Técnicas Histológicas

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TÉCNICAS HISTOLÓGICAS:

El objetivo es preservar la estructura y la organización de esas células, abarca desde la obtención


de la muestra hasta su transformación en una preparación para su observación en el microscopio.

MÉTODO DE PREPARACIÓN:

 Corte histológico: células agrupadas formando tejidos y según la disposición que


presenten conformaran órganos, objetivo preservar la estructura y organización de las
células.
 Frotis/extendido: células dispersas que se obtienen de una superficie corporal
externa o interna que se extiende sobre un portaobjeto formando una
capa delgada (sangre, células descamadas). El frotis se realiza a través de
un hisopado rotando el hisopo sobre el vidrio, dejándolo secar al aire como
resultado las células coloreadas. El extendido se pone una gota de líquido
sobre la unta de un portaobjeto y otro vidrio a 45° extendemos la muestra, la dejamos
secar al aire coloreamos con may grunwald giemsa evitando la superposición de la célula.
 Impronta: se apoya la muestra sobre el portaobjeto y se hace presión para que las células
se adhieran.

PASOS DEL CORTE HISTOLOGICO:

1. Obtencion de la muestra: la muestra puede ser una biopsia representativa de


tamaño no superior 5 milimetros de expesor para la entrada del líquido fijador
hasta el centro de la muestra, el corte debe ser neto para facilitar la orientacion
de la muestra en bloque con tijeras o bisturí, el tiempo de obtencion y fijacion
debe ser minimo. Las muestras llegan al laboratorio sumergidas completamente
en liquido fijador rotuladas con letras legibles acompañadas con una boleta de
remision con la mayor cantidad de datos posibles.
2. Fijacion.
3. Inclusion en parafina.
4. Corte.
5. Coloración.
6. Montaje.

COLORACIÓN: Los colorantes básicos tiñen elementos ácidos con hematoxilina (ácidos
nucleicos) “basófilo”. Los colorantes ácidos tiñen elementos básicos con eosina
(citoplasma celular) “acidófilo”.

PLANO DE SECCIÓN: en un órgano hueco corto de manera transversal (perpendicular al


eje longitudinal) y la pongo sobre un portaobjeto veo la pared esférica con un espesor y
voy a ver una luz de un órgano tipo tubular. Si lo corto a través de su eje longitudinal veo
dos paredes con una luz en el medio. Si hago un corte oblicuo vemos una forma tipo
elíptica.
En un órgano macizo o sólido si hago un corte transversal vamos a ver un círculo sin luz. Si
hacemos un corte longitudinal vemos un rectángulo. (HAY QUE DECIR TAMBIEN SI ES UN
ORGANO HUECO O MACIZO).

TEJIDO EPITELIAL
CARACTERISTICAS PRINCIPALES: escasa sustancia intercelular, elevada densidad celular, no
poseen irrigación ni inervación propia, apoyan siempre sobre una membrana basal,
presenta una polaridad marcada, debajo siempre hay tejido conectivo que le da por medio
de los vasos sanguíneos nutrición y donde vuelcan los productos de desechos.

ORIGEN EMBRIONARIO ectodermo (origen al epitelio de la epidermis, de la mucosa oral,


nasal, glándulas de la piel glándulas mamarias), mesodermo (origen a los epitelios de los
vasos sanguíneos, urinarios o el revestimiento del sistema reproductor) y endodermo (da
origen al epitelio respiratorio, del tubo digestivo como estomago o el intestino y también da
origen desde el endodermo al hígado y páncreas).

EPITELIOS DE REVESTIMIENTO: (RECUBREN LA LUZ DE UN ORGANO)

• Epitelio plano: célula alargada núcleo es ovalado y eje


longitudinal paralelo a la membrana basal.
• Epitelio cúbico: citoplasma igual a la altura, núcleo esférico.
• Epitelio cilíndrico: Alto doble que el ancho, núcleos más
ovoides y el eje longitudinal es perpendicular a la membrana
basal.
• Epitelios especiales: pseudoestratificado (núcleos a diferentes
alturas, una sola capa de células cilíndricas y son cilíndricos
ciliados). Y de transición (células poliédricas, reviste la vejiga con capacidad de adaptación a
los cambios de volúmenes del órgano y sus células pueden ser binucleadas).
ESPECIALIZACIONES EN EL EPITELIO DE REVESTIMIENTO:

• En la membrana basolateral: hay pliegues basales (mayor superficie para el


intercambio)
• En la membrana apical: hay cilias (prolongaciones que en su interior tiene 9 pares de
microtubulos periféricos y uno central con capacidad de generar movimiento,
epitelios simples), microvellocidades (aumentar la superficie de absorción, epitelios
simples), queratina (impide la deshidratación y protege, epitelios estratificados) y
paraqueratina (reviste el esófago, epitelios estratificados).

RECONOCIMIENTO DE DISTINTOS TEJIDOS:


EPITELIOS
GRANDULARES:
(CÉLULAS O
CONJUNTO DE CÉLULAS ESPECIALIZADOS
PARA LA SECRECIÓN).

1. SEGÚN EL NÚMERO DE
CÉLULAS: unicelulares y pluricelulares.
2. SEGÚN EL LUGAR DONDE VIERTEN SU SECRECIÓN:
• Exócrinas: imagen
• Endócrinas: vuelcan su secreción al torrente sanguíneo.
• Anficrinas: porciones para ambas secreciones.

CLASIFICACION DE LAS GLANDULA ENDÓCRINAS:

1. Según la estructura del adenómero:

• Tubulares: tienen forma de tubo ó tubuloglomerulares cuando ese tubo se enrolla


(glándulas sudoríparas).
• Acinares: estructura compacta esferoidal con luz centran mínima, célula con forma
piramidal (poción exócrina del páncreas o glándulas salivales).
• Alveolares: tienen forma de bolsa o saco, donde la luz más grande que la anterior
(glándulas sebáceas de la dermis).
2. Según la ramificación del conducto: simples (no tienen ramificación) o compuestas
(conducto más ramificado con porciones mas adenómeras).
3. Según el mecanismo de secreción:
 Merocrinas: se almacenan en vesículas que están en la superficie apical y
son vertidas en la luz de las glándulas por exicitosis (glándulas salivales).
 Apócrinas: se acumula en la superficie apical, parte de la porción apical
rodeada por la membrana plasmática forma parte de la secreción.
 Holocrinas: contenido de la célula y la célula se secretan, activa división
celular (glándulas sebáceas).
4. Según la naturaleza química del producto:
 Mucosas: secreción viscosa, queda el contenido como vacío, núcleos bien pequeño
con cromatina densa y bien en el límite de la membrana basal.
 Serosas: producto de secreción proteína proteica, núcleo esférico de cromatina laxa,
sintetiza proteínas.
 Mixtas

CLASIFICACION DE GLANDULAS ENDÓCRINAS:


1. Según la disposición celular:
 Cordonales: células se disponen en cordones (corteza de la
glándula renal).
 Reticulares: forma de red (corteza de la glandula renal)
 Foliculares: forma de ampolla, rodean el producto de secreción
(glándulas tiroides)

TEJIDO CONECTIVO

CARACTERISTICAS PRINCIPALES: abundante sustancia intercelular, vasos sanguíneos y linfáticos y


nervios que le van a portar irrigación e inervación al resto de los tejidos, origen en el mesodermo,
asociado al tejido epitelial, cartilaginoso, muscular.

TEJIDO CONECTIVO LAXO (MAYOR CANTIDAD DE CELULAS)

 Neutrofilo (migrante): normalmente esférico con núcleo multibilobulado con nucléolo


evidente y actividad transcripcional; tiene una cromatina densa su citoplasma se tiñe muy
claro en tinciones de rutina.
 Eosinófilo (migrante): dentro de todo esférica con nucleo bilobulado en el citoplasma
presenta gránulos, hay lisosomas. En la imagen hay alta densidad celular con células
íntimamente asociada y es un tejido epitelial cilíndrico simple con células caliciformes y en
el medio tenemos el tejido conectivo con eosinofilos y gránulos.
 Linfocito (migrantes): núcleos bien voluminosos de cromatina bien densa que ocupan la
mayor parte del volumen celular formando un anillo de sello y el citoplasma en la
periferia. Esta tanto en el epitelio como en el conectivo.
 Macrófagos (migrantes): en sangre se denomina monocito luego cuando va al tejido
conectivo es bien esférico con un núcleo bien evidente en forma de herradura de
cromatina dentro de todo laxa con presencia de gránulos y lisosomas y citoplasmas.
 Plasmocitos (migrantes): deriva del linfocito B, sintetiza glucoproteinas con gran desarrollo
de rer y Golgi que en tinciones de rutina no se puede ver, tiene un citoplasma basófilo con
hematoxilina con núcleo bien excéntrico de cromatina laxa.
 Mastocitos o células sebadas (migrantes): poliédrica con un núcleo central de gran tamaño
posee una gran cantidad de granulos que tienen estaminas.
 Fibroblastos (fijas): sintetizan al tejido conectivo y a todos los componentes,
transcripcionalmente activas con un nucléolo o dos bien evidentes de cromatina laxa
(también el rer y el núcleo oval), citoplasma bien basófilo.
 Fibrocitos (fijas): disminuye el volumen de la célula en cuanto a su citoplasma y quedan
células fusiformes con un núcleo mucho más denso bien alargado inmerso dentro de las
fibras del tejido conectivo.
 Adipositos blancos (fijas): de gran tamaño con una gran vacuola (cargada de lípidos) de
grasa que no está teñida, Núcleo de cromatina bien densa y bien acéntrica. (grasa que
envuelve al riñón).
 Adipositos pardos (fijas): dentro de todo esféricos o poliédricos con varias vacuolas en su
interior, un núcleo mucho más central y más laxo, tinción intensamente acidofila por la
gran cantidad de mitocondrias. (orta y arterias venas pulmonares).

TEJIDO CONECTIVO DENSO (MAYOR CANTIDAD DE FIBRAS): en la sustancia extracelular


 Fibras colágenas: principalmente de tipo I bien gruesas con un ondulado bien eosinofilo
entre las células con distribución bastante irregular para resistir a las fuerzas de tensión,
en las tinciones tricromícas el tejido conectivo va a ser de color azul, verde o amarillo.
Hay de tipo I (tejido conectivo, hueso, cornea
y tendones), de tipo II (cartílago hialino y
elástico), de tipo III (fibras reticulares,
membranas basales), de tipo IV (membranas
basales) y de tipo V (placenta). Y DEPENDE
COMO SE UBIQUEN PODEMOS TENER U
TEJIDO DENSO REGULAR (se distribuyen
paralelamente) Y TEJIDO DENSO IRREGULAR
(discurren hacia diferentes sentidos)
 Fibras elásticas: enrolladas sobre si mismas
generando puentes cruzados con las elastinas
para sostenerse entre ellas. En la tinción de
rutina se ve un festoneado, se hallan en los vasos sanguíneos de gran tamaño y en
cartílagos elásticos, brillan más que el resto, (el de la derecha es una tinción con orceina).
 Fibras reticulares: colágeno de tipo III, en la impregnación arsénica se ven teñidos con la
membrana basal. Da sostén a las células epiteliales y a la dl tejido conectivo, a su vez
sirven como punto de fijación para células que tienen que migrar y son abundantes en
membranas basales.

TEJIDO CARTILAGINOSO (puede llegar a calcificarse)

CARACTERISTICAS PRINCIPALES: origen mesodérmico (deriva del conectivo), abundante sustancia


intercelular, avascular, adaptado a fuerzas de comprensión, brinda el molde para el desarrollo
óseo.

¿CÓMO ESTÁ COMPUESTO?:


 Células: condroblastos (citoplasma más abundante con núcleo oval de cromatina más laxa,
tiene forma oval, puede tener prolongaciones), condrocitos (núcleo de cromatina más

densa, citoplasma cargado de hidratros de carbono y gotas de lípidos, difícil de ver en las
preparaciones) y condroblastos (tiene remodelación del cartílago).

 Sustancia extracelular: fibras colágenas particulares del colágeno, GAGs, proteoglucanos,


proteínas multiadhesivas y electrolitos

ORGANIZACIÓN DE ESTE TEJIDO:

 Pericondrio rodeándolo (excepto el fibrocartílago y cartílagos reticulares) con una capa


fibrosa de un conectivo denso sobre la zona más externa y una capa condrógena con
células ya propias como los osteoblastos sobre la superficie más interna, los condroblastos
se van incorporando a la matriz y se transforman en condrocitos (crecimiento aposicional).
 Matriz condral presente en todos los cartílagos, tenemos lagunas/grupos isógenos
condroplastos que aloja a los osteocitos en la zona territorial con crecimiento intersticial.

CLASIFICACIÓN:

 HIALINO: presentes fibras de colágeno tiene una matriz homogénea. Zona más interna
se toma más basófilo en relación a la zona más periférica asociada al pericondrio.
 ELASTICO: condrocitos de mayor tamaño, la matriz extracelular es en mejor cantidad,
la matriz celular tiene un alto contenido de fibras elásticas teñidas de color más
oscuro permitiendo la flexibilidad.
 FIBROCLASTO: es un cartílago intermedio entre el tejido conectivo denso y
cartilaginoso, fibrocartílago que no presenta un pericondrio, un tramado de
condrocito que se ubican en hilera, secreta fibras de colágeno de gran grosor que se
interponen.

TEJIDO MUSCULAR:
 Fibras musculares estriadas esqueléticas: tinción bicrómica, núcleo excéntrico en
la periferia con cromatina densa en la mayoría. Corte longitudinal (imagen
de arriba) bandeo claras, varían de espesor las
fibras, núcleos parecen estar centrales. Cortada
transversalmente (imagen de abajo) núcleo
todos se encuentran en la periferia de la célula,
se observa un fino granulado. OTRAS
CARACTERISTICAS: los núcleos van a ser células
satélites, célula multinucleada debido al origen
embriológico que es el mioblasto, la matriz
extracelular va a ser en endomisio (fibra),
perimisio (fascículo) y Epimisio (musculo). ¿DÓNDE LO
ENCONTRAMOS? Grandes masas musculares de
contracción voluntaria como puede ser en la lengua y en algunas viseras como
puede ser el esófago de los rumiantes.
 Tejido muscular liso: Corte longitudinal (arriba) célula ahusada van a solapar con la
porción más gruesa de la célula contigua, núcleo central de cromatina densa,
principalmente en la pared de los huesos huecos. Corte transversal puede o no
aparecer el núcleo, los citoplasmas con diferentes tamaños. OTRAS
CARACTERISTICAS: células rodeadas individualmente por tejido conectivo laxo pero
a su vez puede formar fascículos,. ¿DÓNDE LO ENCONTRAMOS? En vasos
sanguíneos, en el intestino, útero, bronquiolos y en el iris de los ojos.

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