PRACTICA N* 3

Marco teórico

Solución de tripsina: La tripsina es una enzima peptidasa, que rompe los enlaces peptídicos
de las proteínas mediante hidrólisis para formar péptidos de menor tamaño y aminoácidos. La
tripsina es producida en el páncreas y secretada en el duodeno (parte del intestino), donde es
esencial para la digestión. El pH óptimo es 8 y la temperatura óptima es 37 °C. Es una enzima
específica ya que liga al péptido en las posiciones del carboxilo de residuos Arginina (Arg) o
Lisina (Lys) en la cadena, ambos aminoácidos con grupos R cargados positivamente,
fragmentando al péptido inicial.

La tripsina es producida por el páncreas en forma de tripsinogeno (enzima

inactiva), y luego es activado en el duodeno por la enteroquinasa intestinal a
tripsina (enzima activa) mediante corte proteolítico.

La tripsina es secretada en el páncreas, donde actúa hidrolizando péptidos en sus

componentes estructurales básicos conocidos como aminoácidos (éstos péptidos
a su vez son el resultado de la actividad de la enzima pepsina, que degrada
proteínas en el estómago). Esto es necesario para el proceso de absorción de las
proteínas presentes en la comida, ya que a pesar de que los péptidos son mucho
más pequeños con respecto a las proteínas, son aún demasiado grandes para ser
absorbidos por la membrana del intestino . La tripsina realiza la hidrólisis de los
enlaces peptídicos.

Las tripsinas tienen un pH óptimo de operación de 8 y una temperatura óptima de

operación de 37 °C.

Solución de hidróxido de sodio (NaOH): Sustancia incolora o blanca (en trozos), higroscópica
que se comercializa en trozos, escamas o granos. Llamada también sosa cáustica o soda cáustica.

El hidróxido de sodio (sosa cáustica o soda cáustica) se disuelve en agua desprendiendo calor, la
disolución acuosa se denomina lejía de sosa.

El hidróxido de sodio (NaOH) o hidróxido sódico, también conocido como soda cáustica o sosa caústica
es un hidróxido cáustico usado en la industria (principalmente como una base química) en la fabricación
de papel, tejidos, y detergentes. Además es usado en la Industria Petrolera en la elaboración de Lodos
de Perforación base Agua.
A temperatura ambiente, el hidróxido de sodio es un sólido blanco cristalino sin olor que absorbe
humedad del aire (higroscópico). Es una sustancia manufacturada. Cuando se disuelve en agua o se
neutraliza con un ácido libera una gran cantidad de calor que puede ser suficiente como para encender
materiales combustibles. El hidróxido de sodio es muy corrosivo. Generalmente se usa en forma sólida o
como una solución de 50%.

El hidróxido de sodio se usa para fabricar jabones, crayón, papel, explosivos, pinturas y productos de
petróleo. También se usa en el procesamiento de textiles de algodón, lavandería y blanqueado,
revestimiento de óxidos, galvanoplastia y extracción electrolítica. Se encuentra comúnmente en
limpiadores de desagües y hornos.

También es importante su uso en la obtención de Aluminio a partir de Bauxita en el proceso Bayer.

Solución de acido sulfúrico: El ácido sulfúrico es un compuesto químico extremadamente corrosivo cuya
fórmula es H2SO4. Es el compuesto químico que más se produce en el mundo, por eso se utiliza como
uno de los tantos medidores de la capacidad industrial de los países. Una gran parte se emplea en la
obtención de fertilizantes. También se usa para la síntesis de otros ácidos y sulfatos y en la industria
petroquímica.

Generalmente se obtiene a partir de dióxido de azufre, por oxidación con óxidos de nitrógeno en
disolución acuosa. Normalmente después se llevan a cabo procesos para conseguir una mayor
concentración del ácido. Antiguamente se lo denominaba aceite o espíritu de vitriolo, porque se
producía a partir de este mineral.

La molécula presenta una estructura piramidal, con el átomo de azufre en el centro y los cuatro átomos
de oxígeno en los vértices. Los dos átomos de hidrógeno están unidos a los átomos de oxígeno no
unidos por enlace doble al azufre. Dependiendo de la disolución, estos hidrógenos se pueden disociar.
En agua se comporta como un ácido fuerte en su primera disociación, dando el anión hidrogenosulfato,
y como un ácido débil en la segunda, dando el anión sulfato.

Además reacciona violentamente con agua y compuestos orgánicos con desprendimiento de calor.

La industria que más utiliza el ácido sulfúrico es la de los fertilizantes. El nitrosulfato amónico es un
abono nitrogenado simple obtenido químicamente de la reacción del ácido nítrico y sulfúrico con
amoniaco.4

Solución de acetato de plomo: El acetato de plomo (II) es un compuesto químico cristalino de color
blanco con un sabor ligeramente dulce. Se obtiene tratando litargirio (óxido de plomo (II) ó PbO) con
ácido acético. Al igual que otros compuestos plúmbeos, es una sustancia muy tóxica. El acetato de
plomo es soluble en agua y glicerina. Con agua, forma el trihidrato, Pb(CH3COO)2·3H2O, una sustancia
cristalina monoclínica eflorescente de color blanco o incoloro.2

También se le conoce como acetato de plomo, diacetato de plomo, acetato plúmbeo, azúcar de plomo
o de Saturno, plomo azúcar, sal de Saturno y fuerza de Goulard (en honor a Thomas Goulard).
Las sustancia se usa como reactivo para generar otros compuestos de plomo y como fijador para
algunos tintes. En bajas concentraciones (del orden del 1 %), es el principial ingrediente activo en una
variada gama de tinturas progresivas del cabello, que va tomando progresivamente un color castaño
debido a la combinación del plomo con el azufre, más abundante en las proteínas del cabello que en las
de la piel. También se utiliza como mordiente en impresión y tinte textil y como desecante en pinturas y
barnices.

Se ha documentado que el acetato de plomo, entre otras sales de plomo, podría afectar a la placenta y
al embrión, conduciendo a la muerte del feto, razón por la cual se desaconseja el uso de tintes de
cabello que lo tengan en su composición.3 Como sal de plomo, también tiene efectos teratogénicos en
algunas especies animales.

Alcohol etílico: El alcohol etílico o etanol (lo puedes oír de las dos formas) es un líquido incoloro,
inflamable (quiere decir que si le acercas una llama, arde) y volátil (que se evapora con facilidad).
Generalmente se le llama alcohol etílico al alcohol que tenemos en casa para desinfectar, el que tiene 95
grados o más.

La industria emplea mucho el alcohol etílico como disolvente para lacas, barnices, perfumes y
condimentos; como medio para reacciones químicas, y para recristalizaciones.

El alcohol etílico es el alcohol de las bebidas.

Medicinalmente, el alcohol etílico se clasifica como hipnótico (que produce sueño); es menos tóxico que
otros alcoholes. (El metanol, por ejemplo, es muy venenoso: tomarlo, respirarlo periodos prolongados o
dejarlo por mucho tiempo en contacto con la piel, puede conducir a la ceguera o muerte.)

Reactivo de biuret: El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos
y otros compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida.

Está hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio
(KNaC4H4O6·4H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa
cuando se combina con polipéptidos de cadena corta. El hidróxido de potasio no participa en la
reacción, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar.

Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un método colorimétrico que permite determinar la

concentración de proteínas de una muestra mediante espectroscopia ultravioleta-visible a una longitud
de onda de 540 nm (para detectar el ion Cu).

Agua destilada: El agua destilada es aquella cuya composición se basa en la unidad de moléculas de
H2O. Es aquella a la que se le han eliminado las impurezas e iones mediante destilación. La destilación es
un método en desuso para la producción de agua pura a nivel industrial. Esta consiste en separar los
componentes líquidos de una mezcla.

Debido a su relativamente elevada pureza, algunas propiedades físicas de este tipo de agua son
significativamente diferentes a las del agua de consumo diario. Por ejemplo, la conductividad del agua
destilada es casi nula (dependiendo del grado de destilación) pues a diferencia del agua del grifo común,
carece de muchos iones que producen la conductividad, habitualmente cloruros, calcio, magnesio y
fluoruros.

La potabilización del agua corriente así como el mercado del agua embotellada, hace que el uso de agua
destilada como bebida no sea más frecuente. No obstante, muchos fabricantes de bebidas la usan como
base de sus productos para asegurarse su pureza y buen sabor. También se puede encontrar
embotellada en supermercados, lista para beber. El uso de técnicas de purificación de agua, como la
destilación, es común en lugares donde no hay una fuente de agua potable asequible o el agua que se
puede obtener no es apta para ser bebida.

En muchos hogares es común el uso de filtros, como las resinas de intercambio iónico que le quitan
parte de los iones calcio y magnesio que "endurecen" el agua para potabilizarla o quitarle el olor, pero la
aparición de dispositivos domésticos de ósmosis inversa (como los usados en las plantas desalinizadoras)
ha permitido el consumo de agua mucho más pura y casi destilada. El dispositivo doméstico que asegura
un agua totalmente destilada al 100% es la destiladora,2 si bien no parece ser muy común en el
mercado.

Interpretación:

Los  enzimas  son  los  catalizadores  de  las  reacciones  bioquímicas.  La  medida  de  la  
actividad  de  un  enzima  y  la  comprensión  de  las  variables  que  la  afectan  es
importante   para  entender  la  bioquímica.  

 la concentración del sustrato: al aumentar la concentración de sustrato existen más centros

activos ocupados y la Velocidad de la reacción aumenta hasta que no quedan centros activos
libres; a partir de ese momento, un aumento de la concentración del sustrato no supone un
aumento de la Velocidad de la reacción.

 pH: cada enzima tiene un pH óptimo de actuación. Los valores por encima o por debajo de este
valor provocan un descenso de la Venzimática, debido a cambios eléctricos en los radicales de
los aminoácidos que constituyen el centro activo. De este modo, pueden aparecer o
desaparecer enlaces, que alterarán la estructura espacial del centro activo o su unión al
sustrato.

El acoplamiento del sustrato a la enzima se verá dificultado y la Velocidad de reacción disminuirá.

Por debajo de un pH mínimo o por encima de un pH máximo, se produce la desnaturalización de la

enzima y su actividad se anula por completo.
Cuestionario:

1 como demuestra…

Los enzimas son proteínas que catalizan reacciones químicas

Como proteínas, poseen una conformación natural más estable que las demás conformaciones posibles.
Así, cambios en la conformación suelen ir asociados en cambios en la actividad catalítica.

2 diga Ud. En que…

Esta diferencia se encuentra en la secuencia de aminoácidos que forman la proteína

3 cuales…

Más del 90% de las enzimas son proteínas globulares o escleroproteínas y el resto se encuentran
conjugadas a un grupo prostético. Los estudios recientes y otras técnicas han permitido un mejor
conocimiento sobre la estructura de las enzimas y han proporcionado cierta evidencia de las hipótesis
de la llave y la cerradura y del ajuste inducido

La unión se mantiene gracias a las fuerzas de enlaces no covalentes entre átomos del sustrato y la
enzima, como enlaces de Van der Waals, enlace por puente de hidrógeno o puentes salinos, durante la
catálisis, pero la unión es temporal, por tanto cuando la reacción enzimática finaliza se separan la
enzima y el producto

4 indique…

Al ser proteínas, a partir de cierta temperatura o de un cambio brusco de temperatura, se empiezan a

desnaturalizar por el calor. Por encima de esta temperatura, el aumento de velocidad de la reacción
debido a la temperatura es contrarrestado por la pérdida de actividad catalítica debida a la
desnaturalización térmica, y la actividad enzimática decrece rápidamente hasta anularse.

5 indque de qué manera…

Los reactivos entes mencionados sobre la enzima actúan de diferente manera:

La tripsina se muestra soluble en agua al reaccionar con el agua destilada

La tripsina al reaccionar con el hidróxido de sodio da un precipitado

La tripsina al reaccionar con el ácido sulfúrico se torna de un color amarillo y da un precipitado y una
desnaturalización por acción de metales pesados

La tripsina al reaccionar con el acetato de plomo se forman dos faces

La tripsina al reaccionar con el alcohol etílico se torna de un color azul

La tripsina llevándolo a baño maría se produce una desnaturalización por acción del Ph y la temperatura

Conclusión:

Al realizar el procedimiento adecuadamente, se determinara la naturaleza proteica de las enzimas al ser

expuesta a los diferentes agentes físicos y químicos utilizados comparando las variaciones físicas y
químicas q sufren las proteínas al set catalizadas.

Bibliografía

CHANG, R. (2003) Química, Ed. McGraw-Hill. Séptima Edición. México.

GRAHAM SOLOMOS, T. (2000) Química Orgánica, Ed. Limusa. Segunda Edición .México.

HARPER, Bioquímica ilustrada, Ed McGraw-Hill, 28 edición, pág. 467-481.