“Año del Fortalecimiento de la Soberanía Nacional”

Facultad de Ciencias Humanas

Carrera professional de Psicología

BIOLOGÍA

ALUMNA
CAHUA SALAZAR MELISA ELIZABETH
 Métodos Microscópicos para estudiar los
Microorganismos
Para estudiar microscópicamente a los organismos en el laboratorio, existen dos
métodos principales y consisten en observaciones: inmediata (in vivo) y mediata (post-
mortem).

Observación Inmediata (in vivo): se realiza directamente sobre organismos vivos, o en

partes aisladas del organismo, después de hacer una extracción fresca de algunas de sus
células o tejidos, los que sobreviven cierto tiempo (no son duradero). Para el montaje se
usan líquidos de ayuda que no varíen el pH del medio en el que viven los organismos,
líquidos que se llaman medios biológicos, líquidos fisiológicos o indiferentes y pueden ser
naturales (los que provienen del hábitat del organismo) o artificiales (como la solución
salina fisiológica, las soluciones de Ringer y de Looke).

Estos estudios se realizan mediante:

 Examen Directo o Preparado Fresco: que para el caso de seres vivos microscópicos
se coloca sobre un portaobjeto una gota de líquido biológico y sobre ella la sustancia
a examinar (corte fino de tejido, organismo microscópico, etc.); cubriéndola luego con
una laminilla o cubreobjeto. Y en el caso de organismos macroscópicos, la observación
directa de alguna parte (por ejemplo el riego de la membrana interdigital de la rana).

 Coloración Vital: usando colorantes muy diluidos que ayudan a resaltar ciertos
componentes estructurales y no causan la muerte celular ni alteran la vitalidad celular.
Estos procesos son intermedios entre el examen en fresco y las técnicas de coloración
post-mortem.

Observación Mediata (Post-mortem): mediante la realización de preparados definitivos,

en seco o coloreados; que tienden a durar mayor tiempo.

Las preparaciones definitivas “post-mortem” se pueden efectuar mediante las técnicas

de Frotis (“smear”) seguido de la fijación, coloración, lavado y secado; aplastamiento
(“squash”) y cortes histológicos.

Se requiere de la utilización de sustancias colorantes que permitan contrastar estructuras

o partes de las células en la muestra a investigar.

Las coloraciones pueden ser simples; en la que se utiliza un solo colorante, dobles o
diferenciales y especiales; en las que se usan más de un colorante (dos o más colorantes).
 OBSERVACIÓN EN FRESCO O DIRECTO (Inmediata o In Vivo):

Objetivo: Observar y describir las características de estudio de las Células microbianas

mediante preparados en fresco o directos (in vivo).

Muestra Biológica:
 Muestras biológicas (agua estancada, otras).
 Raspado de la superficie dental.

Material y Equipo de Laboratorio:

 Láminas portaobjeto y cubreobjeto.
 Asa bacteriológica o de Kolle.
 Mechero.
 Microscopio.

Reactivo:
 Solución salina fisiológica.

Método: Observación microscópica mediante Preparado en Fresco o Directo.

Fundamento: basado en el reconocimiento y estudio de las características
vitales o de vida (como la manifestación de la movilidad, estructuras y otros)
de las células en ambientes isotónicos o del mismo hábitat.

Procedimiento:
 Colocar sobre la parte media de un portaobjeto, una gota de solución salina
fisiológica si fuera necesario (muestras secas o poco húmedas).
 Adicionar una gota de la muestra biológica (agua estancada, raspado de superficie
dental, saliva etc.) y cubrir con una laminilla.
 Observar con objetivo de 10X y 40X. Haga la representación gráfica:
Método: Observación microscópica mediante Preparado en Gota Pendiente.
Fundamento: con la misma base del preparado directo, con la ventaja que hay
menor distorsión por el peso de la lámina cubreobjeto. Se utiliza lámina
portaobjeto con excavación central.

Procedimiento:
 En un portaobjeto excavado,
cubrir el borde de la excavación
con una delgada capa de vaselina
 Colocar en el centro de un
cubreobjeto una gota de la
muestra
 Colocar de manera invertida el
portaobjeto excavado sobre el
cubreobjeto con la muestra,
dejando la gota de muestra en el
centro de la concavidad
 Colocar en posición normal la
lámina portaobjeto para el
examen microscópico
 Observar con objetivo de 10X y
40X. Haga la representación
gráfica:
OBSERVACIÓN MEDIANTE COLORACIÓN SIMPLE (Mediata o Post-
mortem)

Objetivo: Observar y describir las características de estudio de las Células

microbianasmediante Coloración Simple.

Muestra Biológica:
 Muestras biológicas (agua estancada, otras).
 Raspado de la superficie dental.
 Cultivos Microbianos.

Material y Equipo de Laboratorio:

 Láminas portaobjeto y cubreobjeto.
 Asa bacteriológica o de Kolle.
 Mechero.
 Microscopio.

Reactivos:
 Colorante Azul de Metileno.
 Colorante Fucsina.
 Colorante Safranina.
 Colorante Cristal Violeta.
 Solución salina fisiológica.

Procedimiento:
 Realizar un frotis o extensión de la muestra biológica en un portaobjeto.
 Fijar dejando al medio ambiente o con el calor del mechero.
 Agregar gotas necesarias del colorante (1 solamente) para cubrir la muestra,
dejaractuar por 1 a 3 minutos (o tiempo recomendado según el colorante).
 Luego, lavar el preparado y secar al ambiente o calor del mechero.
 Observar al microscopio con el objetivo de inmersión.
 Haga el esquema representativo e identifique las diferentes formas microbianas.


CUESTIONARIO:

 Mencione las funciones de las partes más importantes del Microscopio

compuesto o fotónico.
 ¿Cómo se obtiene la amplificación total (aumento total) de los objetos
observados en el microscopio?

 Mencione las diferencias estructurales y funcionales entre el

Microscopio compuesto o fotónico y el Microscopio electrónico.
Describa e indique las características resaltantes de otros microscopios
 GUIA DE PROTECCIÓN EN
LABORATORIO

UIPOS DE PROTECCION INDIVIDUAL

Por qué debo usar equipos de protección individual, para
protegerse del contacto con:
Agentes infecciosos y sustancias químicas irritantes y toxicas.
Materiales punzo cortantes.
Materiales sometidos a calentamiento o congelamiento.
Recuerde: Los procedimientos de manipulación de muestras
biológicas producen partículas que pueden entrar por las vías
aéreas y causan infecciones o contaminar ropas, mesas de trabajo
y equipos.
imágenes del buscador “Google”
colección.educ.ar

La bata de laboratorio y su función:

La bata debe ser confeccionada con una tela resistente a la penetración

de líquidos, con un largo que llegue debajo de las rodillas y mangas
largas. La bata puede ser desechable o no. Caso no lo sea, debe ser
resistente a la descontaminación por autoclave.

La bata protege su ropa y su piel de la contaminación, y usted debe

utilizarla durante todo el tiempo que este dentro del laboratorio o en
otras áreas de manipulación de material biológico, como, por ejemplo,
en la colecta y en el almacenamiento.
Imágenes Laboratorios U.S.B.

¿Puedo llevarme la bata de laboratorio para lavarla en mi casa?

 Lo ideal es que exista una lavandería en su instalación que hagan ese servicio. Pero
si necesita lavar la bata en su casa, usted debe primero pasarla por autoclave para
esterilizarla. Después de eso, usted podría llevarla para su casa sin correr riesgos.

Existen diferentes tipos de batas de laboratorio recomendables para distintos tipos

deprotección:
  Algodón - protege frente a objetos "volantes", esquinas agudas o rugosas y es un
buen retardante del fuego.

 Lana - protege de salpicaduras o materiales triturados, pequeñas cantidades de

ácido y pequeñas llamas.

 Fibras sintéticas - protege frente a chispas, radiación IR o UV. Sin embargo,

las batas delaboratorio de fibras sintéticas pueden amplificar los efectos adversos
de algunos peligros del laboratorio. Por ejemplo, algunos disolventes pueden
disolver tipos particulares de fibras sintéticas disminuyendo, por tanto, la
capacidad protectora de la bata. Además, algunas fibras sintéticas funden en
contacto con la llama. Este material fundido puede producir ampollas y
quemaduras en la piel y emitir humos irritantes.

 Tela aluminizada y refractaria - protege frente a la radiación de calor.

1.1. Los guantes y su función:

Es una buena idea adquirir el hábito de usar guantes protectores en
el laboratorio, además actúan como barrera entre las manos y los
materiales peligrosos, algunos guantes pueden absorber también la
transpiración y proteger las manos del calor.
Cierto tipo de guantes se puede disolver en contacto con disolventes,
por lo que es importante tener un cuidado extremo en seleccionar el
guante protector que se adapte a la naturaleza del trabajo a realizar.
Antes de utilizar los guantes (especialmente los de látex), hay que
asegurarse de que están en buenas condiciones y no tienen agujeros,
pinchazos o rasgaduras.
www. job-wear.com

Función de las gafas, protector facial, protección del cabello y

protector pulmonar:

Gafas protectoras: El laboratorio quizá, es el lugar más peligroso para la

salud que se puede encontrar. En cualquier momento se pueden producir
salpicaduras de productos químicos y objetos "volantes" que pueden ir a
parar a los ojos. Por este motivo, la protección ocular debe considerarse
importante y llevar en todo momento dentro del laboratorio una adecuada
protección ocular. Las gafas protectoras deben ofrecer una buena
protección frontal y lateral.
Galeria de imágenes
Microsoft (office online)

Uso y mantenimiento de las gafas protectoras: Las gafas protectoras deben

ser lo más cómodas posible, ajustándose a la nariz y la cara y no interferir en los
movimientos del usuario. Debe utilizarse siempre protección ocular cuando se
maneja:

 Material de vidrio a presión reducida

 Materiales criogénicos y radioactivos
  Material de vidrio a presión elevada y material inflamable
 Sustancias cáusticas, irritantes, corrosivas y explosivas
 Sustancias biológicas con riesgos para la salud
 Luz ultra violeta y luz láser
 Sustancias químicas tóxicas y carcinógena

El equipo de seguridad ocular debe ser de un material que se pueda limpiar y

desinfectar. La protección ocular debe mantenerse siempre en buenas
condiciones.
Protector facial: Otra opción para proteger su rostro es el protector
facial. El está hecho del mismo material que las gafas, debe ser
ajustable a la cabeza y cubrir todo el rostro.

Protección del cabello: Si usted tiene cabellos largos, manténgalo

permanentemente sujetados o use gorro para evitar que ellos entren en
contacto con materiales biológicos o químicos durante la manipulación,
o que se prendan en los equipos. El uso del gorro es obligatorio en
algunos sectores como por ejemplo laboratorios de cultivos de células,
biología molecular, microbiológicos y producciónde hemoderivados.

www.rosario.com.ar Protección pulmonar: Debido a que ciertos procedimientos de

laboratorio pueden producir humos nocivos y sustancias
contaminantes, podría requerirse protección pulmonar en el laboratorio.
Las mascarillas individuales, deben contener el adsorbente adecuado
al tipo de sustancia que se va a manipular. Enel caso de partículas
sólidas, filtro adecuado al tamaño mínimo. Para evitar el uso de
sistemas de protección individual, es conveniente realizar estas
operaciones de laboratorio en el interior de una campana extractora de
gases.

Siempre que se vaya a manipular sustancias químicas que se evaporan

con facilidad, se mantendrán los contenedores, y todo el material
utilizado con ellas, dentro de la campana en funcionamiento. El lavado
del material utilizado debe hacerse también en el interior de
Imágenes Laboratorios U.S.B. la campana.

Protección de los pies:

Zapatos Cerrados: Están diseñados para prevenir heridas producidas

por sustancias corrosivas, objetos pesados, descargas eléctricas, así
como para evitar deslizamientos en suelos mojados. Si cayera al suelo
una sustancia corrosiva o un objeto pesado, la parte más vulnerable del
cuerpo serian los pies.

www.solostocks
.com
Por este motivo, se recomienda llevar zapatos que cubran y protejan completamente los pies.

Los zapatos de tela, el tenis, absorben fácilmente los líquidos. Si se derrama una sustancia
química en un zapato de tela, hay que quitarlo inmediatamente. Se debe elegir un zapato
resistente que cubra todo el pie. Este tipo de calzado proporcionará la mejor protección.

No se debe llevar ninguno de los siguientes tipos de zapatos al laboratorio:

 Sandalias.
 Zuecos.
 Tacones altos.
 Zapatos que dejen el pie al descubierto.
 Reinos biológicos
Los seres vivos se clasifican en la actualidad en seis diferentes reinos de la
naturaleza:

 Animalia (animales),
 Plantae (plantas),
 Fungi (hongos),
 Protista (protozoarios),
 Bacteria (bacterias) y
 Archaea (arqueas).

REINO EUBACTERIA
 REINO ANIMAL

REINO FUNGI
 ARCHAEA ARQUEAS

Protista (protozoarios)
}

Plantae (plantas)
 Reconocimiento de la Morfología Celular: (Pared celular)

Robert Hoocke emplea por primera vez la palabra "CELULA" para

describir los poros o espacios vacíos existentes en la estructura del corcho. El
corcho es un tejido muerto y sólo son visibles las paredes celulósicas y espacios
vacíos de las células originarias.
La Pared Celular está presente en las células vegetales principalmente,
también se presenta en cianofitas, hongos, bacterias, protofitos y algunos
protozoos. Es una estructura rígida, que proporciona protección osmótica, sostén
mecánico y mantiene la forma celular, compuesta químicamente por un retículo
de microfibrillas de celulosa y una matriz (formada por ciertas proteínas,
polisacáridos y lignina).

OBSERVACIÓN DE LAS CELDILLAS DE CORCHO

Objetivo: Observar y reconocer la pared celular en las celdillas de corcho.

Muestra:
 Corcho.

Material y equipo de laboratorio

 Lámina portaobjeto y cubreobjeto.
 Navaja nueva.
 Gotero.
 Microscopio.

Reactivo:
Agua de caño, agua destilada.

Procedimiento:
 Con una navaja nueva, hacer cortes finos de corcho (de preferencia que se
pueda leer a través).
 Colocar sobre un portaobjeto, uno o varios cortes finos y añadir una gota de
agua
 Proteger el preparado con una laminilla cubreobjeto.
 Llevar a observación microscópica, con objetivos de menor y mayor
aumento.
 Haga la representación gráfica de la observación microscópica y reconozca
la estructura que representa la Pared Celular.
 OBSERVACION DE ORGANELOS CITOPLASMATICOS

Observación: ___________________________

Aumento: _________________

Leyenda:
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Observación: ___________________________

Aumento: _________________

Leyenda:
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Observación: ___________________________
Aumento: _________________

Leyenda:
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