Modulo de Bio
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1. INTRODUCCION…………………………………………………………………3
2. ANTECEDENTES……………………………………………...………………...4
3. JUSTIFICACION………………………………………………………………….6
4. OBJETIVOS………………………………………………...…………………….6
5. FUNDAMENTO TEÓRICO………………….…………………………………...7
6. METODOLOGÍA………………………………...………………...………………9
7. CÁLCULOS Y RESULTADOS………………………………………………...14
8. RESULTADOS…………………………………………………………………...17
9. CONCLUSIONES……………………………………………………………….18
10. ANEXOS………………………………………………………………………….19
10. BIBLIOGRAFÍA…………………………………………………………………22
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1. INTRODUCCION:
Propósito del presente modulo fue analizar las mejores condiciones en la que la
queratina podría degradar se y este método ser usado en como un método nuevo en las
industrias de cuero al momento de hacer la curtiembre, ya que la técnica actual en los
métodos de utilización en las materias queratínicas por las industrias del cuero son en el
momento de la curtiembre son métodos tóxicos que dejan muchos residuos difíciles de
eliminar, para este propósito este método de hidrolizaciòn enzimática es una buena
propuesta a la hora de preparar el cuero, ya que al ser un método biológico este nos
deja residuos mas simples que se podrían eliminar más fácil mente.
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2. ANTECEDENTES:
Imperio romano.
En la época del imperio romano se sabe que el principal consumidor de artículos de cuero
fueron las Legiones, y este comercio estuvo centralizado en la ciudad de Roma a través de un
gremio de comerciantes de cueros y pieles del puerto de Ostia. Uno de los elementos
desencadenantes de la guerra de Cartago fue precisamente el comercio del cuero,
suministrador a su vez, gracias a las mercados instalados en el norte de África, de pieles a los
diferentes países mediterráneos, fue la ruptura del monopolio imperial que regulaba el
comercio de las pieles.
A partir del siglo III a. C., y muy especialmente de la época del imperio romano, los mercados
de cuero proliferan en todo el mundo romanizado. Quizá sea el sur de Francia y la práctica
totalidad de la Península Ibérica la zona más abundante en este tipo de industrias. Un
hallazgo encontrado en el pueblo de Botorrita (Zaragoza) donde han aparecido cantidades de
cal, de azufre y de otros productos químicos, en el yacimiento de Contrebia Belaisca
correspondiente al período comprendido entre los siglos I a. C. y III a. C. demuestra el
desarrollo de la piel en tan temprana época en la romanizada Hispania. El material
mayoritariamente utilizado en la confección del calzado era el cuero.
Edad Media.
Oficialmente en el año 476 corresponde la caída del imperio romano de Occidente, y desde
esta época Carlomagno dicta numerosas leyes prohibiendo o limitando el comercio de
determinadas pieles, y al mismo tiempo carga con impuestos de otras. Por esa época se tiene
conocimiento de pieles bastas, mal trabajadas y de procedencia local: garduña, comadreja,
gato montés, topo, liebre, ciervo, buey, cordero y cabra. La más cotizada es la de marta. Se
sabe que para fabricar adornos para las mangas, cuellos, los nobles germánicos y
mediterráneos importan desde el Cáucaso pieles de armiño (Denominada también arminia o
rata de Armenia).
La moda por esa época era traer las pieles de Siberia, este comercio tendrá duración de un
siglo cayendo ya bajo el monopolio de las comunidades de judíos de Varsovia o de Lviv, que
tratan directamente con los cazadores.
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Por otra parte, al desmoronarse progresivamente las vías de comercio romanas, el papiro
para escribir se hace cada vez más escaso en Occidente, beneficiando a una industria local
de producción de pieles finas para la fabricación de pergamino.
La elaboración de cuero tiene una época de esplendor en el sur de España, en los reinos
árabes del Al-Andalus. La ciudad de Córdoba se hace famosa por su producción de cueros de
alta calidad, repujados, policromados y, en algunos casos, metalizados con aplicaciones de
finas hojas de oro y plata.
Algunos autores han contribuido a un estudio de las propiedades del cuero uno de ello es
Ramón Llull que cerca del año 1290 escribe el Llibre de les Bèsties como parte integrante del
Llibre de Meravelles o Fèlix y que se puede decir constituye una auténtica joya para el estudio
de la relación entre las pieles utilizadas en la curtición y los animales que las procuraban.
El Renacimiento (España).
Resulta una incógnita saber cual era la vida cotidiana de los artesanos del siglo XIV, no
obstante se dispone de un documento, el Quadern de Comptes que es una especie de libro
de contabilidad muy rudimentario que procede de Jaume March y de su hijo Bernat March y
que nos suministra abundante información sobre el comercio del ramo de la piel en Vic y de la
región. Las cuentas muestran qué tipo de cueros se utilizaban mayoritariamente por aquella
época, y de dónde se importaban y se sabe que el gremio de zapateros es el más numeroso
de entre los profesionales del sector.
3. JUSTIFICACIÓN:
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Esta investigación se realizo con la prioridad que nuestra cepa tenga las condiciones más
optimas, para luego este ser usado en la industria del cuero, ya que estas usan una serie de
elementos y métodos muy complejos para obtener sus productos.
4. OBJETIVOS:
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5. FUNDAMENTO TEORICO:
DEFINICIÓN DECUERO
Lo habitual es que, al separar la capa de piel del cuerpo del animal, se eliminen los pelos o la
lana y se someta dicha capa al proceso de curtido. Éste consiste en transformar la piel
susceptible de putrefacción en un cuero que no se descompone y que, por lo tanto, puede
utilizarse para confeccionar calzado, carteras, bolsos, camperas, pantalones, muebles y
muchos otros productos.
¿Que es la queratina?
Usos de la queratina
Los desechos queratínicos pueden ser utilizados como el material de alimentación, sin
embargo se requiere un procesamiento de valorizar los residuos. Entre los métodos de
procesamiento, varias tecnologías hidrolíticas se pueden mencionar: métodos hidrotermales,
hidrólisis enzimática, bioconversión. Hidrólisis química requiere la etapa de neutralización y
algunos aminoácidos nutritivos se pierden. Entre los métodos hidrotermales que requieren
condiciones de alta temperatura y presión, la hidrólisis ácida asegura la degradación más
completa de queratina que lo básico. El producto obtenido se puede usar como alimento para
el ganado de baja calidad. Otro método para obtener queratina solubilizada es la degradación
por la cal. Más ventajoso son los métodos enzimáticos y de bioconversión que aseguran
condiciones más suaves y preservan propiedades nutricionales de la comida producida.
Producción de queratina
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Cada año millones de toneladas de residuos de queratina se genera en todo el mundo.
La mayoría problemáticas son las plumas que se producen en las cantidades más
grandes y esto es probablemente el material queratinoso sobre todo abundantes. El
papel biológico de la pluma es insulatory, locomotor y estructural. Plumas constituyen el
10% del peso total de pollo,
Los procesos de tratamiento hidrotérmico emplean temperaturas que van desde 100 C a 150
C en 1,5 atm. Los métodos consumen gran cantidad de energía. Con frecuencia, se añaden
ácidos (HCl) o bases (NaOH). Esto rompe enlaces peptídicos. El producto de hidrólisis se usa
como alimento para animales, aunque es deficiente en metionina, histidina y triptófano y es de
bastante bajo valor nutricional. La calidad de la proteína y la biodisponibilidad de nutrientes es
variable. Steam-tratamiento denaturates queratina que mejora la digestibilidad cuando se
compara con la pluma en bruto. Se emplea en la alimentación de aves de corral, la trucha
arco iris, camarones y salmón después de la suplementación con aminoácidos esenciales. Si
se utilizan métodos hidrotermales, algunos aminoácidos esenciales se pierden (lisina,
metionina, triptófano) y no nutritivo se forman (lisinoalanina, lantionina).
Hidrólisis
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componga la roca. Como consecuencia se forman minerales arcillosos y residuos metálicos
arenosos.
6. METODOLOGÍA
Materiales
Cajas petrie.
Micropipeta de 1000 µL
Azas.
Parafilms.
Goteros.
Microtubos Eppendors.
Papel aluminio.
Desecador
Matraces Erlenmeyer de 150 ml y 250 ml
Vasos precipitados de 500 ml
Propipeta
Falcons de 50 ml de capacidad.
Tapones de algodón
Gradilla de plástico.
6.2. Reactivos
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6.2.12 XILOSA
6.2.13 MALTOSA
6.3. Equipos
6.3.1. Balanza analítica ACCULAB AL-204 (200g max).
6.3.2. pH metro OAKTON pH 700
6.3.3. Autoclave QUIMIS.
6.3.4. Cámara de flujo laminar ESCO class II BSC.
6.3.5. Incubadora INNOVA 4200 NEW BRUNSWICK SCIENTIIC.
6.3.6. Centrifuga para tubos falcons de 50 ml Centurion Scientific Ltd. Pro research.
6.3.7. Refrigerador 4ºC COMFORT.
6.3.8. Estufa Memmert UF75.
6.4. PROCEDIMIENTO
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Se siembra en cajas petrie (con medio solido) la cepa CH25 luego de que el cultivo
crezca, se procede a sembrar en un medio liquido HM en un matraz de 250 ml con un
medio de 100 ml. Se hizo una siembra de del cultivo del medio HM LIQUIDO a otro
medio liquido (HM MODIFICADO).
Esto se pone a la estufa para evaporar todo el líquido restante y así poder medir cuanto
de queratina nos quedo en nuestro falcons.
Poner un matraz de 250 una preparación de 100ml de HM, se le pone un tapón, luego
se envuelve con papel aluminio la boquilla del matraz, se regula su pH y por último y
esterilizar en la autoclave.
Luego de que este medio este auto clavado (esterilizado) se hace enfriar a ambiente
hasta que este a una temperatura de unos 25 ºC aproximadamente y luego se pone
dentro de la cámara de flujo laminar para realizar la inoculación, por medio de unos
eppendors, unos tips, una asa una caja petrie con la cepa CH 25.
Ponemos en el eppendor 900 µL del líquido del matraz con un tips y la micropipeta.
Recogemos una pequeña parte de cepa con la asa y la ponemos en la en el eppendor
luego hacemos emulsionar con un tips y la Micropipeta.
Para lograr la inoculación se deja por 24 horas en la incuvadora.
Luego de que este medio este auto clavado (esterilizado) se hace enfriar a ambiente
hasta que este a una temperatura de unos 25 ºC aproximadamente y luego se pone
dentro de la cámara de flujo laminar para realizar la inoculación, por medio de unos
eppendors, unos tips, una asa una caja petrie con la cepa CH 25.
Ponemos en el eppendor 900 µL del líquido del matraz con un tips y la Micropipeta.
Recogemos una pequeña parte de cepa con la asa y la ponemos en la en el eppendor
luego hacemos emulsionar con un tips y la Micropipeta.
Para lograr la inoculación se deja por 24 horas en la incuvadora.
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6.4.2.2. Inoculación de medio liquido HM a HM MODIFICADO
Para corroborar estos datos se realiza una réplica con cada fuente de carbono.
Luego de que este medio este auto clavado (esterilizado) se hace enfriar a ambiente
hasta que este a una temperatura de unos 25 ºC aproximadamente y luego se pone
dentro de la cámara de flujo laminar para realizar la inoculación, por medio de unos
eppendors, unos tips, una asa una caja petrie con la cepa CH 25.
Ponemos en el eppendor 900 µL del líquido del matraz con un tips y la Micropipeta.
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Recogemos una pequeña parte de cepa con la asa y la ponemos en la en el eppendor
luego hacemos emulsionar con un tips y la Micropipeta.
Para lograr la inoculación se deja por 24 horas en la incuvadora.
Y.E. SACAROSA
0,3 0,3/2
0,3 0,3/4
0,3 0,3/8
0,3 0,3
Este es nuestra variación de HM modificado la que prepararemos para esta prueba y
regularemos el pH a 8.
Luego se enfría luego de auto clavar lo y en la cámara de flujo laminar esterilizada y
con tips auto clavados y una Micropipeta desinfectada tomamos un mililitro de nuestro
medio liquido de HM normal y lo vertimos en el HM modificado lo dejamos en la
incubadora durante 7 días.
Este MH modificado debe ser quemado luego de estos 7 días y puesto en 3 falcons y
centrifugamos y retiramos el líquido, la mayor cantidad de liquido posible.
Luego se pone los falcons a la estufa y después de ya secos estos falcons con solo la
muestra solida pesamos y vemos cuanta queratina se consumió en base a diferencia
de pesos.
El que tenga mejor rendimiento en función de su fuente de carbono/ nitrógeno.
7. CÁLCULOS Y RESULTADOS
7.1. Pruebas de pH
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6 1,0003 0,0000 40,3893 40,6509 0,2616
7 1,0066 0,0009 40,7183 40,8556 0,1373
8 1,0089 0,0011 40,7945 40,9306 0,1361
9 1,0001 0,0001 40,7466 40,8795 0,1329
10 1,0040 1,0001 40,5454 40,7319 0,1883
4 22,27
5 76,38
6 73,83
7 87,01
8 87,38
9 86,71
10 81,39
14
Sacarosa 1,0013 0,1951 80,52
Xilosa 1,0031 0,2399 76,08
Maltosa 1,0008 0,2992 70,1
7.2.2 Replica
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Replica 4 1,0064 0,0012 40,6043 1,0052
8. Resultados
pH Rendimiento por
consumo %
7 87,01
8 87,38
9 86,71
Por lo tanto se trabajara en pH 8 apartir de ahora.
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Relación de carbono nitrógeno estos son los mejores resultados
Relación de carbono nitrógeno las mejores relación de estas fueron las de Y.E. CON
0,3g y SACAROSA con 0,15g su rendimiento fue de 77,1 y 79,69.
Por lo tanto se concluye que para optimizar nuestro rendimiento trabajaremos en
pH 8 y con una fuente de carbono de sacarosa para abaratar costos y con una
relación de nitrógeno de 2:1.
Centrifugadora
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pH metro OAKTON pH 700
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La balanza analítica me permitió medir los pesos con mayor exactitud
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11. BIBLIOGRAFIA
Recibido: 8 Julio 2010 / Aceptado: 26 Abril 2011 / Publicado en línea el 8 mayo 2011
Springer Science + Business Media BV 2011
Daroit, D.J., Correa, P.F., Brandelli, A.: Keratinolytic potential of a novel Bacillus
sp. P45 isolated from the Amazon basin fish Piaractus mesopotamicus. Int. Biodet.
Biodegr. 63, 358–363 (2009)
Vesela, M., Friedrich, J.: Amino acid and soluble protein cocktail from waste
keratin hydrolysed by a fungal keratinase of Paecilomyces marquandii. Biotechnol. Bioprocess Eng.
14, 84–90 (2009)
La biodegradación de los residuos de queratina: Teoría y aspectos prácticos
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