Laboratorio Homocisteína

LABORATORIO HOMOCISTEÍNA
● A partir de la METIONINA obtenemos la determinación de homocisteína

Catabolismo de aminoácidos
- Hay unas enzimas llamadas TRANSAMINASAS como la ALT y AST, que se
encargan de la eliminación del grupo amino por TRANSAMINACIÓN
- Grupo amino se dona y se convierte en urea que será excretada por el riñón
- El esqueleto carbonado que sobra, puede tomar diferentes vía como: Vías
cetogénicas o glucogénicas
- Las 20 rutas catabólicas de aa convergen en la formación de productos principales,

intermediarios del C.KREBS
➔ Glucogénicos: Originan glucosa
➔ Cetogénicos: Originan cuerpo cetónicos
● La metionina es un precursor de SUCCINIL.CoA
● La metionina es glucogénico
OXIDACIÓN DE LA METIONINA PARA OBTENER HOMOCISTEÍNA
● Homocisteína puede volver a formar metionina

- Vitamina B12
- Tetrahidrofolato
● Homocisteína puede sintetizar cisteina
- B6
- Cistationina B-sintasa: Cataliza paso de homocisteína a cistationina
(Dependiente de B6)
- Cistationina B-liasa: Cataliza el paso de cistationina a alfa-cetobutirato
- Alfa-cetobutirato: Propionil CoA será el precursor de succinil CoA
RUTA METABÓLICA DE LA DEGRADACIÓN DE METIONINA
1. Metionina actúa con la enzima metionina adenosil transferasa obteniendo

S-adenosilmetionina (SAM)
2. Un compuesto recibirá en grupo metilo y actuará la enzima Metiltransferasa
obteniendo S-adenosilhomocisteína
3. S-adenosilhomocisteína sufre un proceso de hidrólisis en el que se libera
ADENOSINA obteniendo HOMOCISTEÍNA
4. Para pasar de homocisteína a cisteína, participa la enzima Metionina sintasa. De lo
contrario, se condensa con una serina por la enzima cistationina B-sintasa
obteniendo CISTATIONINA
5. Cistationina reacciona con la enzima cistationina B-liasa obteniendo formación de
alfa cetobutirato y CISTEÍNA
6. Cuando actúa la cistationina B-liasa se libera NH3
- Se obtendrían 3 compuestos
1. Cisteína
2. NH3
3. Alfa-cetobutirato
7. Finalmente obtendremos PROPINIL-CoA y SUCCINIL-CoA
FORMAS MOLECULARES DE HOMOCISTEÍNA
● Ligada a proteínas (bHcy)
- Homocisteína ligada a la albúmina (Hcy-albúmina)
- Homocisteína ligada a otras proteínas
● Libre o no ligada a proteínas (fHcy)
- Dímeros de homocisteína-cisteína (Hcy-Cys)
- Dímeros de homocisteína-homocisteína u homocisteína (Hcy-Hcy)
- Monómeros de homocisteína (HcyH)
INTERPRETACIÓN CLÍNICA
Entran a jugar 2 conceptos importantes
1. Hiperhomocisteinemia: Elevación de concentración de homocisteína en sangre
2. Homocistinuria: Presencia de homocisteína en orina
Si se presentan cualquiera de las dos patología, el paciente tiene riesgo de enfermedad
cardiovascular, agregación plaquetaria e inflamación.
Se han definido 4 principales causas de estas patología
1. Deficiencia genética de enzimas como:
- Cistationina B-sintasa (CBS)
- Metionina sintasa (MS)
- Metilentetrahidrafolato (MTHFR)
2. Deficiencia de vitaminas B6-B12-B9
3. Falla renal para la eliminación eficaz de aminoácidos
4. Interacción con compuestos o medicamentos (Óxido nítrico, metotrexato, fenitoína)
que interfieren con el metabolismo de homocisteína
FACTORES QUE AFECTAN LA CONCENTRACIÓN DE tHcy

- Factores genéticos
- Factores fisiológicos
- Estilo de vida
- Situaciones clínicas
- Fármacos
IMPORTANCIA DE LA MEDICIÓN DE HOMOCISTEÍNA
1. Las concentraciones de homocisteína varían debido a la dieta, factores genéticos,
edad, sexo, menoapusia y otras variables fisológicas y relacionadas con los hábitos
de vida
2. La homocisteína constituye una nueva diana terapéutica que puede permitir mejorar
la prevención de las enfermedades cardiovasculares
3. El riesgo cardiovascular es gradual y proporcional a la concentración de
homocisteína
ENFERMEDAD CARDIOVASCULAR Y Hcy
● Cosas que pueden suceder con el aumento de la concentración de homocisteína
- Inflamación
- Aumento en la segregación y adhesión de trombocitos
- Compromete la integridad de la pared celular de la sangre y permite la
acumulación de capas de grasa
- Hiperplasia en la túnica íntima
- Estimula la oxidación de las lipoproteínas de baja densidad (LDL)
● Homocisteína que esta en el suero del paciente se va a condensar con la serina,

reacción catalizada por cistationina B-sintasa obteniendo cistationina
● Cistationina va a estar en una reacción catalizada por cistationina B-liasa del KIT
formando Hcy, piruvato y NH4
● El piruvato es convertido en lactato gracias a la reacción catalizada por Lactato
dehidrogenasa consumiéndose NAD que será medido en una absorbancia de 340
nm
- Mucha homocisteína y mucho lactato hará que la absorbancia disminuye
porque se consume mucho NAD
● CBL DEL KIT cataliza la hidrólisis de enlace entre el azufre de la homocisteína y el
carbono de la serina
● CBL CELULAR cataliza la producción de alfa-cetobutirato, cisteína y NH3
DIFERENCIA CBL DE LAS CELLS Y DEL KIT

● En cells se obtiene
- Alfa-cetobutirato
- NH3
- Cisteína
● En el kit se obtiene
- Homocisteína
- Piruvato
- NH4
PROCEDIMIENTO
● Se tienen 2 reactivos
1. NADH, LDH y serina
2. CBS y CBL
● Se adiciona el primer reactivo y se incuba a 37 grados, después se adiciona la
muestra. NO OCURRE REACCIÓN porque no se ha añadido el reactivo 2 que
contiene la CBS y CBL
● Se incuba 5 min a 37 grados y se añade el reactivo 2
● Se toma la absorbancia al minuto 1 y al minuto 5

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● A partir de la METIONINA obtenemos la determinación de homocisteína

- Las 20 rutas catabólicas de aa convergen en la formación de productos principales,

OXIDACIÓN DE LA METIONINA PARA OBTENER HOMOCISTEÍNA

● Homocisteína puede volver a formar metionina

RUTA METABÓLICA DE LA DEGRADACIÓN DE METIONINA

1. Metionina actúa con la enzima metionina adenosil transferasa obteniendo

FACTORES QUE AFECTAN LA CONCENTRACIÓN DE tHcy

● Homocisteína que esta en el suero del paciente se va a condensar con la serina,

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