amarillo o anaranjado por lo
cual esta reacción permite reconocer la presencia de Tirosina, Fenilalanina y
Triptófano.

Se preparan 4 tubos de ensayo y se le agrega el reactivo acido nitrico 1ml y se

calienta los tubos al baño maría e identificar y describir cada reacción

a. Albumina; cambio de densidad amarillo es Tirosina, fenilalanina o triptófano

b. Gelatina; positiva amarilla clara Tirosina, fenilalanina o triptófano
c. Clara de huevo; positivo cambio de densidad y de color amarillo es Tirosina,
fenilalanina o triptófano

Antes del ácido nítrico

Después del ácido nítrico

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4. Reacción de millón
El anillo fenólico tiene un comportamiento característico frente a las sales de
Mercurio a pH ácido, formando complejos color rojo ladrillo con el anillo fenólico
de la tirosina y las proteínas que la contienen

Se prepara 3 tubos de ensayo con las sustancias y se le agrega 5 gotas de reactivo

de millón y se calienta al baño maría por 5 min y se identifica los cambios

Gelatina: positivo cambio de color naranja es Tirosina

Albumina: cambio de color blanco y se puso espumoso es Fenilalanina
Huevo : cambio de densidad blanco es Fenilalanina

Si la albumina y el huevo reaccionan igual es por que el huevo es albumina.

Antes del reactivo de millón

Después del reactivo de millón

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5. Reacción de aminoácidos azufrados, grupos SH

Se preparan 3 tubos ensayo con las 3 sustancias(clar de huevo,leche, cisteina) y se le

agrega 2ml de hidróxido sodico al 20%+ 10 gotas de acetato de plomo se pone a calentar al
baño maría por 2 minutos y se describen las reacciones y los cambios.
a. 3 ml de clara de huevo : se evidencia dos sustancias abajo blanco denso y arriba
negro liquido.
b. 3ml de cisteina: no hubo cambios (Otros aminoácidos)
c. 3ml leche: y se dividio en 3 colores cambio d densidad y se puso amarilla, cafecito,
blanco ( es Arginina)
Antes del reactivo

Después del reactivo

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6. IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS

Los hidratos de carbono constituyen el grupo de biomoléculas más abundante sobre la

superficie terrestre, representando aproximadamente el 75 % de la materia orgánica
existente. En ocasiones, se denominan también carbohidratos, azúcares, sacáridos o
glúcidos. Todos son términos que hacen referencia a su sabor dulce, o a que poseen la
composición Cn (H2O)n. Estas moléculas usualmente contienen carbono, hidrógeno y
oxígeno en una proporción de 1:2:1. Los carbohidratos se clasifican como
monosacáridos, disacáridos o polisacáridos, dependiendo del tamaño y la complejidad
de la molécula. Los monosacáridos se componen de una sola molécula de azúcar.
Cuando dos monosacáridos se unen se produce un disacárido, y cuando dos o más se
unen se produce un polisacárido.

6.1 PRUEBA DE BENEDICT

Es similar a la reacción de Fehling, el medio básico débil y el estabilizante (citrato
sódico) utilizados hacen que este test sea más sensible y estable.
vamos a usas 3ml de glucosa+ 3 ml de sacarosa+ 3ml de almidón
vamos a dividir cada sustancia en cada tubito, se agrega 2ml de reactivo de benedict
( el reactivo es de color azul)y se flamea al baño maría por 10 min.
 2ml de sacarosa: no cambio nada: porque no es azúcar reductor
 2ml jugo de cebolla: se puso naranja( es azúcar reductor)
 2ml banano maserado (fructosa): se puso amarillo oscuro+ verde (menos azúcar
reductor)
 2ml leche: naranja claro (es azúcar reductor)
 2ml de agua: no cambio nada (no es azúcar reductor)
 2ml papa: no cambio nada no es azúcar reductor

Antes del baño maría con el reactivo después del baño maria

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6.2 reacción de Fehling

Los azúcares reductores, en medio alcalino, son capaces de reducir el ión Cu2+ de color
azul a Cu+ de color rojo. Para ello el grupo carbonilo del azúcar se oxida a grupo carboxilo
vamos a usas 3ml de glucosa+ 3 ml de sacarosa+ 3ml de almidón
vamos a dividir cada sustancia en cada tubito, se agrega 2ml de reactivo de fehling
( 1ml fehling a y1ml Fehling b)y se flamea al baño maría por 10 min
a. 2ml de sacarosa: no cambio nada
b. 2ml cebolla macerada: naranja
c. 2ml banano macerado: naranja
d. 2ml leche: rojo y amarillo
e. 2ml de agua: no cambio nada
f. 2ml Papa: no cambio nada

Antes del baño maría después del baño maria

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6.2 REACCIÓN DE MOLISCH

La presencia de carbohidratos en una muestra se pone de manifiesto por la reacción de
Molisch, que a cierto punto es la reacción universal para cualquier carbohidrato. Se basa en
la acción hidrolizante y deshidratante del ácido sulfúrico sobre los hidratos de carbono. En
dicha reacción el ácido sulfúrico cataliza la hidrólisis de los enlaces glucosídicos de la
muestra y la deshidratación a furfural (en las pentosas) o hidroximetilfurfural (en las
hexosas). Estos furfurales se condensan con el alfa naftol del reactivo de Molisch (reacción
de Molisch) dando un producto coloreado.

vamos a divir cada sustancia en cada tubito, se agrega 2 gotas de reactivo de molish )
despuesd desto se agrea 1ml de acido sulfurico por la pared del tubo
 2ml de sacarosa: negativo . no reacciona
 2ml ponny malta:positivo, se observa sedimento rojo
 2ml banano maserado: positivo, se observa anillo rojo
 2ml cebolla : positivo, se observa sedimento rojo.
 2ml deleche : positivo, se observa anillo rojo
 2ml Papa: positivo se observa anillo rojo
 2ml agua :negativo no reacciona.

Antes del reactivo

Después del reactivo

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6.3 REACCIÓN DE LUGOL (YODO)

La prueba de yodo se da como consecuencia de la formación de cadenas de poliyoduro a
partir de la reacción entre el almidón y el yodo presente en el reactivo de lugol.
La amilosa y la amilopectina son componentes del almidón pero la amilosa es de estructura
lineal, con enlaces α (1-4), que forma hélices en donde se juntan las moléculas de yodo
formando un color azul oscuro; mientras que la amilopectina es de estructura ramificada,
con enlaces α (1-4) (1-6), que forma hélices mucho más cortas y las moléculas de yodo son
incapaces de juntarse presentando un color intermedio entre anaranjado o amarillo.
vamos a determinar las sustancia que están compuestas de almidón.
Se preparan los tubos de ensayo y se agrega dos gota de Lugol(yoduro de potasio) si da
color negro significa que contiene almidón
 3ml de sacacorosa: negativo
 3ml cebolla: negativo
 3ml agua: negativo
 3ml glucosa: negativo
 3ml de papa: si contiene almidon
 3ml banano: positivo, contiene almidón
Antes del lugol

Después del Lugol

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7. CARACTERÍSTICAS DE LOS ÁCIDOS GRASOS (lípidos)

Los lípidos (del griego lypos, grasa) son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por
C, H y O, aunque este último elemento se encuentra en proporciones mucho más bajas que
los dos primeros. Además, pueden contener P, N y S. Constituyen un grupo de sustancias
muy heterogéneas con características químicas diversas, pero con algunas propiedades
físicas comunes, que podrían resumirse en estas dos: _ Son mayoritariamente insolubles en
agua. _ Son solubles en disolventes orgánicos, tales como éter, cloroformo, alcanos (ej:
hexano), benceno, acetona y alcoholes.
7.1 SOLUBILIDAD EN LÍPIDOS (para determinar a que soluciones son solubles los
ácidos grasos}

Vamos a tener dos tubos de ensayo cada uno con 3ml de aceite vegetal

1. Aceite vegetal + 3ml de agua : no es soluble

2. Aceite vegetal + 3ml de hexano: el acido graso es soluble en hexano
Antes de la mezcla después de la mezcla

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7.2 SAPONIFICACIÓN
Muchos lípidos, como por ejemplo: los ácidos grasos, reaccionan con bases fuertes, NaOH
o KOH, dando sales sódicas o potásicas que reciben el nombre de jabones. Esta reacción se
denomina de saponificación. Son saponificables los ácidos grasos o los lípidos que poseen
ácidos grasos en su estructura.
Vamos a tener dos tubos de ensayo cada uno con 3ml de aceite vegetal y se deja 10 min al
baño maría.

a. Aceite vegetal + 3ml de NaOH : se forma capa de jabón , los ácidos grasos al actuar
con los NaOH producen jabón.
b. Aceite vegetal + 3ml de KOH: se forma capa de jabón , los ácidos grasos al actuar
con los KOH producen jabón.
c. Aceite vegetal + 3ml de agua: no es soluble

Antes del baño maría después del baño maría

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7.3 REACCIÓN CON EL SUDÁN III

El Sudán III es un colorante que se utiliza para detectar específicamente las grasas,
porque es insoluble en agua y en cambio es soluble en las grasas. Al ser de color rojo,
cuando se disuelve tiñe las grasas de color rojo anaranjado.
Vamos a tener dos tubos de ensayo cada uno con 3ml de aceite vegetal

3. Aceite vegetal + 8 gotas de sudan: se disuelve y se mezclan queda naranja

4. Aceite vegetal + 8 gotas de tinta roja : no se disulve

Antes de la mezcla después de la mezcla

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CONCLUSIONES

Para el desarrollo de cualquier actividad en el laboratorio, es fundamental contar con

información previa sobre la manipulación de equipos, reactivos químicos y los
procedimientos de cada tarea encomendada, así como la aplicación y seguimiento riguroso
de las normas de seguridad establecidas

La dinámica y reacciones químicas propias de los ácidos nucleicos, glúcidos, lípidos y

aminoácidos constituyen etapas fundamentales para el surgimiento, permanencia y
florecimiento de la vida en nuestro planeta.

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El catabolismo y la biosíntesis de moléculas, son procesos metabólicos que se rigen por una
serie de pautas o parámetros universales y que pueden ser objeto de comprobación y
estudio en el laboratorio.

LISTA DE REFERENCIAS

Brandan, N. C. (2014). METABOLISMO DE COMPUESTOS NITROGENADOS. Universidad

Nacional del Nordeste Facultad de medicina cátedra de bioquímica. Recuperado de
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/201103/2015-
I_BIOQUIMICA_201103/MATERIAL_BIBLIOGRAFICO_SYLLABUS_/Brandan_nora_Metabol
ismo_de_los_compuestos_nitrogenados.pdf

TORRES, G. M. (2013). In UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA (Ed.),

BIOQUIMICA 201103 [Bioquímica] (cuarta ed.). Curso virtual bioquímica: UNAD.

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http://datateca.unad.edu.co/contenidos/201103/2015-
II_BIOQUIMICA_201103/MATERIAL_BIBLIOGRAFICO_SYLLABUS_/201103_Modulo_bioqu
imica_II-09_final_copia.pdf

https://books.google.com.co/books/about/Qu%C3%ADmica.html?id=_FJ8ljXZD7IC&redir_esc=y
http://www.deortegas.com/aceite-de-oliva/aceite-y-salud/

http://clickmica.fundaciondescubre.es/conoce/100-preguntas-100-respuestas/7-cotidiana/158-ique-
es-el-jabon
http://biologia.laguia2000.com/bioquimica/como-se-elabora-el-jabon
http://www.alimentacionynutricion.org/es/index.php?mod=content_detail&id=49

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