Resumen Bacillus Thuringiensis
Resumen Bacillus Thuringiensis
Resumen Bacillus Thuringiensis
Ingeniería en biotecnología
Proyecto:
Modelo de producción de la proteína Cry con Bacillus thuringiensis para uso
de plaguicida
Integrantes:
Félix Limón Santiago
Zulikey Lemus Vásquez
Erick Tlecuilt Espinoza
Daniel Pedraza Chávez
Ángel David Aguilar Tepatzi
Introducción
Estas proteínas, que tienen forma de cristales, al ser ingeridas por larvas de insectos, se
solubilizan en el intestino debido al pH alcalino, y así liberan protoxinas que son clivadas por
proteasas, convirtiéndose en toxinas activas. Fisher (2014) informa que tales toxinas actúan
paralizando el tracto digestivo de las larvas y, posteriormente, conducen a la muerte por
inanición y parálisis general de los músculos. El efecto tóxico de las proteínas se inicia
inmediatamente después de la ingestión, entre los síntomas se encuentra la pérdida de
apetito del insecto y el abandono de los alimentos, seguido de parálisis del intestino y
posterior muerte. Las larvas muertas con intoxicación por Bt tienen el característico color
negro de esta infección.
Los medios de cultivo suelen tener una fuente de carbono (glucosa, almidón y dextrosa), una
fuente de nitrógeno (peptona, extracto de caseína) y sales minerales (calcio, manganeso,
zinc y magnesio), que a veces requieren la adición de un antiespumante. La fuente de
carbono, cuya función es suministrar energía, puede provenir de residuos industriales como
melaza de caña de azúcar, o agua de maceración de maíz. La fuente de nitrógeno sirve para
la síntesis de proteínas y ácidos nucleicos, y las sales minerales actúan como cofactores y
regulan el estrés osmótico en la célula. Luego de la selección del medio de cultivo y sus
componentes, se debe colocar en el biorreactor y se debe realizar la verificación y calibración
de los sensores de pH, temperatura, O2 y antiespumante. Una vez ajustados los parámetros,
se debe agregar a la cepa elegida aproximadamente el 2% del volumen del medio a inocular,
siendo necesario mantener los parámetros de control dentro del rango óptimo para el
crecimiento de Bt.
Objetivo General Y Específicos
Objetivos Generales
• Dar a conocer una alternativa a los insecticidas químicos, menos contaminante para
el medio ambiente
• Plantear un proceso de destilación para la producción de Bacillus Thuriengiensis
• Dar a conocer información sobre los insecticidas microbianos
• Cultivar y procesar cepas puras de Bacillus Thuringiensis para la obtención de la toxina
Cry que se encuentra en las esporas
Objetivos Específicos
Metodología
La muestra de suelo será tomada de un jardín, a una profundidad de 20cm por debajo
del suelo, aplicando la NOM-021-SEMARNAT-2000; la muestra puede ser tomada
con ayuda de una pala pequeña, una vez teniendo la muestra será vertida en un
frasco previamente ya esterilizado(La muestra debe de ser tomada un día antes). Se
tomará una muestra de un gramo de suelo en el cual no se encuentrenpesticidas
para así después en el laboratorio se coloque en un tubo Eppendorf de 1.5ml estéril,
se le agrega 1ml de agua destilada. Se le da un choque térmico a 60°C durante 60
minutos, para eliminar hongos y bacterias no formadoras de esporas, es
recomendable estar constantemente checando la temperatura con un termómetro
industrial, posteriormente se preparará un medio de cultivo Luria-Bertani Se debe
colocar en el biorreactor y se debe realizar la verificación y calibración de los
sensores de pH, temperatura, O2 y antiespumante. Una vez ajustados los
parámetros, se debe agregar a la cepa elegida aproximadamente el 2% del volumen
del medio a inocular, siendo necesario mantener los parámetros de control dentro
del rango óptimo para el crecimiento de Bt. El rango de pH del medio de cultivo
para B. thuringiensis. está entre 6,8 y 7,8 y no es recomendable pasar valores por
encima de 8,5, lo que puede conducir a la solubilización de endotoxinas. La
temperatura por mantener debe estar entre 28 y 32°. Otro parámetro que requiere
atención es el oxígeno disuelto, que debe mantenerse en torno al 40% sin llegar a
valores por debajo del 20%, ya que a medida que avanza el proceso de fermentación
aumenta el requerimiento de OD.1 El tiempo de fermentación puede durar entre
24 y 72 horas, dependiendo de las condiciones de cultivo. La fermentación se realiza
en biorreactores de mesón de 1,5 litros a 15 litros, y biorreactores piloto de 25 litros
a más de 10.000 litros, siempre con control y monitoreo de parámetros como
temperatura, pH y aireación. Al final de la fermentación, el caldo fermentado se
somete a una filtración y recuperación de esporas y toxinas en una columna de
micro/ultra filtración, siendo uno de los métodos más utilizados para esta función.
Luego de esta filtración y recuperación de los metabolitos de interés, el producto
se formula con el objetivo de entregar un producto estable durante la aplicación y
almacenamiento, así como proteger a los microorganismos y cristales de
condiciones ambientales adversas.
Conclusión
Los insecticidas a base de Bacillus thuringiensis (Bt) son una alternativa ecológica y sostenible
a los insecticidas químicos tradicionales. Estos insecticidas son eficaces en el control de una
amplia gama de plagas de insectos, y son seguros para el medio ambiente y la salud humana.
La producción de bioinsecticidas a base de Bt en biorreactores tiene una serie de ventajas
sobre los métodos tradicionales, que incluyen:
Los insecticidas a base de Bt son una herramienta eficaz y segura para el control de plagas
de insectos. La producción de bioinsecticidas a base de Bt en biorreactores es una tecnología
prometedora que tiene el potencial de mejorar la sostenibilidad y la eficiencia de la
producción de estos insecticidas.
Bibliografía
• https://tecnal.com.br/es/blog/269_bacillus_thuringiensis_y_su_contribucion_a_una
_agricultura_mas_sostenible - FUENTE CONSULTADA [15-09-2021]