Medios de Cultivo 2021

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Integrantes:

Medios de  Cordova Siguas, Erick


 Herrera Trillo, Carmen

Cultivo  Lara Sebastian, Bryan


 Ramos rojas, Camila
 Torres Gonzales,
Richard

Docente:
 Mejia Robles, Daniel
Fernando
 De la Cruz Vasquez,
Edgard Romulo
Materiales y Reactivos
necesarios, pero no
suministrados
Estufa de cultivo.

El Medio de Motilidad – Indol – Asa de siembra.


Ornitina (M.I.O.) es un medio Reactivo del Indol (Reactivo
de cultivo ampliamente de Kovacs).
utilizado para la diferenciación
de bacilos Gram negativos
Medio M.I.O. entéricos, sobre la base de la
producción de Indol, la
actividad de la enzima Ornitina
decarboxilasa y la capacidad de
motilidad.
PRECAUCIONES PARA SU USO
ADECUADO:
Conservación

PRECAUCIONES Muestras a cultivar


PARA SU USO
ADECUADO:
Inoculación

Incubación
• Resultado positivo: presencia de
desarrollo microbiano que se observa
como enturbiamiento del medio de
cultivo en todo el tubo, o desplazado
fuera de la picadura de inoculación.
Motilidad • Resultado negativo: el desarrollo
microbiano esta restringido solo en el
trayecto de la picadura de inoculación.

• Resultado positivo: se verifica como

Lectura e
alcalinización del medio de cultivo con
un viraje hacia el púrpura.
• Resultado negativo: se observa
Interpretación Ornitina decarboxilasa: acidificación con viraje hacia el

de Resultados:
amarillo o no se observan cambios
significativos en el pH.

• Resultado positivo: producción de un


compuesto de color rojo fucsia.
Producción de Indol Cualquier indicio de color es
considerado positivo.
• Resultado negativo: ausencia de color
rojo fucsia.
CONTROL DE CALIDAD Eliminación de Desechos:

Control de fertilidad
El usuario es responsable de la adecuada
eliminación de los materiales para diagnóstico
microbiológico estén utilizados o no, para lo que
deberá estar en conocimiento cabal de la
Control de esterilidad normativa local vigente respecto de la disposición
de material infeccioso o potencialmente
infeccioso.
Mac Conkey Agar
Uso
Es un medio de cultivo que se utiliza para
el aislamiento de bacilos Gram negativos.

Fundamento
Existen agentes selectivos que inhiben en
gran parte en el desarrollo de la gram
positiva.
Contenido y composición
Fórmula
Peptona de carne 1,5g
Peptona de gelatina 17.0g
Tripteína 1,5g
Lactosa 10.0g
Mezcla de sales biliares n°3 1.5g
Cloruro de sodio 5.0g
Rojo neutro 0.03g
Cristal violeta 0.001g
Agar 13.5g
Agua purificada 1000mL

La formula puede ser


ajustada o
suplementada.
pH final:7.1 ± 0.2
Instrucciones

Características del producto

Almacenamiento

Procedimiento
Control de calidad
Microrganismos Crecimiento Color Precipitación biliar

Escherichia coli
Satisfactorio Rosado-rojizo +
ATCC 25922

Escherichia coli
Satisfactorio Rosado-rojizo +
ATCC 8739

Klebsiella pneumoniae
Satisfactorio Rosado-rojizo +
ATCC 700603

Salmonella typhimurium
Satisfactorio Incoloro -
ATCC 14028

Shigella flexneri
Satisfactorio Incoloro -
ATCC 12022

Proteus mirabilis
Satisfactorio Incoloro -
ATCC 43071

Enterococcus faecalis
Inhibido … …
ATCC 29212
Precauciones

• Material para uso diagnóstico IN VITRO y control microbiológico.


• Solo para uso profesional. Requiere usuarios con capacitación previa.
• Contiene compuestos de origen animal, la inocuidad no es garantizada.
• Requiere manipulación con precaución relativa a productos potencialmente infecciosos.
• No ingerir el producto, no inhalar el producto
T.S.I. Agar (Triple Sugar Iron Agar)

 Fundamento:
 El examen de carnero y peptona aportan los nutrientes para el
desarrollo bacteriano.
 La lactosa, sacarosa y glucosa son los HC fermentables.
 El rojo de fenol es el indicador de pH.
 Por la fermentación de los azucares, se producen ácidos que se
detectan por el indicador de pH.
Procedimiento

1) Se inocula los tubos de TSI


con punta.
2) Se introduce la punta hasta 3
a 5 mm del fondo del tubo.
3) Luego de retirar el asa del
fondo, se estría el pico con un
movimiento en zigzag, de un
lado al otro.
4) Se incuba a 35 – 37ºC durante
24 horas.
Interpretación

 Se debe considerar los cambios de color en el


pico y el fondo del tubo y las formación de
burbujas.
 Cuando el medio es ácido este se torna de color
amarillos y cuando es alcalino permanece de
color rojo.
Lisina Hierro Agar
USO
Medio de cultivo utilizado para diferenciar microorganismos,
especialmente Salmonella spp., basado en la decarboxilación y
desaminación de la lisina y en la producción de ácido sulfhídrico.

Fundamento
En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura
aportan los nutrientes para el desarrollo bacteriano. La
glucosa es el hidrato de carbono fermentable y la lisina es el
sustrato utilizado para detectar la presencia de las enzimas
decarboxilasa y deaminasa.
Contenido y Composición
PEPTONA DE GELATINA 5.0

EXTRACTO DE LEVADURA 3.0

GLUCOSA 1.0
LISINA 10.0
CITRATO DE HIERRO AMONIO 0.5

TIOSULFATO DE SODIO 0.04

PURPURA DE BROMOCRESOL 0.02

AGAR 15.0

pH FINAL: 6.7 ± 0.2


Instrucciones

Características del producto

Almacenamiento
PROCEDIMIENTO

 Siembra:
A partir de un cultivo puro del microorganismo en
estudio y mediante el uso de aguja de inoculación,
inocular el medio de cultivo, picando el fondo y
extendiendo sobre la superficie del mismo.

Incubación
En aerobiosis, a 33-37 ºC durante 18-24 horas.
Resultado Positivo:
superficie alcalina / profundidad
alcalina (pico violeta / fondo violeta).
Decarboxilación de la lisina:
Resultado negativo:
superficie alcalina/profundidad ácida
(pico violeta / fondo amarillo).

INTERPRETACION Resultado positivo:


superficie rojiza / profundidad ácida.
DE RESULTADOS Desaminación de la lisina: Esto sucede con cepas del género
Proteus, Providencia y algunas de
Morganella spp.

Resultado positivo:
Producción de SH2 Ennegrecimiento del medio de cultivo
Resultado negativo:
el medio de cultivo permanece si
cambio
de color.
CONTROL DE CALIDAD
Solamente para uso diagnóstico in vitro.
No utilizar el producto si al recibirlo su envase
está abierto o dañado.
No utilizar el producto si existen signos de
contaminación o deterioro.
Utilizar guantes y ropa protectora cuando se
PRECAUCIONES manipula el producto.
Las características del producto pueden alterarse
si no se conserva apropiadamente.
Descartar el producto que no ha sido utilizado y
los desechos del mismo.
GRACIAS

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