Guia de Practica #5 Soluciones y Diluciones
Guia de Practica #5 Soluciones y Diluciones
Guia de Practica #5 Soluciones y Diluciones
ESCUELA PROFESIONAL
TECNOLOGIA MEDICA
LABORATORIO CLINICO
CURSO
DISEÑO, SEGURIDAD Y AUTOMATIZACION EN
EQUIPOS DE LABORATORIO CLINICO
GUIA DE PRACTICA N° 5
2022 - I
LIMA - PERU
PREPARACIÓN DE SOLUCIONES
COMPETENCIAS
Al finalizar la practica el alumno:
Comprende, aplica e interrelaciona las diferentes formas de expresar la concentración de
una solución. Molaridad, normalidad, %p/v, %p/p, %v/v, entre otras.
Adquiere habilidad y competencia en las operaciones básicas de preparación de reactivos
y disoluciones.
Sabe cómo preparar soluciones anticoagulantes
II GENERALIDADES
Una solución es una mezcla de dos o más sustancias, que forman una fase homogénea.
En toda disolución se puede observar una sustancia que se disuelve en el seno de otra, esto es el
soluto y el solvente que se encuentra en mayor cantidad y en donde se dispersa el otro
componente denominado soluto.
Dependiendo de la cantidad de soluto las soluciones pueden ser diluidas, concentradas, saturadas
y sobresaturadas.
Los solutos pueden ser líquidos y la formación de soluciones con solvente también
líquidos, se debe al grado de miscibilidad o a las “fuerzas de cohesión molecular”, atracciones
específicas entre las moléculas que dirigen la proporcionalidad de la disolución de un líquido en
otro.
En el caso sólido-líquido las moléculas de sólido tienden a romper su estructura cristalina,
separando sus moléculas entre las del líquido formando una disolución. El proceso inverso es la
cristalización. Las mezclas dependen de la naturaleza del soluto y del solvente, la temperatura y la
presión.
Las soluciones según el tamaño del soluto pueden clasificarse en:
1. Suspensiones: Cuando el soluto tiene partículas mayores de 0.1u de tamaño, suele verse
precipitación.
2. Coloides: Cuando la solución es homogénea y no hay precipitación. Las partículas miden
entre 0.001 a 0.1u.
3. Soluciones verdaderas o Disoluciones: Donde el tamaño de la partícula es menor que
0.001u, aquí hay un proceso de dispersión molecular (solución molecular) o procesos de
disociación (soluciones iónicas).
Concentración
(b) Preparación de soluciones por dilución de las soluciones concentradas, llamadas soluciones-
madre
Unidades de medición
Físicas
Disoluciones en por ciento: son iguales a partes por cien o la cantidad de soluto por 100
unidades totales de disolución.
# Eq gr del soluto
(N )
Volumen dela solución(L)
Relación entre Molaridad y Normalidad: N = M x Valencia
3. Cálculos Indispensables:
Número de Moles:
masa( g )
# Moles
Peso Molecular (M )
Número Equivalente:
Peso del soluto( g )
# Eq g
Masa Equivalente( g )
Masa Equivalente:
Peso Molecular (M )
Masa Equivalente(g )
Valencia
Fracción Molar:
Molaridad de Componente
Fracción Molar
Molaridad total
Diluciones:
Anticoagulante:EDTA-2K:
Preparar una solución de EDTA-2K al 10%
EDTA-2K ……
Agua destilada c.s.p. ……
Calcular la dilución:
La disolución más sencilla está formada por la mezcla de dos componentes: el componente en mayor proporción
se llama disolvente y el componente en menor proporción se llama soluto. Las disoluciones se nombran citando en
primer lugar el soluto y en segundo lugar, el disolvente. Ejemplo: sal en agua.
Cuando se trata de soluto y disolventes sólidos se suele emplear el término de mezcla homogénea
(no se pueden distinguir sus componentes) en lugar del término disolución, que se reserva para mezclas de sólido
y líquido o líquido y líquido (las más utilizadas en Farmacia).
La homogeneización es el proceso usado para conseguir que no se diferencien los componentes de una disolución.
En la práctica farmacéutica este proceso se lleva a cabo según el estado físico de los componentes de la disolución.
Disolvente
Soluto
Sólido Líquido Gas
Disolvente Características
Isopropanol Este disolvente es tóxico por vía oral y solo se usa por vía tópica.
Producto muy viscoso que le da consistencia a las disoluciones y es
Glicerina miscible con agua y etanol. También es un conservante no tóxico por
vía oral.
A) Peso/Peso (p/p)
El soluto y el disolvente se miden en unidades de masa, aunque ambos componentes pueden ser sólidos
o líquidos. Así, si tenemos una disolución de concentración al 3 % significa que, de las 100 partes de
disolución total, tres partes son de soluto.
Para hacer esta medición se puede emplear cualquier unidad de masa, siempre que sea la misma tanto para el soluto
como para el disolvente.
Ejemplo:
Preparación de una mezcla de soluto y disolventes sólidos con expresión en % p/p: 140 g
de paracetamol en lactosa al 5 % .
Fundamento: preparación de mezcla homogénea de dos sustancias sólidas (paracetamol y lactosa).
cálculos:
• Paracetamol: 5/100 = x/140 ; x = 7 g
• Lactosa: 140 – 7 = 133 g
Ejemplo
El jefe del laboratorio donde trabaja Cristina le ha pedido que calcule la cantidad de soluto y
disolvente que hay en ¼ kg de una mezcla de almidón de maíz en agua al 8 % p/p.
Solución:
a) Cantidad de almidón de maíz: 8 · 250/100 = 20 g de almidón.
b) Cantidad de agua: 250 – 20 = 230 g de agua.
B) Peso/volumen (p/v)
La cantidad de soluto se expresa en masa (g) y la cantidad total de disolución se expresa en volumen (l) (se pueden
usar los múltiplos y submúltiplos de g y l). Así, una concentración al 3 % significa que hay 3 partes de soluto
expresadas en unidades de masa y hasta 100 partes de disolución expresadas en volumen.
La preparación de disoluciones p/v requiere el uso de recipientes que midan volúmenes de forma exacta, por lo que
deben utilizarse siempre matraces aforados.
Ejemplo
A Cristina le han pedido que calcule la concentración en % p/v de la disolución prepa- rada al disolver 3 g de un
soluto en agua suficiente para completar 150 ml de solución. ¿Cuál será el resultado?
Solución:
Cristina tendrá que llevar a cabo la siguiente operación: 3 x (100/150) = 2.
Por lo tanto, el resultado será 2 g % p/v.
Ejemplo
Cálculos:
C) Volumen/volumen : (v/v)
EJEMPLO
Cálculos:
Diluciones
Una dilución se define como el acto de añadir un solvente a un soluto para reducir la concentración del soluto.
¿Qué es el soluto?
El soluto puede ser un compuesto químico como la glucosa, cloruro de sodio, hidróxido de sodio,
hipoclorito de sodio, proteínas o un microorganismo etc.
El principio en ambos casos es el mismo, reducir la concentración (i.e. el número de moléculas de
glucosa o Escherichia coli por unidad de volumen). Esto lo logramos añadiendo más solvente.
El siguiente ejemplo ilustra el principio de diluciones:
Si observamos detenidamente el ejemplo, notaremos que la cantidad de células no cambia a pesar de añadir
más solvente, lo que cambia es la cantidad de solvente en que se encuentran dichas células. Por consiguiente,
el añadir más solvente disminuye la cantidad de células por unidad de volumen.
Existen varias estrategias para diluir. En nuestros cursos de química aprendimos cómo diluir soluciones de las
cuales conocemos la concentración original utilizando la siguiente fórmula:
Ci *Vi = Cf * Vf
donde C = concentración, V = volumen, i = inicial, y f = final. Si despejamos esta ecuación para que las concentraciones
queden en un lado y los volúmenes en el otro tendremos:
Ci = Vf
Cf Vi
Esta igualdad nos indica que existirá una proporcionalidad entre las concentraciones de las soluciones y los volúmenes
de mezcla. Esta proporcionalidad es lo que conocemos como el Factor de dilución.
FACTORES DE DILUCION
El factor de dilución puede ser definido como una proporción que indica el número de veces que hay que diluir el
material original. Esta proporción nos indicará cuántas partes de la muestra original hay que colocar en el total de partes
de la mezcla. Matemáticamente podemos calcular el factor de dilución utilizando volúmenes o concentraciones:
Esto quiere decir que para obtener una solución con 2 células/ml es necesario diluir la solución original 2.5 veces.
Es importante notar que por ser una proporción los factores de dilución no tienen unidades y siempre se describen
como una razón de partes totales a partes de soluto. Generalmente se expresarán como el recíproco:
Por ser una proporción, es necesario que siempre expresemos los factores de dilución relativo a una unidad de soluto.
Si al calcular el FD necesario el soluto tiene un valor menor de 1, entonces es necesario convertirlo a un valor entero 1.
Si en el caso anterior el volumen de inóculo hubiese sido 0.5 ml entonces el factor de dilución hubiese sido:
El factor de dilución descrito no cumple con el criterio de que el volumen de soluto debe ser un valor entero.
Es necesario convertirlo en un entero. Existen varias maneras de hacer dicha conversión matemática. Una manera rápida
es buscar el número con el que se multiplicaría el volumen de soluto para convertirlo en 1. Esto se puede obtener
dividiendo 1 entre el volumen de soluto:
MULTIPLO = 1 1 = 2
0.5 X 2 = 1/ 5
2.5
Los factores de dilución son una herramienta poderosa en la preparación de soluciones. El conocer la proporción en
que necesitamos diluir un soluto nos permite poder calcular distintos volúmenes de solución utilizando principios de
proporcionalidad. Por ejemplo, si quisiéramos preparar un total de 35 ml de una dilución 1/2.5 podemos utilizar la
siguiente relación proporcional:
1/2.5 = X/35
donde x representa el volumen de soluto necesario para mantener el mismo factor de dilución original. Debemos recordar
que un factor de dilución representa la proporción de soluto a mezcla total. Por esta razón es que podemos despejar para
un desconocido utilizando una igualdad. Si despejamos para x tendremos que el volumen de soluto necesario para obtener
35 ml de solución será 14 ml.
Diluciones seriadas
Se define como dilución al proceso de añadir a una muestra biológica liquida (suero, plasma, orina,
etc) una cantidad de diluyente (Agua destilada, solución salina, etc) con la finalidad de reducir la
concentración de: analito, enzima, Antígeno, Acs, etc. Para que este pueda ser leído adecuadamente
por un instrumento (Linealidad pba) de acuerdo al método usado, pero manteniendo la relación de la
concentración real al multiplicar el resultado por el factor de la dilución.
Una dilución seriada es la dilución repetida de una solución, con el fin de amplificar rápidamente
dicha dilución. ... Las diluciones seriadas se utilizan mucho en ciencias experimentales como
bioquímica, microbiología, farmacología y física.
Hay muchas situaciones en que las cantidades de sustancia necesarias para ver un efecto son
extremadamente pequeñas (por ejemplo un farmaco para tratar una enfermedad, una hormona para
estudiar su efecto en un animal de experimentacion, etc) y difecilmente se pueden pesar o medir en
esas proporciones tan pequeñas. En esas situaciones es necesario recurrir a la preparacion de una
solucion de alta concentracion (o solucipn de stock o solucion madre) y hacer diluciones seriadas a
partir de esta.
En general se parte de una solucion concentrada y se preparan series de diluciones al decimo (1:10)
o al medio (1:2). De esta manera se obtiene una serie de soluciones relacionadas por ejemplo por
un factor de dilucion 10 es decir 1/10; 1/100; 1/1000 y asi sucesivamente. O la otra serie es 1/2; 1/4;
1/8; 1/16; 1/32 etc.
Por ejemplo: si partimos de una solucion de 50mg/ml de una sustancia (Solucion A)
a. Dilucion 1/10: 1ml de la solucion A + 9 ml de agua= una solucion de 5 mg/ml (dilucion 1:10)
b. Dilucion 1/2: 5 ml de la solucion A + 5 ml de agua= una solucion de 25 mg /ml (dilucion 1:2)
El primer ejemplo que veremos es una proteina. La albumina serica bovina es la proteina que mas
usualmente se emplea como patron para calcular la cantidad de proteinas totales en una muestra
incognita. Las unidades que habitualmente se usan para la solucion de stock son mg/ml, y en
general una solucion de 1 mg/ml puede resultar adecuada para realizar diluciones seriadas y medir
luego la concentracion de proteinas en una muestra. Las diluciones se haran al medio en una serie
de tubos rotulados 1; 0,5; 0,25; 0,12; 0,06; 0,03; 0,015, a todos se les agrega 2 ml de agua destilada
y luego la solucion correspondiente:
ml de H2O
Concentration de ml solución que se agrega a
tubo para cada dilution
cada tubo cada tubo
tubo
2 ml de la solución 0.25
3 0.125 mg/ml 2 ml 1/8
mg/ml
Otro ejemplo tubo o solución madre 10 mg/dL
Diluciones seriadas a 1 /2
La cantidad inicial de agua que debe haber en cada tubo no es necesariamente 3, puede ser otra
cantidad 4, 5, 6 etc. Pero respetando siempre la dilución al ½ respecto al siguiente tubo:
½ ¼ 1/8 1/16
1/32
Ejemplo
Preparar cinco diluciones al ½ de una disolución de azul de metileno al 20 % (p/v)
Para que en cada tubo haya al menos 4 mL como minimo.
Cantidad de agua en Cantidad de la disolución Dilución Concentración
cada tubo madre (o tubo anterior) obtenida %
Tubo 4 mL de disolución de
1 4 mL de agua concentración 20% 1/2 10
Tubo 4 mL de agua 4 mL del tubo1 1/4 5
2
Tubo 4 mL de agua 4 mL del tubo 2 1/8 2,5
3
Tubo 4 mL de agua 4 mL del tubo 3 1/16 1,25
4
Tubo 4 mL de agua 4 mL del tubo 3 1/32 0.62
5
-1 -2 -3 -4
1/10, 1/100, 1/1000, 1/10000, etc., es decir, 10 , 10 , 10 , 10 , etc.
Del mismo modo que antes, la cantidad total de cada tubo dependerá del volumen que se necesite,
siempre que se mantenga la relación 1/10 en cada tubo respecto al anterior.
Ejemplo
Preparar cuatro diluciones al 1/10 de una disolución de azul de metileno al 20 % (p/v)
REFERENCIAS
Chang, R.; College, W. (2002). Química. (7a. ed). México: Mc Graw-Hill Interamericana
Editores S.A.
Valdebenito, A.; Barrientos, H.; Villarroel, M.; Azócar, M.I.; Ríos, E.; Urbina, F.; Soto, H.
(2014). Manual de Ejercicios de Química General para Ingeniería. Chile: Universidad de
Santiago de Chile, Facultad de Química y Biología.
Valdebenito, A.; Barrientos, H.; Azócar, M.I.; Ríos, E.; Urbina, F.; Soto, H. (2014). Manual
de Ejercicios de Química General para Carreras Facultad Tecnológica. Unidad I:
Estequiometria. Chile: Universidad de Santiago de Chile, Facultad de Química y Biología.
Bates College. How to Make Simple Solutions and Dilutions. Se encuentra en network en
Inglés:
http://abacus.bates.edu/%7Eganderso/biology/resources/dilutions.html