Tesis de Cedrela Odorata Angi Jusce
Tesis de Cedrela Odorata Angi Jusce
Tesis de Cedrela Odorata Angi Jusce
TESIS
INGENIERO AGRÓNOMO
TARAPOTO .. PERÚ
2014
UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN MARTÍN - TARAPOTO
TESIS
, ,
PROPAGACION in vitro DE CEDRO (Cedrela odorata L.) VIA
ORGANOGÉNESIS
INGENIERO AGRÓNOMO
TARAPOTO- PERÚ
2014
UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN MARTfN - TARAPOTO
FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS
DEPARTAMENTO ACADÉMICO AGROSILVO PASTORIL
ESCUELA ACADÉMICO - PROFESIONAL DE AGRONOMiA
TESIS
PROPAGACIÓN in vitro DE CEDRO (Cedrela odorata L.) VÍA
ORGANOGÉNESIS
COMITE DE TESIS
DEDICATORIA
AGRADECIMIENTO
l. INTRODUCCIÓN 01
11. OBJETIVOS 03
111. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 04
3.2.1.1. Generalidades 11
Auxlna 14
Citoquinina 14
Interacción auxina-citoquinina 15
3.2.2. Técnicas de cultivo in vltro 16
3.2.2.1. Organogénesis 16
3.2.2.1.1. Generalidades 16
Explante 17
Asepsia 18
Medios de Cultivo 18
4.4.2. Desinfección 26
Medio de cultivo 29
Material vegetal 31
Altura de Planta 34
Número de Nudos 35
Número de Hojas 36
Número de Rafz 37
Longitud de Rafz 38
V. RESULTADOS 39
VI. DISCUSIONES 50
VII. CONCLUSIONES 67
VIII. RECOMENDACIONES 69
IX. BIBLIOGRAFfA 70
X. RESUMEN 75
XI. SUMARY 77
ANEXOS
INDICE DE FIGURAS
Figura Nº 03 Desinfección 27
por regiones.
Cuadro N11 ·01 Prueba de Ouncan Factor A (BAP), para número de nudos 42
Especialmente a:
Benilda Ramírez Ramírez, por ser mi recuerdo de ternura y felicidad, y
A mi bella Amazonía por darme la motivación de soñar.
A mis hermanos:
Rosalinn, Hugo Alberto y Hugo Hernán.
AGRADECIMIENTO
Gracias a todos.
l. INTRODUCCIÓN
considerada como una de las más valiosas del mundo dentro de la 1ndustria
genéticamente valiosos.
1
Del mismo modo Reynel, (1988) afirmó que poblaciones de cedro y otras
vez más difícil localizar árboles con diámetros de valor comercial (Álvarez,
1999).
2
11. OBJETIVOS .
2.1. General
L.).
2.2. Específicos
condiciones in vitro.
3
111. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
2010), reporta según la fuente de varios autores las siguientes cinco especies:
Cedrela fissilis Vell, conocida como "cedro" y "cedro del bajo"; Cedrela lilloi
sin duda, Cedrela odorata, que tiene una amplia distribución tanto en el
México (26ºN), en las vertientes del Pacífico y del Atlántico, continua por
Brasil participa con el 16%, y la región de Madre de Dios limítrofe con las
4
regiones Pando y Bení de Bolivia y Acre del Brasil participa con el 8% la
de 1O mil ejemplares se tiene una población total de 260 mil ejemplares apta
5
Figura 1. Perú: Mapa de Distribución y Densidad del género Cedrela.
COLOMBIA
ECUADOR
"..
r-'
\
BRASIL
LEYENDA
'í ~
~~
1 0.000 - 0.287 Árboles/ha. 8
ó
1 0.288 - 0.575 Árboles/ha. L
~'"" I
-
,.,
1 1 0.576 - 0.862 Árboles/ha. ~
V
I
~\ ~
6
3.1.2. Clasificación Botánica del Cedro
División : Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsidae
Orden : Sapindales
Familia : Meliáceas
Género : Cedrela
Especie : odorata
Corteza externa
7
Corteza interna
Hojas
2000). "El haz de color verde oscuro y el envés más claro o verde amarillento"
(Urbina, 2000).
Folio/os
corto acuminado, sin pelos. Haz de color verde brillante (Larco, 2000;
Riveros, 1998).
Flores
presentan cinco pétalos pubescentes con color crema verduzco, en las flores
1997).
8
Frutos
1998).
Semillas
prolongan por una expansión membranosa semejante a un ala fina (Fig. 04).
1985).
Raíces
finaliza a los 21 días (Flinta, 1960; CTFS.STRI, 2000). Según Flinta (1960),
9
el poder germinativo es de 60-70. Con respecto a la propagación vegetativa
por estacas Gómez (1974) propagó con mucha dificultad estacas de Cedro y
(Guevara, 1988). Este mismo autor indicó que debido a las dificultades que
etapa de vivero (etapa en el cual descorteza la base del tronco, lo que puede
2009).
3.2.1.1. Generalidades
11
germinación de semilla dependiente de condiciones nutritivas necesarias
población élite.
12
problemas de enraizamiento futuro, correlacionada al rejuvenecimiento del
reguladora "Poliaminas".
13
El efecto de la aplicación exógena de los reguladores de crecimiento sobre el
Auxinas
yemas y hojas jóvenes, y en general en los meristemos. (Taiz & Zeiger 2004).
Merino 1'994).
Citoquininas
14
desarrollo floral, germinación de semillas. también parecen mediar muchos
Interacción auxina-citoquinina
15
3.2.2. Técnicas de cultivo in vitro
activa división.
3.2.2.1. Organogénesis
3.2.2.1.1. Generalidades
organogénesis.
16
la producción de vástagos, ya que la inducción de vástagos ocurre en sitios
realiza el cultivo.
de experimentación.
Explante
como explantes (Flick et al., 1983; Murashige, 1974; Evans et al., 1981); no
17
Asepsia
pero compiten con el explante por los nutrientes del medio de cultivo o bien lo
Medios de cultivo
nivel In Vitro.
18
Nutrientes minerales: Los medios de cultivo deben suministrar los macro y
(ANA, 2,4-D, AIA, IBA) y/o citocininas (BA, BAP, ZEA, 2iP, Thidiazurón). Las
19
3.3. Cultivo in vitro de cedro
20
Estos explantes sobrevivieron en todos los tratamientos de citocinina y el
número máximo de brotes se obtuvo con BAP a 2,2 y 6,5 mM. Estos
la fase posterior del cultivo in vitro (desarrollo), por su difícil manejo y la mayor
al., 2007). Los autores realizaron este trabajo con el objetivo de disminuir la
cultivo.
21
tomaron los brotes jóvenes emitidos por las estaquillas que recibieron
material vegetal.
22
supervivencia de las estaquillas pero si tuvo un efecto estimulador de la
últimos años han sido las forestales, especialmente los maderables por su gran
cuenta con metodologías repetibles y puede ser una herramienta muy valiosa
23
IV. MATERIALES Y METODOS
29' 13,2"; con Longitud oeste de 76° 22' 48,4" y una Altitud de 350 m.s.n.m.
(0,5; 1,00; 2,00 mg/I) y ácido 1-naftalenacetico (0,00; O, 1; 0,25 mg/I). Nueve
24
a. Concentraciones de BAP - Factor (A)
b1 = O, 00 mg/I =0,0 uM
b2 = O, 1 mg/I =0,53uM
ba = O, 25 mg/I = 1,34uM
25
4.4. Obtención de plántulas de Cedrela odorata L. a condiciones de cultivo in
vitro.
3cm
--
Figura 2: Semilla de Cedro
4.4.2. Desinfección
Las semillas sin estructura alar fueron inicialmente lavadas por 1O minutos
3. Enseguida fueron realizados tres enjuagues con agua destilada estéril a fin
26
A
r- - .
l
r
~\
27
4.4.2.1. Germinación de semillas
l "•
"---- -
28
4.4.3. Inducción a la Org~mogénesis Directa - Fase experimental
Medio de cultivo
Constituido por sales macro y micro minerales (Murashige & Skoog, 1962) a
concentración total, suplementado con 10,00 mUL Myo-inositol (10 000 ppm);
0,5 ml/L Piridoxina; O, 1 mUL tiamina; 2,0 mUL glicina; 0,5 mUL ácido
nicotínico; 30,00 g/L c;fe sacarosa; 10,00 g/L de agar ; 2 g/L de carbón
aminopurina (BAP) (0,5; 1,0; 2,0 mg/L) y ácido 1-naftalenacetico (0,00; 0,1;
0,25 mg/L) con sus respectivas combinaciones (cuadro 03); pH 5,65 ± 0.05
figura Nº 05.
de Guerrero (2007).
29
A
. -
r
•.
e .-
-
1
, _.¿;:
Figura Nº OS. A-F: A. Suerosa, Carbón activado y Agaragar; B. Stock y Hormonas preparadas;
C. Inicio de la preparación del medio de cultivo; D. Medio de cultivo listo para su calibración. E.
Medio de cultivo en proceso de calibración. F. Medio de cultivo autoclavandose.
30
Material Vegetal
e D ----
,, ."'
<.l~\.1.
~.·~,)
\
E
\ · - - -- -- --- -
1
--~
Figura Nº 06. A-F: A. Proceso de destapado de frascos con plántulas de Cedro; B. Plántulas
procedentes de semillas; C. Extracción de las plántulas de Cedro; O. Plántulas en agua destilada
estéril. E. Proceso de corte para la extracción del explante. F. Explantes de segmentos nodales.
31
Establecimiento de explantes a condiciones in vitro
inoculación de tres (03) explantes por frasco, considerando que cada frasco
promedio de los tres explantes fue considerado a futuro como un dato para
externa.
Figura Nº 07. A-0: A. Proceso de siembra; B. Proceso de siembra; C. Sellando los frascos
para asegurar su esterilidad; D. Explantes sembrados.
32
Incubación de Explantes
Figura Nº 08. A-B: A. Incubación de Explantes; B. Frascos con los Explantes ubicados por
tratamientos.
33
4.5. Variables evaluadas
iJ3. .
~·
-
Figura Nº 09. A·D: Evaluando Altura de Plántulas a los 35 días. Plántulas de diferentes
tamaños.
34
• Número de Nudos: Fueron realizados conteos de nudos presentes en
cada planta, como se muestra en la figura Nº 10.
113
;\
,f'
Figura Nº 10. A-0. Evaluando número de nudos a los 35 días. Plántulas de diferente
número de nudos.
35
• Número de Hojas: De igual manera fue realizado el conteo de hojas
compuestas (Figura Nº 11 ).
º .... ,,:,··
,~·
.. .,.·r--·
.';I
e l D
Figura Nº 11. A·D: A. Evaluando número de hojas a los 35 días. B. Hoja compuesta de siete (7)
foliolos. C. Plántula con cuatro (4) hojas compuestas. O. Plántula con estructura diferente. Ocho
(8) hojas compuestas.
36
• Número de Raíz: Fue realizado el conteo de raíces por cada planta en
los diferentes tratamientos puestos en estudio (Figura Nº 12) .
• í·
1
¡~''/
--'···/-·.:
__ ..r··
! ......
/.
'
r--
.' :,·~'~., i. ;>. :
Figura Nº 12. A-F: A. Evaluando número de raíz a los 35 días. 8-D. Conteo de raíces. E.
Formación de callo en la parte radicular. F. Sistema radicular.
37
• Longitud de Raíz: Las mediciones fueron efectuadas mediante el
estiramiento de raíces sobre papel milimetrado, como se observa en la
figura Nº 13.
; . \~\~.
'•···.
·1
(
\
-----··--·----------·----w----·· ---~-·----·
Figura Nº 13. A-C: A. Evaluando longitud de raíz a los 35 días. 8-C. Midiendo longitud de raíces
con ayuda del papel milimetrado.
38
V. RESULTADOS
80,00 76,00
--
70,00 66,66 66,66
~
o
-
ñi
:J
e
CD
...
CJ
o
60,00
50,00
c. 40,00
"C
ns
3! 30,00
e
::>
20,00
10,00
0,00
Tl-10 min Tl-15 min
Tratamientos
39
5.2. Altura de Planta
Cuadro 4: Prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor A:
BAP, respecto a la altura de la planta evaluado a los 35 días de haberse
establecido el experimento.
Cuadro 5: Prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor B:
ANA, respecto a la altura de la planta evaluada a los 35 días de haberse
establecido el experimento.
40
Concentraciones
de ANA
-b1
-b2
-b3
4.5
Ie 4.o
~
3.5
3.0
a1 a2 a3
Concentraciones de BAP
Concentraciones
deBAP
-a1
-a2
-a3
b1 b2 b3
Concentraciones de ANA
Gráfico 3: Efecto de la interacción del factor A (BAP) dentro de los promedios de los
niveles del factor B (ANA) respecto a la altura de planta evaluado a los 35
días de haberse establecido el experimento.
41
5.3. Número de Nudos
Cuadro 7: Prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor A:
BAP, respecto al número de nudos evaluado a los 35 días de haberse
establecido el experimento.
Cuadro 8: Prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor B:
ANA, respecto al número de nudos evaluado a los 35 días de haberse
establecido el experimento.
42
1.8
Concentraciones
de ANA
-b1
-b2
1.75 -b3
~ 1.7
~
e
CD
'1:1
z 1.65
1.
1.55
a1 a2 a3
Concentraciones de BAP
Gráfico 4: Efecto de la interacción del factor B (ANA) dentro de los promedios de los
niveles del factor A (BAP) respecto al número de nudos evaluado a los 35
días de haberse establecido el experimento.
1.
::;oncentraciones de
BAP
-a1
1.75 l!!!lm a2
-a3
~ 1.7
'1:1
::s
e
zo 1.65
1.
1.55
b1 b2 b3
Concentraciones de ANA
Gráfico 5: Efecto de la interacción del factor A (BAP) dentro de los promedios de los
niveles del factor B (ANA) respecto al número de nudos evaluado a los 35
días de haberse establecido el experimento.
43
5.4. Número de Hojas
Cuadro 9: Análisis de varianza para el número de hojas (datos transformados
por ..Jx) evaluado a los 35 dias de haberse establecido el experimento.
F.V. G.L se CM F P~lor
Factor A (BAP) 2 0,068 0,034 26.781 0.000 **
Factor B {ANA) 2 0,082 0.041 32.398 0.000 ...
lnter. Factor A*Factor B 4 0.292 0;073 57.551 0.000**
Error 36 0,046 0,001
Total
44 0.488
n.s = no significativo, *=significativo, **:: Altamente significativo
R2=90.6% C. V.=S.49% X=l.82%
Cuadro 10: Prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor A:
BAP, respecto al número de hojas evaluado a los 35 días de haberse
establecido el experimento.
Cuadro 11: Prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor B:
ANA, respecto al número de hojas evaluado a los 35 días de haberse
establecido el experimento.
44
Concentracton
ea de ANA
-b1
-b2
-b3
i.e
-3 1.8
o
z:
1.
a1 a2 a3
Concentraciones de BAP
Gráfico 6: Efecto de la interacción del factor A (BAP) dentro de los promedios de los
niveles del factor B (ANA) respecto al número de hojas a los 35 días de
haberse establecido el experimento
COncentractonéa do
2.
1.95
-.1
BAP
-.2
-•3
1.
t
.g 1.85
b1 b2 b3
Concentraciones de ANA
Gráfico 7: Efecto de la interacción del factor B (ANA) dentro de los promedios de los
niveles del factor A (BAP) respecto al número de hojas a los 35 dias de
haberse establecido el experimento.
45
5.5. Número de Raíces
Cuadro 12: Análisis de varianza para número de raíces (datos transformados
por ....Jx) evaluado a los 35 dfas de haberse establecido el experimento.
[. F.V. G.L SC CM F p ..yalof
1
Cuadro 13: Prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor A:
BAP, respecto al número de rafees evaluado a los 35 días de haberse
establecido el experimento.
[ ConcentnlclonM
Pffcrlpclón
Ouna1n (Cl o~05) ~
deBAP
l .1 a b e
A3 2.00 mg/L = 8.87 µm 5.16
A2 =
1.00 mg/L 4.43 µm 5.72
A1 =
0.5 mg/L 2.21 µm 6.37
Cuadro 14: Prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor B:
ANA, respecto al número de rafees evaluado a los 35 dias de haberse
establecido el experimento.
Duncan (a O.OS)
Deacrtpct6n
a b
82 0.1 mg/L = 0.53 µm 5.39
83 =
0.25 mg/L 1.34 µm 5.45
81 0.00 mg/L :: 0.00 µp 6.41
46
Concen.,-aclonea de
ANA
-b1
-b2
-b3
•z 2.4
a1 a2 83
Concentraciones de BAP
Gráfico 8: Efecto de la interacción del factor A (BAP) dentro de los promedios de Jos
niveles del factor B (ANA) respecto al número de ralees a los 35 dfas de
haberse establecido el experimento.
Concentraclonee de
SAP
-.2
-a1
-•3
¡ 2.e
1!
.g
2.
2.
b1 b2 b3
Concentraciones de /JIHA
Gráfico 9: Efecto de la interacción del factor B (ANA) dentro de los promedios de los
niveles del factor A (BAP) respecto al número de rafees a los 35 dias de
haberse establecido el experimento.
47
5.6. Longitud de Raíz
Cuadro 15: Análisis de varianza para longitud de raiz (datos transformados
por vx) evaluado a los 35 dias de haberse establee.ido el experimento.
F.V. G.L se CM F P..valor
Factor A (BAP) 2 19.098 9.549 21.128 0.000 ...
Factor B (ANA} 2 31.190 15.595 34.505 0,000""
lnter. Factor A"Factor B 4 16.412 4.103 9.078 0.000"
Error 36 16.271 0,452
Total 44 82.971
n.s = no significativo, '* = significativo, *"= Altamente significativo
R2=80.4% C. V.=7.52% X=l.94%
Cuadro 16: Prueba de Ouncan para los promedios de tos niveles del factor A:
BAP, respecto a fa longitud de ralz evaluado a tos 35 días de haberse
establecido el experimento.
Cuadro 17: Prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor B:
ANA, respecto a la longitud de raiz evaluado a los 35 dias de haberse
establecido el experimento.
Duncan (a 0~05)
a b
81 0.00 mg/L =0.00 µm 8.34
B3 0.25 mg/L =1.34 µm 8.36
82 0.1 mg/L = 0.53 µm 10.11
48
Concentraciones
-.1
deBAP
-.a
-a2
b1 b;? b3
Concentraciones de ./llHA
Gráfico 10: Efecto de la interacción del factor A (BAP) dentro de los promedios de
los niveles del factor B (ANA} respecto a la longitud de raíz.
Concentraclonea de
ANA
-b1
-b2
-b3
a1 a2 a3
Concentraciones de BAP
Gráfico 11: Efecto de la interacción del factor B (ANA) dentro de los promedios de
los niveles del factor A (BAP) respecto a la longitud de raíz.
49
VI. DISCUSIONES
acción blanqueadora.
50
donde se empleen pequelias concentraciones hormonales, el mismo que
germinación in vitro de las semillas de cedro, tal como fue observado por
pero que representa un factor limitante para los trabajos in vitro (Castro,
2001).
51
6.2. Altura de la Planta
tenido los tratamientos estudiados sobre la altura de planta, por otro ladot el
La prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor A: BAP,
decir que a menor concentración de BAP menor fue la altura alcanzada por
fos tratamientos, tanto asi que el Nivel A 1 {0.5 mg/I = 2,21 uM) con la menor
4.34cm.
La prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor B. ANA,
52
promedios de los niveles det Factor 8: ANA, siendo que los promedios
variaron desde 4.01 cm, 4.13 cm y 4.16 cm para 83 (O, 25 mg/I =1,34uM), 81
(O, 00 mg/I = o.o uM ) y82 (O, 1 mg/I =0,53uM ) respectivamente.
los niveles del factor A (BAP) respecto a la altura de planta evaluado a los 35
los niveles del factor B (ANA) respecto a la altura de planta evaluado a los 35
53
Pequenos mensajeros químicos responsables por la organización, formación
(Zhang, 1996).
54
proporciones 1:6, 1:8 (T5,T9), estas relaciones de balance hormonal en el
desarrollo de plantas fueron reportados por (Skoog & Mlller, 1965), donde
fase posterior del cultivo in vitro por su difícil manejo y mayor susceptibilidad a
55
bencil amino purina x ANA, siendo que la signifteancia estadística para la
poco el efecto que han tenido los tratamientos estudiados sobre el número de
La prueba de Ouncan para los promedios de los niveles del factor A: BAP,
de los niveles A1 (0.5 mg/I =2,21 uM) y A3 (2.00 mg/1=8,87 uM) quienes
obtuvieron promedios de 2. 71 nudos y 2.69 nudos respectivamente
La prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor B. ANA,
y 81 (0,00 mg/I =0,0 uM) con promedios de 2.84 y 2.82 nudos resultaron ser
estadisticamente iguales entre si pero estadlsticamente superiores al
promedio del nivel 83 (0,25 mg/I == 1,34uM) quien obtuvo un valor promedio
de 2.63 nudos.
los niveles del factor A (BAP) respecto al número de nudos evaluado a los 35
56
dias de haberse establecido el experimento, se observan en el gráfico 4.
(1.00 mg/I =4,43 uM). decreciendo fuertemente cuando se les combinó con el
los niveles del factor B (ANA) respecto al número de nudos evaluado a los 35
número de nudos cuando este se combinó con el nivel 82 (A 182). Por otro
inserción (hoja/tallo) providencian estas yemas que, pueden estar sobre una
57
sintesis y transporte de auxinas, citoquininas, giberelinas, etc. Para efecto de
Observando (gráfico 04) que el tratamiento T4, el mismo que contiene 4,43
determinación (R2) con 90% explica altamente el efecto que han tenido los
(Calzada, 1982).
La prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor A: BAP,
experimento (cuadro 10) ha determinado que el nivel A2 (1.00 mgll =4.43 uM)
con un promedio de 3.46 hojas superó estadisticamente a los promedios de
58
tos niveles A1 (0.5 mg/I =2,21 uM) y A3 (2.00 mg/I =8,87 uM) quienes
obtuvieron promedios de 3.32 hojas y 3.12 hojas respectivamente.
La prueba de Ouncan para los promedios de los niveles del factor B: ANA,
0,0 uM} y 83 (0, 25 mg/I = 1,34uM) quienes arrojaron promedios de 3.30 hojas
los niveles del factor A (BAP) respecto al número de hojas evaluado a los 35
(1.00 mg/I = 4,43 uM), decreciendo fuertemente cuando se les combinó con el
los niveles del factor B (ANA) respecto al número de hojas evaluado a los 35
59
incremento del número de hojas cuando estos se combinaron con el nivel A2
(1.00 mg/I =4,43 uM), decreciendo fuertemente cuando se les combinó con el
nivel A3 (2.00 mg/I = 8¡87 uM), contrariamente a lo ocurrido con el nivel 83 (O,
25 mg/I =1,34uM) quien obtuvo un mayor número de hojas cuando se
de bajas dosis de BAP. Solls et al., (2010) indican que para la proliferación
60
significancia estadfstica para la interacción BAP x ANA anula literalmente la
determinación (R2) con 90.6 o/o explica altamente el efecto que han tenido los
puesto que este valor se encuentra dentro de limites aceptados para este tipo
La prueba de Ouncan para los promedios de los niveles del factor A: BAP,
rafees, donde el nivel A 1 (0.5 mgn = 2,21 uM ) arrojó el mayor promedio con
6.37 raíces seguido de los niveles A2. (1.00 mg/I = 4,43 uM) y A3 (2.00 mg/I =
respectivamente.
La prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor B: ANA,
61
Los efectos de la interacción del factor B (ANA) dentro de los promedios de
los niveles del factor A (BAP) respecto al número de rafees evaluado a los 35
Donde se aprecia que el nivel 81 (0,00 mg/I = 0,0 uM) en combinación con el
nivel A3 (2.00 mg/I = 8,87 uM) (tratamiento B1A3) alcanzó el mayor promedio
los niveles del factor B (ANA) respecto al número de raíces evaluado a los 35
el nivel 81 (O, 00 mg/I = 0,0 uM) (tratamientos A281 y A3B1) alcanzaron sus
número de rafees.
Durante el cultivo in vitro las plantas crecen bajo un ambienté con alta
62
de las plantas, que las hacen diferir de las que crecen en invernaderos o en el
ralees.
con 80.4 % explica altamente el efecto que han tenido los tratamientos
(C.V.) ron 7.52% determina una variación ligeramente elevada debido a que
63
La prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor A: BAP,
promedios de tratamientos, siendo que el Nivel A 1 (0.5 mg/I = 2,21 uM) con
un promedio de 9. 79 cm de longitud de rafz superó estadfsticamente a los
niveles A3 (2.00 mg/l = 8,87 uM) y A2 (1.00 mg/I =4,43 uM) quienes
La prueba de Duncan para los promedios de los niveles del factor B: ANA,
respecto a la longitud de raiz evaluado a los 35 dfas de haberse establecido
niveles .83 (0,25 mg/I =0,0 uM) y 81 (O,O mgn =1,34uM) quienes arrojaron
promedios de 8.36 cm y 8.34 cm de longitud de raiz respectivamente.
los niveles del factor 8 (ANA) respecto a la longitud de rafz evaluado a los 35
promedios de longitud de rafz, con 10.55 cm, 10.43 cm y 9,36 cm para los
64
Los efectos de la interacción del factor B (ANA) dentro de los promedios de·
los niveles del factor A (BAP) respecto a la longitud de raíz evaluado a los 35
bajando fuertemente· cuando se les combino con 1.00 mg/I (4:,43 uM) de BAP.
Por otro lado, el nivel 83 alcanzó sus máximos promedios de longitud de-
raiz cuando estos se combinaron con A1 (0;5 mg/I = 2,21 uM) y A2 (1.00 mg/I
soporte de- las raíces para un mejor desarrollo en el sustrato estéril. Si bien las .
65
extracelular (apoplasto). promoviendo así la extensión de la pared mediado
Por otro lado interacciones constatados por los tratamientos (TS y T2), donde
66
VII. CONCLUSIONES
continuado por una desinfección por inmersión sobre alcohol etilico 70% por
por planta.
nodates en .cedro_
67
7.6. Se logró establecer una metodologia base para la obtención de plántulas de
cedro in vitro a través de segmentos nodales.
68
VIH. RECOMENDACIONES
69
IX. BIBLIOGRAFÍA
Albert, PO; López, AA; Rodriguez, TM; Duarte, RM. 1995. Recursos
füogenéticos forestales, 1. Famttia Meliaceae. Fontqueria 42:32g..351.
321-326.
70
Daquinta, M, M Cid, Y Lezcano, D Pina, R Rodríguez y M Escalona (2003)
Callogénesis en Meliáceas exóticas (Khayanyasica Stapf. y Toona
ciliata). Biotecnología Vegetal 3(2):123-125.
elongation growth: historical and new aspects. J Plant Res 116: 483-
505.
71
Mejia, R. 1994. Propagación comercial 312 especies de plantas por cultivo in
Moloney MM, Elliott MC, Cleland RE (1981) Acid growth effects in maize
Murashige T & Skoog F. 1962. A revlsed medium for rapid growth and
bioassays with tobacco tissue cultures. Physiol Plant 15:473497.
72
Rayle DL, Cleland R (1970). Enhancement of watt loosening and elongation
by acid solutions. Plant Physiol 46: 250-253.
York, NY.
73
Villegas Leopotdo. Corporación Andina de Fomento. Caracas.
Venezuela. pp 91-107
Zhang K, Letham OS, John PCL (1996) Cytokinin controfs the cell cycle at
74
X. RESUMEN
riesgo hábitats o Jugares de origen. El Cedro (Cedrela odorata L.), una de las
especies explotadas, paso a ser considerada desde 1981 como una especie
0,53 y 1,43 µM) y BAP (2,21; 4,43 y 8,87 JJM) sobre segmentos nodales de
75
esencial de 6~bencil amino purina (BAP) sobre et crecimiento y desarrollo de
76
XI. SUMARY
L.), one of the target species, carne to be considered since 1981 as a priority
aspects genetics and physiological. Basad about thls efforts and focusing in
0.53 and 1.43 µM) and BAP (2.21, 4.43 and 8.87 µM) on nodal segments from
µM) increase the longitudinal growth of roots and increased number of leaves;
growth and formation root; the increase in the number of leaves in duplicate
concentration (4.43 µM). Moreover, ANA concentrations (0.53 µM) and BAP
development of root and stem; being that, the absence of ANA and BAP
duplication (4.33 µM) acts positively on the number of nodes and leaves. Exist
77
ANEXOS
ANEX001
METODOLOG(A BASE PARA LA OBTENCIÓN DE PLÁNTULAS DE CEDRO EN CONDICIONES DE CULTIVO
In vitro:
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ANEX003
FOTOGRAFIAS DE PLANTAS OBTENIDAS CON EL TRATAMIENTO 02:
a1b2 (0.5 mgll BAP + 0.1 mg/l ANA bajo 35 días de inducción)
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ANEX004
FOTOGRAFIAS DE PLANTAS OBTENIDAS CON EL TRATAMIENTO 03:
a1b3 (0.5 mg/I BAP + 0.25 mgll ANA, bajo 35 dras de inducción)
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ANEXO OS
FOTOGRAFIAS DE PLANTAS OBTENIDAS CON EL TRATAMIENTO 04:
a2b1 (1.0 mg/I BAP +O.O mgll ANA. bajo 35 días de inducción)
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ANEX006
FOTOGRAFIAS DE PLANTAS OBTENIDAS CON EL TRATAMIENTO 05:
a2b2 (1.0 mg/t BAP -t 0.1 mg/t ANA. bajo 35 días de inducción)
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ANEXOOB
FOTOGRAFiAS DE PLANTAS OBTENIDAS CON EL TRATAMIENTO 07:
a3b1 (2.0 mg/I BAP + o.o m 1ANA. bajo 35 días de inducción)
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ANEX010
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