Espectrofotómetro

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Espectrofotómetro

El espectrofotómetro es un instrumento usado en la física óptica que sirve para


medir, en función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma
magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones. También es utilizado
en los laboratorios de química para la cuantificación de sustancias y
microorganismos.

Hay varios tipos de espectrofotómetros, puede ser de absorción atómica o


espectrofotómetro de masa.

Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a


través de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha
muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones:

Dar información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra.


2. Indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia que nos interesa está
presente en la muestra.

https://www.equiposylaboratorio.com/portal/articulo-ampliado/quE-es-y-usos-del-
espectrofotometro

Estos equipos se componen de un sistema de iluminación, un monocromador y un


detector.

Sistema de iluminación
El sistema de iluminación suele disponer de una fuente de hidrógeno o deuterio
para la zona del espectro ultravioleta y una de tungsteno para la zona del espectro
visible y NIR. En el caso de los espectrofotómetros UV-VIS cubren un rango de
200nm a 900nm, que incluye la zona ultravioleta, visible y algunas regiones del
infrarrojo.
Monocromador
Por su parte, el monocromador permite separar el espectro de iluminación y
proporcionar un haz de energía a una longitud de onda concreta. Por lo que, si la
longitud de onda es crítica o afecta a las medidas que se realizan, es fundamental
calibrar esta parte del equipo, o lo que es lo mismo, realizar una calibración en
longitud de onda, que comprobará la diferencia entre la longitud de onda que mide
el equipo y la del patrón de referencia empleado.

Detector
Finalmente, el detector se encarga de transformar la señal que recibe (fotones) y
convertirla en señal eléctrica. De modo que, en función de la intensidad de esta
señal, puede ser registrada por un sistema que proporciona los valores numéricos
de transmitancia y absorbancia o DO.
La calibración del detector, también llamada de escala de absorbancia y
transmitancia, es fundamental para conocer la desviación del equipo en los
valores de estas magnitudes a cada longitud de onda. La exactitud de estos
valores es crítica, puesto que permiten comparar espectros de diferentes
materiales o disoluciones con diferentes concentraciones. En concreto, la
calibración en absorbancia se realiza a todas las longitudes de onda necesaria.
Para calibrar esta escala, suelen realizarse medidas de diferentes valores de
absorbancia para cada longitud de onda. Posteriormente se evalúa la diferencia
entre el valor medido por el equipo y el valor certificado de los patrones
empleados.

https://www.laboratorioseyco.com/para-que-se-utiliza-la-espectrofotometria-uv-vis-
y-como-funcionan-los-equipos-de-medicion/#:~:text=Los%20espectrofot
%C3%B3metros%20son%20equipos%20%C3%B3pticos,un%20monocromador
%20y%20un%20detector.
Diferentes Tipos de Espectrofotómetros
Dependiendo del rango de la longitud de onda que los espectrofotómetros pueden
medir, los mismos se califican de la siguiente manera.
Espectrofotómetro de Laboratorio UV-VIS
Estos son equipos basados en el proceso de absorción de la radiación ultravioleta
visible. Lo interesante de los espectrofotómetros ultravioleta-visible es que son
capaces de detectar radiación con longitud de onda entre los 160 y 1100 nm,
aunque el rango puede variar dependiendo del equipo que se utilice para realizar
las mediciones.

Puede encontrar espectrofotómetros de haz simple, los cuales guían la luz


directamente a través de cubeta de muestra hasta el detector. De igual forma,
existe la configuración de haz doble, en la que el haz de luz de la lámpara se
divide en dos de igual intensidad.

El primero sería el haz de referencia y el haz de muestra. Cada uno de ellos pasa
por la una cubeta diferente, la de referencia, con el solvente, y la de muestra, de
forma simultánea. Por lo tanto, la intensidad de ambos haces se mide en el mismo
momento utilizando dos detectores.

En otro tipo de instrumentos, los dos hacen pasan a través de un bloqueador que
impide el paso de un haz. Así, el detector alterna entre la medida del haz de
muestra y la referencia.

Espectrofotómetros de Laboratorio Infrarrojos


Los espectrofotómetros de laboratorio infrarrojos son equipos basados en la
absorción de radiaciones de longitudes de onda entre los 88 y 2700 nm. Su
proceso de absorción se debe a la presencia de sobretonos y bandas de
combinación. La utilización de los espectrofotómetros se restringe a las muestras
sólidas y líquidas para análisis medioambiental, farmacéutico, polímeros y
alimentos.
Espectrofotómetros de Laboratorio de Absorción Atómica
Con este tipo de espectrofotómetro se puede determinar la concentración de
metales y otros elementos en soluciones. Suelen ser empleados, en su mayoría,
para el análisis de aguas, suelos, bioquímica, farmaceútica, petroquímica etc. Por
lo cual su uso está muy generalizado.

Espectrofotómetros de laboratorio de plasma acoplados a masas


Los espectrofotómetros de plasma acoplados a masa son los más utilizados a la
hora de analizar todos los elementos de la tabla periódica. Además, son ideales
para analizar metales que se encuentran en contracciones de partes por billón. Se
pueden encontrar en laboratorios que analicen el medio ambiente, química,
electrónica, biomedicina etc.

https://galileoequipos.com/blog/tipos-de-espectrofotometros/

Tipos de espectrofotómetros
A continuación, te explicamos las principales diferencias entre los
espectrofotómetros de barrido, de matriz y los de haz simple o doble.

Espectrofotómetros de barrido
En un espectrofotómetro de barrido o escáner, la luz dispersada en longitudes de
onda individuales se selecciona mediante una rejilla, que gira mecánicamente y
mide la transmitancia individual de cada longitud de onda a través de la cubeta. De
este modo, se obtiene todo el espectro de forma continua.

En algunos casos, el escaneo con espectrofotómetros de barrido puede producir


una disminución en la precisión y reproducibilidad de la selección de longitud de
onda.

Espectrofotómetros de matriz (array)


Aquí la muestra está iluminada por un haz de luz UV/VIS, que contiene todo el
espectro. De esta forma, la muestra absorbe simultáneamente las diferentes
longitudes de onda de luz. La luz transmitida es difractada por una rejilla de
reflexión, situada después de la cubeta. A continuación, la luz es dirigida a un
detector, compuesto por diversos materiales fotosensibles, lo que permite la
medición simultánea de todas las longitudes de onda. Al sistema de
espectrofotómetros de matriz también se le conoce como "óptica inversa" y tiene
la ventaja que no dispone de partes móviles y la medida es más rápida y fiable.

Espectrofotómetros UV/VIS de haz simple o doble


En espectrofotómetros de haz simple, el haz de luz originado en la lámpara se
guía directamente a través de la cubeta de muestra hasta el detector.

En cambio, en la configuración de espectrofotómetros de doble haz, el haz de luz


de la lámpara se divide en dos haces de intensidades iguales: un haz de
referencia y un haz de muestra. Cada haz pasa por una cubeta diferente, la de
referencia (con el solvente) y la de muestra, de forma simultánea.

Las intensidades de ambos haces se miden al mismo tiempo mediante dos


detectores (o fotodiodos). En otros instrumentos, los dos haces pasan a través de
un bloqueador que impide el paso de un haz. El detector alterna entre la medida
del haz de muestra y la de referencia.

En mediciones por debajo de 300 nm, hay que tener en cuenta el valor de
absorbancia de los solventes, que puede ser alta. Esto puede originar errores,
puesto que la absorción debida a la muestra es pequeña en comparación con la
absorción total.

https://www.labprocess.es/tipos-de-espectrofotometros

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