UNIVERSIDAD MAYOR DE SAR ANDRES CARRERA DE INGENIERIA QUIMCA, AMBIENTAL Y DE ALIMENTOS LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL (PRQ301.L) PRACTICA N° 4 USO DE EQUIPOS Y BIOSEGURIDAD EN LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL 4, OBJETIVO.- ¥ Conocer el funcionamiento de los diferentes equipos, instrumentos y materiales utlizados en el laboratorio de microbiologia ¥ Aorender técnicas de biosegurided que permitan un ambiente de trabajo adecuado y seguro, durante la ejecuciOn de las actividades précticas en el Laboratorio de Microbiologia 2. FUNDAMENTO TEORICO.- La microbiologia es una cienoia muy interesante y fascinante, para su estudio y comprensién; es necesario ‘sfectuar algunas determinaciones précticas para lo cual es prociso el conocimiento y manejo de equipos, materiales e instrumentos de uso comin y especitico; por esta razon en esta préctica se pretende conocer equipos y materiales que se usan con mucha frecuencia en esta ciencia, Todos les equipos utilizados en el laboratorio deben estar respaldados por un programa de control de calidad y de mantenimiento preventive y correctivo, basados en las instrucciones del fabricante y los procedimientes establecidos, Debe mantenerse un registro de todo lo realizado el respecto, con el nombre del instrumento, focha, resultado y comentarios. Y se deberén contar con un manual de procedimientos operacionales que incluya’ + Listado de los equipos con nombre, marca, modelo, ntimero de serie, fecha de recibo y numero de inventario de la institucién. ‘* Registro del_mantenimiento preventive y corrective, periodicided de la inspeccion y fallas del instrumento, ‘+ Dobe inciuirse un apartado de correccién de fallas y acciones correctivas efectuadas. + Instrucciones de uso det instrumento, redactadas en forma clara y en el idioma de los usuarios, © Incluir precauciones de seguridad, procedimientos de limpioza, cuidado del instrumento y acciones correctivas. Acontinuacién de manera especifica definiremos algunos equipos: > Balanza Analitica Es un aparato que tiene una gran sensibilidad, algunas tienen hasta 1 diezmilésima de sensibilidad, > Balanza de precisién Es un aparato que permite pesar sustancias, su sensibilidad es de 1 décima de gramo. oa nar need ING. MARIA CONDE Pagina 1UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRES CARRERA DE INGENIERIA QUIMCA, AMBIENTAL Y DE ALIMENTOS LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL (PRQ 3011) Autocave Es un equipo que se utiliza para la esterilizacion de material, tanto de limpio como contaminado, que se basa en la produceién de vapor contenido a eltas presiones. > Estuta de incubacion Se Usa para mantener 2 una temperatura constante los cults microbiolégicos, y asegurar el crecimiento de los microorganismos. Vortex we Es un aparato que permite agitar sustancias en forma homogénea, > Contador de Colonias ‘Se utlize para aumentar la vista de las colonias en ia caja de petri, con el fin de facilitar la identiicacién microscépica y el conteo, > PH-metro Es un aparato que permite medir el pH de las sustancias. Bafio Maria ei Es un aparato que se utiliza para desgelificar los medios de cultivo y mantenerios a una temperatura constante, Los laboratorios de microbiologta constituyen ambientes de trabajo especiales, que pueden presentar Fiesgos de enfermedades infecciosas para las personas que so encuentren en 0 cerca de ellos. El trabajo diario en el laboratorio es un trabajo de grupo, en donde la actitud de cada uno de los integrantes ante las Practices, asi como el entrenamiento que posean en las técnicas requeridas para el manejo de material ‘contaminado, determinan su propia seguridad, asi como la de sus compafieros y la de la colectividad en general. Es por ello que antes de comenzar con las actividades practicas, todas las personas involucradas (estudiantes y profesores) tenemos la obligacion de conocer cudles son las normas de seguridad a seguir en el laboratorio de manera tal, que el trabajo se realice con un riesgo minimo de exposicién, tanto para las personas que lo ejecutan como para el medio ambiente, PRINCIPIOS DE BIOSEGURIDAD Bioseguridad: a seguridad biolégica 0 bioseguridad, es la aplicacién del conocimionto, de las técnicas y de los equipos ‘necesarios para prevenir la exposicién del personal, del area de laboratono y del medio ambiente a agentes Patencialments infecciosos o biopeligrosos. ING, MARIA CONDE : = PaginaUNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRES CARRERA DE INGEIERIA QUIMCA, AMBIENTAL Y DE ALIMENTOS LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL (PRQ 301 1) Agentes Biopeligrosos: ‘Son todos aquellos agentes biolégicos y materiales que son potencialmente peligrosos para los seres humans, los animales y las plantas. Entre ellos podemos citar: bacterias, virus, hongos, parasites, productos recombinants, alergenos, priones, et, Riesgo iMicrobiolégico: EI Riesgo Microbiologico se encuentra presente cada vez que se realize una actividad préctica en el Laboratorio, donde se requiera la manipulacion de cultivos de microorganismes, los cuales pueden alcanzar concentraciones muy elevadas y pueden llegar a provocar una infecoién si no son manipulados adecuadamente, Para que se produzca un accidente por un agente bioligico deben estar presente basicamente 4 elementos: un huesped susceptible, un agente infeccioso, una concentracién suficiente de éste y una ruta de transmision adecuada; siendo este altimo punto ei que mejor se puede controlar en el laboratorio. Vias de Infeccion Los microorganismos pueden ingresar al organismo a través de: la boca, los pulmones, Ia ple! (intacta 0 lesionads), la conjuntiva, etc. Las vias de contaminacién mas frecuentes en el laboratorio se dan a través de: = Laboca Comer, beber y furar en el laboratorio, Realizar transferencias con pipetas sin utilizar ningun tipo de proteccién Transferencia indirecta de microorganismos a través de los dedos 0 utensilios contaminados (Idpices, oligratos, ete.). + Lapiel Inocutacion accidental con una aguja hipodermice u otros instrumentos punzantes o de vido. Cortaduras 0 resguitos. + Los ojos Salpicacuras do materiales infecciosos. ‘Traneferencia indirecta de microorganismos a través de los dedos contaminados. + Los pulmones Inhalacion de microorganisms transportados por el aire (aerosoles). En los Laboratorios de Microbiologia estamos seguros que comprendiendo y teniendo conocimiento de todos estos posibles riesgos, aprendiendo y ejecutando las técnicas adecuedas, contribuiremos con una parte ING. MARIA CONDE Pagina 3UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRES CARRERA DE INGENIERIA QUIMCA, AMBIENTAL. Y DE ALIMENTOS LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL (PRO 301 1) importante e integral del proceso de educacién, asi como también a reducir el nimero de accidentes en el laboratorio y en futuras actvidados fuera de él 3. PARTE EXPERIMENTAL.- 3.1 EQUIPOS: > Balanza Analitica > Balanza de precision > Microscopic > Espectrofotometro UV-Visible > Contrifugadora » Shaker » Autoctave > Estufa de secado > Estufa de incubacion >» Contador de Colonias > PH-metto > Desecador 3.2 MATERIALES * Cubetas para lectura espectrofotométrica + Tubos de centrifuga de 15 ML y 45 ML. = Portaotjetos © Cubreodjetos * Matraz Erlenmeyer con tapa de 500 ML y 260 ML. ‘© Tubos de ensayo con tapa © Cajas petri + Asada Platine + Aguja de inooulacién * Mechero de alcohol ‘+ Mechero bunsen ING. MARIA CONDE Pagina 4UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRES CARRERA DE INGENIERIA QUIMCA, AMBIENTAL Y DE ALIMENTOS LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL (PRQ 3011) 3.3 REACTIVOS E INSUMOS = Alcohol etico + Aqua destiada 3.4 PROCEDIMIENTO.- a) APRENDIZAJE DE CADA EQUIPO.- En la practica se presentara los equipos a utilzarse y que son de vital importancia en al laboratorio de microbiologla industrial; donde se dara énfasis a los siguientes puntos, - Forma de Encendido y Apagado. ~ Puesta en marcha del equipo. Cuidado y precauciones de su uso. - Forma de almacenamiento. b) BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Se Gesarrollaran las siguientes actividades: + Normas de seguridad en el laboratorio de microbiologia. (Revisar Medidas de Seguridad) + Medidas en caso de emergencia. 4, RESULTADOS 44 Desoribir lo aprendido en la practica en cuanto a equipos, instrumentos y materiales. 4.2 Desarrolar un ejemplo de caso de emergencia y establecer las medidas de seguridad a tomar. 6. CUESTIONARIO.- 5.1 LQué es la Campane de fujo laminar? 5.2 LQue tipos de autoclaves existe? “ 5.3 LA qué rangos de temperatura se incuban los microciganismos? 5.4 Detalle otros matenales de laboratorio no citados en la practica, 5.8 LQué cuidados se debe tener al utlizar un Espectrofotémetro UV-Visible? 5.6 LQué requisitos de Bioseguridad debe cumplir un laboratorio de microbiologla de alimentos y/o ambiental? ING. MARIA CONDE Pagina 5MEDIDAS DESEGORIDAD LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL (PRQ 301 L) MEDIDAS DE SEGURIDAD PARA TRABAJAR EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA 4. Leer la motodologia de cada experimento hasta familiarzarse con las tecnicas y principios. Al conocer el experimento disminuyes la posibilidad de que ocurran accidentes. 2. En 2! laboratorio esta prohibido comer, beber, furar y JUGAR. consuuin PROHIBIDO ALINENTOS. PUR 3. Ene! laboratorio debes llevar en todo momenta el mandil blanco de laboratorio. Esto garantiza que ningun material de cute te caiga, accidentalmente sobre la ropa o la piel, y ademas protege la piel o la ropa de manchas o veriido de sustancias quimicas. No olvides llevar siempre Ee un patio de laboratorio, 4, En el érea de trabajo, dentro del laboratorio, solo dobes llevar aquellos materiales estrictamente ecesarios para el trabajo, como son las gulas de laboratorio yio un cuademo de apuntes. El resto de objetos, como abrigos, libros, 0 bolsos debes: dejarlos (wera del Area de trabajo. fe | ae ING. MARIA CONDE Pagina 1‘MEDIDAS DESEGURIDAD LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL (PRQ 301 L) Comienza cada Jornada limpiando.-y desiniectando el érea de trabajo, Satura la zona con desinfectante, extiende el desinfectante con tuna toalla de papel, y deja que se seque. Repite este procedimiento despues de que hayas terminado de trabajar para asegurar que ‘cualquier material depositado en el area de trabajo no sufra contaminacién. 8. Ser muy cuidadoso con el equipo de trabajo, si no sabes utilizar, pregunta al docente o al auxiliar sobre la forma de utiizarlo. Ademas debes tener cuidado con el material de vidrio, para eviter rupturas 0 ia pérdida de mismo. 7. Constatar que todos los cullivos y custancias qulmicas estén adecuadamente etiquetades, con el fin de evitar usos inadecuados, a ‘8. Cuando se caliente o se lleve a la homilla alguna susiancia, evitar utilizar matraces tapados, debido a que la presién de vapor generada puede hacer estallar estos materiales, es preferible usar vasos de precipitado para le preparacién de medios de cultivo, — ING. MARIA CONDE PaginaMEDIDAS DI SEGURIDAD MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL (PRQ 301.1) 9. Ser muy cuidadoso con los mecheros y las Sustancias inflamables (Ej: alcohol). Para evitar quemaduras, apaga los mecheros cuando no los uses. Y cuando trabajes ten cuidado de no colocar las manos sobre la lama. Froctodo meteriai contaminado debe ser Cesinfectado antes de ser eliminado o reutlizado, Todo el material 2 autociavar deberia colocerse en un racipiente apropiado para su recoleccién, Debes colocar las pipetas usadas en una solucion desinfectante. 11.Tras la sesién de trabajo, limpia el lugar de trabajo y lavate las manos antes de abandonar el laboratorio para mantener unas buenas condiciones higiénicas, 12.En caso de accidente o lesién, avisar Inmediatamente sl cocente 0 al encargado del leboratorio para que pueda realizarse una accion rapida y apropiada, ING. MARIA COND! Pagina 3