FFyB-UNAP

SEM 2023 I
FARMACOLOGÍA I.
PRÁCTICA

OBJETIVOS GENERALES

Las prácticas diseñadas persiguen los siguientes objetivos puestos que durante su
desarrollo el estudiante estará en condiciones de:
Conocer las diferentes técnicas y métodos farmacológicos y su importancia en el estudio
de drogas nuevas y en su aplicación en humanos.
Emplear y confirmar la información teórica adquirida en clases.
Desarrollar su capacidad de observación y crítica, extrapolar los resultados a la práctica
clínica.
Desarrollar su afectividad en el manejo de animales de laboratorio, pensando en el
paciente.

INSTRUCCIONES GENERALES- para todas las prácticas.

- Asistir a las clases de laboratorio a la hora exacta y con su mandil limpio y
presentable en el día correspondiente y a su mesa asignada.
- Llevar consigo la guía de prácticas, la misma que debe ser leída por alumno
antes de ingresar al salón, con el objeto de estar informado de lo que tiene que
hacer. Revisar la teoría para comprender los resultados.
- Tener mucho cuidado en el uso de las drogas, cerciorándose de que cada frasco
tenga su etiqueta, para usarlo en su oportunidad cuidando no contaminar las
drogas.
- Hacer con debida anticipación los cálculos de las dosis de drogas que tienen que
aplicar y saber por qué vía debe de administrarla.
- No usar una nueva droga hasta que no haya pasado el efecto de la administrada
inmediatamente antes, o en su defecto, aplicarla tal como se lo indica en la guía,
en su momento preciso, o como lo indique el profesor.
- Manejar con cuidado el material de laboratorio, sobre todo los objetos frágiles,
evitando romperlos porque en este caso deberá ser devuelto por el o los alumnos
responsables.
- Los alumnos deben consultar con sus profesores, cualquier duda que tenga.
- Desarrollar los cuestionarios con bibliografía confiable y actualizada (Internet)
la misma que será reportada al final del mismo.
 PRACTICA Nº 1
MANEJO DE ALGUNOS ANIMALES DE LABORATORIO
INTRODUCCIÓN

Antecedentes

Los experimentos de farmacología efectuados para estudiar las propiedades biológicas

de las sustancias químicas, se realizan en animales de laboratorio.
En general los experimentos son de tres tipos:
In vivo: Cuando se utiliza al animal íntegro, vivo y consciente para registrar el cambio
que ocurre en el animal como un todo.
In situ: Cuando se utilizan animales conscientes o inconscientes, sometido a cirugía
para exponer, sin separar, algunos de sus órganos o tejidos en que se intenta registrar
algún efecto.
Habitualmente están anestesiados, desmedulados y/o descerebrados, con respiración
asistida.
In vitro; Consiste en obtener de un animal, que fue sacrificado bajo el efecto anestésico
o sin él, un órgano o un fragmento y mantener dicho órgano en condiciones de
temperatura y nutrición similares a las fisiológicas

Independientemente del tipo de experimento de que se trate, es necesario, en primer

lugar, manipular los animales de laboratorio para administrarles algún medicamento,
anestesiarlos, obtener alguna muestra de tejido o someterlo a cirugía; por esta razón
todos los individuos, desde el investigador formado hasta el estudiante, que van a
efectuar un experimento farmacológico deben ser capaces de manejar apropiadamente
los animales de uso común en el laboratorio y estar enterados de la manera de
sacrificarlos.

Los experimentos biomédicos utilizan una gran variedad de especies animales; el tipo
preciso depende de la rama o área de experimentación biomédica de que se trate. Así, se
han utilizado desde grandes mamíferos hasta células bacterianas o cultivadas de
diferentes tejidos e inclusive alguna estructura subcelular, enzimas o cofactores
específicos.

En los estudios farmacológicos es más frecuente el empleo de vertebrados,

particularmente de mamíferos. De ellos destacan los siguientes: ratón, rata, cobayo,
gato, perro, sapos y con menor frecuencia los primates y en casos muy específicos,
inclusive humanos.

Una de las razones para emplear diversas especies animales se refiere al hecho de que el
efecto farmacológicos de ciertos fármacos solo se observa en alguna de ellas. Por otro
lado, en los estudios relativos al desarrollo de nuevos medicamentos, y con el fin de
determinar todas las posibles acciones biológicas de las sustancias químicas es
necesario el empleo de por lo menos 4 ó 5 especies animales.

El uso de varias especies de animales es particularmente critico en los estudios

toxicológicos, ya que tales investigaciones son determinantes para la prueba posterior en
el hombre. En un buen número de estudios farmacológicos se busca utilizar aquellas
especies que tengan una mayor semejanza fisiológica con los seres humanos.
Y cabe subrayar que no todos los efectos farmacológicos que ocurre en los animales de
laboratorio son extrapolares al hombre, que ciertos efectos sólo se pueden estudiar en la
especie humana.

En relación al uso de animales para la investigación, conviene recordar su calidad de

seres vivos, que las distintas especies biológicas han sido y son en extremo valiosas para
el hombre que les debe tratar con cuidado y respeto. No se tiene la certeza de que los
animales mantengan una estructura emocional similar a la del hombre, lo que sí es
incuestionable es que los estímulos nociceptivos les causan dolor, que parece
acompañarse de un sufrimiento similar al que ocurre en el hombre.

Por ello, es absolutamente indispensable evitar su manejo inadecuado y el sufrimiento

innecesario. (Leer la declaración de HELSINSKY).

Por otro lado, en la mayoría de los casos, es necesario sacrificar a los animales que han
sido utilizados en el laboratorio. Existen diversos procedimientos: inhalación de gases
barbitúricos, golpe en la nuca, etc. Estos procedimientos deberán llevarse a cabo con la
rapidez y seguridad necesarias para que la muerte ocurra con el menor sufrimiento

Objetivos de la práctica
- Conocer las características anatómicas básicas de algunas de las especies
animales empleadas en el laboratorio.
- Desarrollar las destrezas necesarias para manejar apropiadamente a los animales
de laboratorio.
- Desarrollar las destrezas necesarias para la administración de fármacos.
- Calcular apropiadamente la dosis según el peso corporal.
- Conocer y aplicar algunos de los procedimientos empleados para sacrificar a los
animales de laboratorio.

MATERIALES Y METODOS
Material
12 ratas adultas, (6 hembras, 6 machos)
12 ratones adultos, (6 hembras, 6 machos)
2 jeringas de 1ml. Tipo tuberculina
2 jeringas de 5 ml.
2 agujas hipodérmicas Nº 18 con cánula para administración intragástrica.
2 agujas hipodérmicas Nº 22 con cánula para administración intragástrica.
2 agujas Nº 22
2 agujas Nº 20
1 frasco con solución salina (Nacl al 9%)
1 balanza para pesar animal.

Consideraciones Generales sobre el manejo de animales

El manejo adecuado facilita la recolección de datos, tanto de los animales control como
de los tratados: es decir, antes, durante y después de los fármacos. Si el manejo no es el
indicado, este sólo hecho puede condicionar respuestas anómalas alrededor de los
fármacos.
Habitualmente, los animales para experimentación se obtienen de un bioterio, sitio en
donde se reproducen, cuidan y domestican; sin embargo, se deben manipular con calma
y precaución para evitar que ataquen por temor o desconfianza.

Al manipular animales se debe tener en cuenta que la conducta social en cautiverio es

distinta a la conducta del estado libre, debido a la influencia directa del medio ambiente.

Los animales de laboratorio, confinados en jaulas, están imposibilitadas para procurarse

agua y alimentos de vivir en el medio ambiente que más les beneficia. Ello suele inhibir
una de las conductas de supervivencia más características de todas las especies
biológicas libres, la agresividad; que también disminuye por el contacto cotidiano con
las personas que los cuida y alimenta.

A pesar de ello, ninguna de las indicaciones específicas que se describen para cada
especie son innecesarias.

Por otro lado, cuando se efectúa un experimento con varios animales es necesaria su
identificación.

Para los experimentos cuya duración es sólo de varias horas, el procedimiento más
sencillo es una mancha de tinta en diversas zonas del cuerpo.

En los experimentos crónicos es preferible el sistema de perforación o cortes en las

orejas.

1. Manejo de la rata
Es recomendable cambiar de sitio la jaula en donde se encuentran, abrir la puerta para
permitir que los animales se asomen y “capten” el hecho de que van a ser manipuladas.
Las manos deben estar limpias porque el olor de sustancias químicas y de otros
animales pueden inquietarlas.
Para sacar una rata de la jaula se le debe tomar suavemente del cuerpo o de la cola; si se
inquieta, apoyarla en el brazo o en una superficie rugosa.

Dejarla ahí un momento para que se tranquilice y luego colocar la palma de la mano
sobre el torso del animal y cerrar los dedos pulgar, índice y medio alrededor del cuello;
el anular y el meñique alrededor del tórax para sostenerla. Se debe presionar firme pero
suavemente y evitar brusquedades y no producir asfixia.

Si el animal pone resistencia, deslizar el dedo pulgar hacia la mandíbula inferior y al

presionarla se cierra el hocico para evitar que muerda. Se recomienda no manejar
animales muy inquietos o agresivos.

El sexo se determina al levantar al animal; en el macho se aprecia la bolsa escrotal, que

contiene los testículos, y que está ausente en la hembra.

Administración de fármacos por vía intraperitoneal e intra muscular.

Una vez que la rata está sujeta e inmóvil, con la otra mano se toman los cuartos traseros,
se estiran y se presenta el abdomen de la rata para que otra persona inyecte, por vía
intraperitoneal, en el cuadrante inferior izquierdo de la línea media.
La aguja (27/6 mm) de la jeringa debe formar un ángulo de aproximadamente 10 grados
con la superficie de la piel, para evitar penetrar la vejiga o una asa intestinal y provocar
con ello muerte del animal.

Al penetrar la aguja se jala el embolo de la jeringa y si aspira algún líquido (punción

visceral) retirar un poco la aguja hasta que ya no fluya, entonces se puede depositar el
fármaco.

Si la administración es por vía intramuscular, se presenta el dorso del animal y el

fármaco se deposita, a través de una aguja (27/13 mm), en la parte posterior de los
cuartos traseros. En ambos casos se inyectan pequeños volúmenes, habitualmente 0.2 a
0.4 ml/100g de peso.

Administración de fármacos por vía intragástica.

Para la administración oral, antes de tomar al animal, debe atarse un hilo grueso en el
dedo índice; una vez sujetada la rata se pasa un hilo por el maxilar superior y se enrolla
sobre el mismo dedo ; el hilo se prolonga y se sujeta al meñique de la misma mano; de
aquí se dirige hacia el maxilar inferior, al tirar de el suave y firmemente, de regreso
hacia el meñique y enredarlo en este, se abre el hocico, Ahora se introduce al hocico una
sonda gástrica, flexible, hacia el esófago; si el animal tose o se torna cianótico,
probablemente la cánula está en la tráquea; y si esto ocurre, retirarla inmediatamente.

Si no hay contratiempo se introduce la sonda hacia el estómago y se deposita el

fármaco.

Cuando el procedimiento se ha desarrollado correctamente, la sonda se desliza

suavemente.

2. Manejo del ratón

El ratón es un animal muy sensitivo, nervioso, y rápido; siempre trata de no ser atrapado
y arremete cuando se siente amenazado. Es capaz de detectar inmediatamente a una
persona extraña manipulándolo. Se recomienda no introducir bruscamente la mano a la
jaula.
Para sacarlo de la jaula se puede introducir la mano y colocar los dedos por debajo de su
cuerpo para que suba la palma de la mano o cogerlo por la cola. Con esta maniobra se
determina el sexo como se hizo con la rata.

Administración de fármaco por vía intraperitoneal, intramuscular y subcutánea.

Se puede llevar a cabo a través de dos procedimientos, en uno de ellos, se deposita al

animal sobre una superficie rugosa, que le sirva para hacer tracción, se toma de la cola,
se aprisiona entre la palma de la mano y de los dedos meñique y anular, y con la misma
mano, se le toma suave pero firmemente de la piel del dorso del cuello, y se le levanta
para proceder, con la otra mano a la inyección intraperitoneal.
El segundo procedimiento requiere de la participación de dos personas y es
relativamente más seguro. En este caso, con una mano se le toma la cola y se jala
suavemente hacia atrás y, con la otra se le toma al animal de la piel del dorso. Se
presenta la cara ventral para la inyección intraperitoneal o se jala una de las
extremidades posteriores para la administración intramuscular en la parte superior y
cara dorsal de la misma.

La inyección subcutánea se efectúa en el dorso del animal.

1.- CUESTIONARIO

1. ¿En qué tipo de estudios se utilizan seres humanos?

2 ¿Qué prácticas éticas deben tenerse en cuenta en los estudios con humanos?

3 ¿Cómo prepararía 500 ml de una solución de NaCl a partir de NaCl Q.P? Qué

vehículo usaría? Por qué?

4 Si tiene una ampolla de gentamicina de 80 mg/ml, cómo prepararía 10 ml de una

solución de gentamicina que contenga 50 mg de gentamicina?

5 Calcular el número de mmoles de gentamicina que hay en una ampolla de

gentamicina de 80 mg/ml.
 El Código de Nuremberg

(Precursor de al DECLARACIÓN DE HELSINKI )

La prueba de crímenes de guerra y de crímenes contra la humanidad

Aplicando cualquier criterio reconocido de evaluación, el juicio muestra que se han
cometido crímenes de guerra y crímenes contra la humanidad tal como se alega en los
puntos dos y tres de la querella. Desde el comienzo de la Segunda Guerra Mundial se
realizaron, en Alemania y en los países ocupados, experimentos médicos criminales en gran
escala sobre ciudadanos no alemanes, tanto prisioneros de guerra como civiles, incluidos
judíos y personas "asociales". Tales experimentos no fueron acciones aisladas o casuales de
médicos o científicos que trabajaran aislados o por su propia responsabilidad, sino que
fueron el resultado de una normativa y planeamiento coordinados al más alto nivel del
gobierno, del ejército y del partido nazi, practicado como parte del esfuerzo de guerra total.
Fueron ordenados, aprobados, permitidos o sancionados por personas que ocupaban cargos
de autoridad, las cuales estaban obligadas, de acuerdo con los principios de la ley, a conocer
esos hechos y a tomar las medidas necesarias para impedirlos y ponerles fin.
Experimentos médicos permisibles Existen pruebas de gran peso que nos muestran que
ciertos tipos de experimentos sobre seres humanos, cuando se mantienen dentro de límites
razonablemente definidos, son conformes con la ética general de la profesión médica.
Quienes practican la experimentación humana justifican su actitud en que esos
experimentos proporcionan resultados que benefician a humanidad y que no pueden
obtenerse por otros métodos o medios de estudio. Todos están de acuerdo, sin embargo, en
que deben observarse ciertos principios básicos a fin de satisfacer los requisitos de la moral,
la ética y el derecho:
1. El consentimiento voluntario del sujeto humano es absolutamente esencial.
Esto quiere decir que la persona afectada deberá tener capacidad legal para consentir;
deberá estar en situación tal que pueda ejercer plena libertad de elección, sin impedimento
alguno de fuerza, fraude, engaño, intimidación, promesa o cualquier otra forma de coacción
o amenaza; y deberá tener información y conocimiento suficientes de los elementos del
correspondiente experimento, de modo que pueda entender lo que decide. Este último
elemento exige que, antes de aceptar una respuesta afirmativa por parte de un sujeto
experimental, el investigador tiene que haberle dado a conocer la naturaleza, duración y
propósito del experimento; los métodos y medios conforme a los que se llevará a cabo; los
inconvenientes y riesgos que razonablemente pueden esperarse; y los efectos que para su
salud o personalidad podrían derivarse de su participación en el experimento. El deber y la
responsabilidad de evaluar la calidad del consentimiento corren de la cuenta de todos y cada
uno de los individuos que inician o dirigen el experimento o que colaboran en él. es un
deber y una responsabilidad personal que no puede ser impunemente delegado en otro.
2. El experimento debería ser tal que prometiera dar resultados beneficiosos para el
bienestar de la sociedad, y que no pudieran ser obtenidos por otros medios de estudio. No
podrán ser de naturaleza caprichosa o innecesaria.
3. El experimento deberá diseñarse y basarse sobre los datos de la experimentación animal
previa y sobre el conocimiento de la historia natural de la enfermedad y de otros problemas
en estudio que puedan prometer resultados que justifiquen la realización del experimento.
4. El experimento deberá llevarse a cabo de modo que evite todo sufrimiento o daño físico o
mental innecesario.
5. No se podrán realizar experimentos de los que haya razones a priori para creer que
puedan producir la muerte o daños incapacitantes graves; excepto, quizás, en aquellos
experimentos en los que los mismos experimentadores sirvan como sujetos.
6. El grado de riesgo que se corre nunca podrá exceder el determinado por la importancia
humanitaria del problema que el experimento pretende resolver.
7. Deben tomarse las medidas apropiadas y se proporcionaran los dispositivos adecuados
para proteger al sujeto de las posibilidades, aun de las más remotas, de lesión, incapacidad o
muerte.
8. Los experimentos deberían ser realizados sólo por personas cualificadas científicamente.
Deberá exigirse de los que dirigen o participan en el experimento el grado más alto de
competencia y solicitud a lo largo de todas sus fases.
9. En el curso del experimento el sujeto será libre de hacer terminar el experimento, si
considera que ha llegado a un estado físico o mental en que le parece imposible continuar
en él.
10. En el curso del experimento el científico responsable debe estar dispuesto a ponerle fin
en cualquier momento, si tiene razones para creer, en el ejercicio de su buena fe, de su
habilidad comprobada y de su juicio clínico, que la continuación del experimento puede
probablemente dar por resultado la lesión, la incapacidad o la muerte del sujeto
experimental.