Tincion Simple y de Gram ?-1
Tincion Simple y de Gram ?-1
Tincion Simple y de Gram ?-1
Objetivos
Específicos.
●Conseguir una prueba para diferenciar entre una bacteria Gram positiva y Gram
negativa.
●Identificar las diferencias morfológicas que existen entre ambos grupos de
bacterias.
Generales.
o Conocer la importancia de las técnicas de tinción para la observación de
microorganismos.
o Analizar la forma de actuar de los colorantes sobre los microorganismos.
o El alumno aprenderá la técnica de Gram que clasifica a las bacterias en dos
grandes grupos dependiendo de las características de su pared celular.
Marco teórico
Lo primero que tenemos que tomar en cuenta es saber que es la tinción simple y la
tinción de Gram la cual es la tinción simple consiste en un procedimiento de tinción
rápido y sencillo en el cual se emplea un solo colorante, por eso se denomina simple.
Se utiliza principalmente para determinar la morfología y la organización de las
células presentes en una muestra.
Por esto el colorante, cargado positivamente, se ve atraído por las células y se une
a estas de manera espontánea. Es importante tener en cuenta que antes de teñir
una muestra mediante tinción simple, esta debe ser extendida en un portaobjeto.
Donde tenemos por otro lado también la tinción de Gram la cual consiste en una
técnica muy sencilla que se basa en el uso de un colorante que permite observar
las bacterias mejor que bajo el microscopio.
La tinción de Gram es un tipo de tinción que se realiza sobre las bacterias para
observarlas mejor bajo el microscopio. Según la distribución del peptidoglicano de
la pared celular que las envuelve, se tiñen de una forma u otra. Así, las bacterias
que no se tiñen mediante esta técnica se denominan Gram negativas. Están
formadas por una pared más fina formada por menos capas de peptidoglicano y una
segunda membrana rica en lípidos que repele la tinción Gram, al microscopio
aparecen incoloras.
Imagen 2 Muestra de cepas observadas en microscopio óptico encontrando Gram
positivas.
Las Gram positivas tienen una pared celular mucho más gruesa, formada por un
gran número de capas de peptidoglicanos entre las que se inserta la tinción Gram,
dando un color violeta intenso al microscopio y se clasifican como Gram +.
Por ello tenemos que las tinciones nos sirven para identificar de la mejor manera las
bacterias que no podemos visualizar a simple vista.
Metodología
Frotis a partir de cultivos en medio líquido.
Tinción Simple
De acuerdo a la práctica tensión simple se realizó en el medio de cultivo de Agar de
Sali Maliton con el hisotopado de la garganta previamente hecho, en este se puede
observar de un tamaña grande por lo tanto es una Gram positiva, es de color rosa
ya que fueron teñidas con safranina lo que permitió visualizar de mejor forma, estas
se identifican como estafilococos.
Discusión
De acuerdo a los resultados obtenidos en la práctica podemos decir que son Gram
positivos ya que todos se tiñeron de color morado por lo que si se hubieran teñido
de color rojo estás serían Gram negativas, en este caso no fue así lo que nosotros
observamos en el microscopio fueron levaduras Gram positivas que fueron
provenientes de una muestra de pulque.
Hans Christian . (2018). Tinción de Gram . En Microbiología (34). Monterrey :
Editorial Monterrey
TINCION SIMPLE
De acuerdo a los resultados obtenidos podemos decir que las bacterias que vimos
eran positivas ya que todas se tiñeron de rosa, en caso de tener negativas no
hubieran tenido ningún color ya que solo le agregamos safranina en la muestra de
hisotopado
Conclusión
Se vieron bacilos Gram positivos estos los diferenciamos por el color y tamaño, hubo
presencia de levaduras debido a que el medio lo permitió, por lo tanto, no son
propias para la tinción de Gram ya que no son bacterias, pertenecen al reino fungi.
Cuestionario
CUESTIONARIO Tinción simple
1. ¿Qué es la fijación?
Proceso por el cual se preservan y se fijan en una posición los microrganismos de
la forma más parecida posible a la de las células vivas
2. ¿Cuáles son los mecanismos que utilizan los colorantes para adherirse a
las estructuras celulares?
Por afinidad química elemental: Colorante ácido se une a estructura básica, y
viceversa, para resaltar estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados
con la ayuda de diferentes tipos de microscopios. Los diferentes colorantes pueden
ser utilizados para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido
3. Describe los dos métodos de fijación que se pueden emplear.
La fijación por calor se utiliza de forma rutinaria para observar procariotas.
Normalmente una película de células se calienta suavemente pasando el
portaobjetos por una llama.
La fijación química se utiliza para proteger las subestructuras celulares finas y la
morfología de los microrganismos más grandes. Los fijadores químicos penetran en
la célula y reaccionan con los componentes celulares, normalmente se unen a
proteínas y lípidos para inactivarlos, insolubilizarlos e inmovilizarlos.
4. ¿Cuál es el objetivo de una tinción?
Las moléculas de un colorante se adsorben a una superficie. El uso de colorantes
permite cambiar el color de las células de los microorganismos y poder realizar la
observación en microscopio óptico.
5. ¿Qué tipos de tinciones existen?
Tinción de Gram. Tinción de Ziehl-Neelsen Fundamento, Tinción de ácido alcohol
resistencia, Tinción de endosporas. Tinción de estructuras específicas. Tinción de
flagelos.
6. Plantea una actividad biotecnológica donde apliques esta práctica.
La actividad a plantear es la determinación de bacterias mediante diferentes
muestras de un experimento o proyecto llevado a cabo para un análisis
microbiológico y mediante esta tinción identificar cada una de las bacterias que no
podemos ver mediante la tinción y poder ver en el microscopio.