Ii Practica Micro

ASIGNATURA : MICROBIOLOGÍA MÉDICA I
CICLO : IV
SEMESTRE ACADEMICO : 2024-I
DOCENTE: MG. Blgo. EDGAR VALENCIA ROJAS
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA
PROFESIONAL DE MEDICINAHUMANA
“Dr. Wilfredo Erwin Gardini Tuesta”
ACREDITADA POR SINEACE

RE ACREDITADA INTERNACIONALMENTE POR RIEV
SEMANA 02
➢ Practica Nº6: Medios de cultivos (simples, enriquecidos,
selectivos y diferenciales)
➢ Practica Nº7: Siembra bacteriana Medios de aislamiento
➢ Practica Nº8: Metabolismo bacteriano
➢ Practica Nº9: Pruebas de sensibilidad a los Antibióticos
(Antibiograma)
PRACTICA N° 6
MEDIOS DE CULTIVO
SIMPLES, ENRIQUECIDOS, SELECTIVOS Y
DIFERENCIALES.
MEDIOS DE CULTIVO
Para el aislamiento de bacterias de un muestra patológica, es
necesario su cultivo en medios preparados con una determinada
concentración de iones de hidrógeno, sales, compuestos
nitrogenados, hidratos de carbono, humedad y temperatura.
Según su utilización pueden ser: simples, enriquecidos, selectivos y
diferenciales.
TIPOS DE MEDIO
DE CULTIVO
DE ACUERDO A SEGÚN SU
SU CONSISTENCIA UTILIZACION
LIQUIDOS SIMPLES
SEMISOLIDOS ENRIQUECIDOS
SELECTIVOS
SOLIDOS Agar DIFERENCIALES
Caldo selenito nutritivo
Medio Agar
sangre/agar Manitol salado/mac Tsi/Lia/Citrato/Sim
Medio SIM Sabourau/Mue
chocolate conkey
ller hinton
PRACTICA N° 7
SIEMBRA BACTERIANA. MEDIOS DE

AISLAMIENTO.
• Cuando las bacterias se siembran en un medio de
cultivo y en condiciones adecuadas, ocurre un
incremento marcado del número de células.
• Algunas especies alcanzan una población máxima a las
24 horas y otras necesitan un período más prolongado
para alcanzar su máximo desarrollo.
• Los microorganismos que se desarrollan en medios de
cultivo en el laboratorio, se denominan cultivos y el
resultado de la multiplicación bacteriana colonia,
• El procedimiento por el cual se pone en contacto un
microorganismo con un medio de cultivo, se llama
siembra.
estría
dispersión
TIPOS DE agotamiento
SIEMBRA
inoculación
puntura
SEGURIDAD Y MATERIALES PARA SIEMBRA
EN EL LABORATORIO
Cabina de bioseguridad Cepa y tipos de asas bacteriológicas
TIPOS DE SIEMBRA
ESTRIA Y
ESTRIA AGOTAMIENTO INOCULACION PUNTURA/PUNTURA Y ESTRIA
• Las principales características morfológicas que presentan las
colonias son:
• FORMA : Circular, elíptica, puntiforme y filamentosa.

• ELEVACIÓN : Plana, convexa, acuminada, umbilicada.
• BORDE : Entera, ondulada, dentada y filamentoso.
• SUPERFICIE : Lisa, rugosa, granulada.
• TAMAÑO : Diámetro en milímetros.
• CONSISTENCIA : Cremosa, membranosa y mucoide.
• CROMOGENESIS : Pigmentación verde, amarilla, roja, etc.
IDENTIFICACION DE TIPOS DE COLONIAS
PRACTICA N° 8
METABOLISMO
BACTERIANO
• La identificación bacteriana inicial puede realizarse mediante la
determinación de las características de las colonias y
morfología con tinción de Gram u otras coloraciones.
• Sin embargo, el reconocimiento final de un aislamiento
bacteriano desconocido, para identificarlo a nivel de género y
especie se lleva a cabo estudiando ciertos sistemas
enzimáticos que son únicos para cada especie y sirvan como
marcadores de identificación.
Dif. morfológica Dif. Gram Dif. Enzimática

I. -ACCION SOBRE LOS CARBOHIDRATOS
A.- REACCIONES DE OXIDACION- FERMENTACION DE AZUCARES
. Medio: TSI Agar hierro triple azúcar (Agar hierro de Klingler)
Posibles resultados
• Indicador de pH: Rojo de fenol
• medio es de color rojo ladrillo
• Consistencia: Solido en pico de flauta
• Sustrato : lactosa , sacarosa y glucosa
• Resultados:
• 1.- K/A (fermentación de glucosa solamente)
• 2.- A/A (fermentación de glucosa y lactosa)
• 3.- K/K (no fermentación de glucosa y lactosa)
B.-PRODUCCION DE ACIDOS Y ACETIL- METIL- CARBINOL (Acetoina)
1.- PRUEBA DEL ROJO DE METILO ( RM )
• Medio: Medio de Clark y Lubs (caldo

RM/VP)
• Indicador de pH: Rojo de metilo
• Consistencia: Liquido
• Resultados:
• Positivo Rojo en la superficie (pH 4.4)
• Negativo Amarillo (pH 6)
2.- PRUEBA DE VOGUES PROSKAUER ( VP )
• Medio: Medio de Clark y Lubs (caldo RM/VP)

• Indicador de pH: Reactivo de Barret (KOH al 40% +
Alfa Naftol al 5%)
• Consistencia: Liquido
• Lectura: alfa naftol 12 gotas y 4 de KOH
• Resultados:
• Positivo: Rojo en la superficie (presencia de acetoina)
• Negativo : Amarillo
• Cepas bacterianas E. coli y Klebsiella
II.- ACCION SOBRE LAS PROTEINAS
. PRUEBA DE PRODUCCION DE INDOL
• Medio: Medio SIM
• Indicador de pH: Reactivo de Kovacs (alcohol
amílico + HCL + p- dimetil amino benzaldehído)
• Consistencia: Semisólido en forma vertical
• Reactivo: reactivo de kovacs
• Resultados:
• Positivo : Anillo rojo en la superficie Negativo :
anillo amarillo , No color
• Negativo Color naranja indica desarrollo de
escatol que es un precursor de la formación del
indol.
• Cepas bacterianas E. coli, Salmonella
III.- UTILIZACION DEL CITRATO COMO
UNICA FUENTE DE CARBONO
PRUEBA : AGAR CITRATO DE SIMMONS
• Color : verde
• Medio: Citrato de Simmons
• Sustrato : citrato de sodio
• Indicador de pH: Azul de bromotimol
• Consistencia: Medio Solido inclinado (pico de
flauta)
• Fundamento: el microrganismo es capaz de utilizar
como única fuente de carbono al citrato de sodio y
como fuente de nitrógeno al fosfato de amonio.
• Resultados:
• Positivo : color azul
• Negativo : color verde
IV.- HIDROLISIS DE LA UREA
PRUEBA : DE LA UREASA
• Indicador de pH: Rojo de fenol

• Medio: agar urea de christensen
• Color : rosado
• Sustrato : urea
• Fundamento: Capacidad del organismo para
desdoblar o hidroliza la urea en dos
moléculas de amoniaco por medio de la
enzima ureasa
• Resultados:
• Positivo : Rojo rosado en pico de flauta
• Negativo : Amarillo
Agar Lisina Hierro (LIA)
• Medio: Base de descarboxilasa de Moller
• Color : lila
• Indicador : Púrpura de bromocresol
• Sustrato : lisina y glucosa
• Resultados:
• 1.- K/K = Descarboxilación Positiva de la
lisina (todo purpura o violeta)
K/K K/A
• 2.- K/A = Descarboxilación Negativo pico
violeta fondo amarillo
• 3.- R/A = Desaminación pico Rojizo/
fondo Amarillo)
1.- Lisina descarboxilasa + 2.- Lisina descarboxilasa --
Ej.: Escherichia coli Ej.: Salmonella Ej.: Shigella
3.- Lisina deaminasa +
LIA N/N -;-

Ej.: Proteus mirabilis
EJ. Pseudomonas
* Este resultado no
es de una
enterobacteria
PRACTICA N” 09
ANTIBIOGRAMA
ANTIBIOGRAMA
El antibiograma, son métodos in vitro que determinan la susceptibilidad de los microorganismos a
una variedad de agentes microbianos, bajo condiciones de laboratorio especificas y
estandarizadas
El primer objetivo del antibiograma es el de medir la sensibilidad de una cepa bacteriana que
se sospecha es la responsable de una infección ; la sensibilidad in vitro es uno de los
requisitos previos para la eficacia in vivo de un tratamiento antibiótico.
El segundo objetivo del antibiograma es el de seguir la evolución de las resistencias
bacterianas
RESISTENCIA BACTERIANA
Cada antibiótico se caracteriza por un espectro natural de actividad antibacteriana. Este
espectro comprende las especies bacterianas que, en su estado natural, sufren una
inhibición de su crecimiento por concentraciones de su antibiótico susceptibles de ser
alcanzadas in vivo.
METODO DE DIFUSION EN AGAR ( SEGÚN
KIRBY – BAUER)
. Es el mas usado, sencillo y practico

. Permite analizar un gran numero de
antibióticos al
mismo tiempo y bajo las mismas condiciones
. Permite entregar un resultado cualitativo :
resistente a
sensible
Preparación de la muestra para antibiograma
Siembra en medio Muller Hillton
Colocando los discos de antibiotico
Resultados después de incubar 24 horas
Medición de los halos
MEDIOS DE CULTIVO SEGÚN SU UTILIZACION
https://www.youtube.com/watch?v=AQc94eN3YCA&ab_channel=ECEN-UNEDCOSTARICA
TIPOS DE SIEMBRA
https://www.youtube.com/watch?v=-TnHCd4sY24&ab_channel=SAVUNISEVILLA
IDENTIFICACION DE TIPOS DE COLONIAS

https://www.youtube.com/watch?v=d0Pn2IaaYkk&ab_channel=DiegodelaCerda
METABOLISMO BACTERIANO
ACCION SOBRE LOS CARBOHIDRATOS: TSI
https://www.youtube.com/watch?v=XTGVzPa84l8&ab_channel=Microbiolog%C3%ADaVeterinariaUSFQ
PRODUCCION DE ACIDOS Y ACETIL – METIL - CARBINOL: RM Y VP

https://www.youtube.com/watch?v=y56voBkSayc&ab_channel=RachelWatson
ACCION SOBRE LAS PROTEINAS: INDOL

https://www.youtube.com/watch?v=Pox0KgESIGs&ab_channel=Microbiolog%C3%ADaVeterinariaUSFQ
UTILIZACION DEL CITRATO COMO UNICA FUENTE DE CARBONO: CS

https://www.youtube.com/watch?v=EUKac9mI-ts&ab_channel=Microbiolog%C3%ADaVeterinariaUSFQ
HIDROLISIS DE LA UREA: PRUEBA DE LA UREASA

https://www.youtube.com/watch?v=a9cwDZu70jc&ab_channel=Microbiolog%C3%ADaVeterinariaUSFQ
PRUEBA DE LA CATASA
https://www.youtube.com/watch?v=7MW9Qjrkd3A&ab_channel=VideotutorialesInform%C3%A1ticaEducativa
PRUEBA DE LA CITOCROMO - OXIDASA
https://www.youtube.com/watch?v=aONPcT5OE4U&ab_channel=VideotutorialesInform%C3%A1ticaEducativa
PRUEBA DE LA HEMOLISINA
https://www.youtube.com/watch?v=7NYwO-epRrg&ab_channel=Qu%C3%ADmicaVerap
PRUEBA DE SENSIBILIDAD POR DILUCION

https://www.youtube.com/watch?v=YObbRy0kPww&ab_channel=DiagnosticoVeterinariodeLaboratorio
ANTIBIOGRAMA
https://www.youtube.com/watch?v=i7cj7Hi89X4&ab_channel=YhosselineBanegasTerrazas

Ii Practica Micro

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Ii Practica Micro

Cargado por

Información del documento

Descripción original:

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Ii Practica Micro

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

ASIGNATURA : MICROBIOLOGÍA MÉDICA I

ACREDITADA POR SINEACE

SIEMBRA BACTERIANA. MEDIOS DE

• FORMA : Circular, elíptica, puntiforme y filamentosa.

Dif. morfológica Dif. Gram Dif. Enzimática

• Medio: Medio de Clark y Lubs (caldo

• Medio: Medio de Clark y Lubs (caldo RM/VP)

• Indicador de pH: Rojo de fenol

Ej.: Escherichia coli Ej.: Salmonella Ej.: Shigella

3.- Lisina deaminasa +

LIA N/N -;-

. Es el mas usado, sencillo y practico

IDENTIFICACION DE TIPOS DE COLONIAS

PRODUCCION DE ACIDOS Y ACETIL – METIL - CARBINOL: RM Y VP

ACCION SOBRE LAS PROTEINAS: INDOL

UTILIZACION DEL CITRATO COMO UNICA FUENTE DE CARBONO: CS

HIDROLISIS DE LA UREA: PRUEBA DE LA UREASA

PRUEBA DE SENSIBILIDAD POR DILUCION

También podría gustarte