¿Qué Es La Histología ?
¿Qué Es La Histología ?
¿Qué Es La Histología ?
Fuente: https://concepto.de/histologia/#ixzz8ZHoSOqNo
Que estudia
La histología estudia la estructura microscópica de los tejidos, es decir,
agrupaciones complejas de células organizadas para cumplir una función
determinada. El ser humano, por ejemplo, se origina a partir de la fusión de
dos células: un óvulo y un espermatozoide. Ambas células, a su vez, luego se
dividen de manera repetida para formar nuevas células que conforman los
diferentes tejidos, órganos y sistemas del cuerpo humano. Los exámenes
histológicos permiten conocer cómo se organizan, interrelacionan y funcionan
los diversos componentes del organismo.
Técnica histológica
El objeto de estudio de la histología son los tejidos (y las células que los
componen). A fin de estudiarlos y comprenderlos, cuenta con dos poderosas
herramientas que le permiten observar la microestructura celular y tisular: la
microscopía y la técnica histológica.
) FIJACION.
Es un procedimiento cuya finalidad, al aplicarlo es
Detener la vida de las células e impedir las modificaciones
post morten que pueda sufrir la célula (procesos autolíticos),
manteniendo la estructura morfológica de células y tejidos
sin que ocurran cambios notables en ellos.
Esto se consigue inmovilizando (por coagulación o
precipitación) las moléculas proteínicas e inhibiendo
principalmente las enzimáticas haciéndolas insolubles. Esta
acción garantiza la integridad de las células y tejidos; se
efectúa por mediante agentes químicos denominados
fijadores.
Los fijadores se clasifican en dos grandes grupos:
a) Oxidantes: el tetraóxido de osmio (ácido ósmico), el
bicromato de potasio, ácido crómico, bicloruro de mercurio
o “sublimado corrosivo”, ácido pícrico, ácido acético.
b) Reductores: el formaldehído, el glutaraldehído, el
alcohol etílico, el alcohol metílico.
La acción oxidante o reductora de los fijadores le confieren
a las células ciertas condiciones que posibilitan una mejor
aplicación de las sustancias colorantes, por ejemplo: el
alcohol etílico absoluto conserva el glucógeno, el bicloruro
de mercurio provoca que las anilinas coloreen de manera
más brillante a las fibras colágenas, el bicromato de potasio
facilita la coloración de las mitocondrias, el ácido acético
permite una mejor tinción de los núcleos, el cloruro de
calcio conserva e insolubiliza parcialmente a los lípidos.
Los fijadores son:
a) Gaseosos: como el formaldehído
b) líquidos: como el ácido acético, al alcohol etílico, la
acetona, etc.
c) sólidos: como el bicloruro de mercurio, el bicromato
de potasio, etc
E) COLORACION O TINCION.
Los cortes de los tejidos adheridos a los portaobjetos
están listos para ser coloreados.
El procedimiento de coloración o tinción consiste en que
una estructura celular o tisular adquiere específicamente un
color bajo la acción de una sustancia colorante.
Se considera que una estructura se ha coloreado o teñido
cuando al ser lavada con el líquido que disuelve al
colorante, no se decolora.
El proporcionar color a las estructuras que constituyen un
tejido o un órgano se hace con la finalidad de distinguirlas
entre sí y facilitar su observación.
Si se examina al microscopio una sección de tejido sin
colorear, ya adherida al portaobjetos, se podrá constatar que
no es fácil discernir sus componentes, pues lo delgado de los
cortes y la diafanización producida en los tejidos igualan sus
índices de refracción. La coloración proporciona diferencias
evidentes entre las estructuras y al observar los cortes será
fácil reconocerlas.
Se denomina sustancia colorante a aquella que puede
transferir su color a otro cuerpo.
Teoría de la coloración.
Existen dos teorías que explican el procedimiento de la
coloración
a) Teoría física. Considera que la coloración es un
proceso físico de adsorción. Así, las partículas de las
sustancias colorantes disueltas penetran en los
espacios intra e intercelulares en los que se mantienen
adheridas en razón de la cohesión molecular. Por
ejemplo, la coloración de las grasas o lípidos es una
tinción por adsorción; los Sudanes III o IV tiñen las
grasas por la facilidad que tienen para disolverse en
ellas.
MONTAJE.
Concluido el proceso de la tinción de los cortes, éstos
se deben colocar en condiciones de protección y de
poderlos utilizar infinidad de veces sin que se
deterioren. Para alcanzar tales propósitos se recurre al
último procedimiento que es el montaje.
Este procedimiento consiste en colocar encima del corte
coloreado y diafanizado una gota de una sustancia
adherente, diluida, generalmente en xilol (resina natural
como el bálsamo de Canadá o resinas sintéticas, cuyos
índices de refracción son similares a los del vidrio) y encima
de ellos, una laminilla cubreobjetos, cuidando que no
queden burbujas de aire entre la resina.
A continuación se deja que el xilol se evapore, y la resina
adquiera solidez suficiente; para ello las láminas se colocan
en una platina caliente ( 45o 50o C) durante 24 a 48 horas y
estarán listas para ser observadas.
Existen otros procedimientos en la técnica histológica que
permiten la observación de células y tejidos en los cuales no
se utilizan colorantes naturales y/o artificiales. Estos
procedimientos emplean sales de metales pesados, los
cuales se contacto con los componentes celulares y tisulares
y a través, de sustancias reductoras u oxidantes se depositan
en algunas de ellas (precipitación o impregnación). Al
conjunto de procedimientos se les conoce como
impregnaciones metálicas
6. OBSERVACIÓN
El último paso de todo proceso histológico es la observación del resultado
producido por la técnica realizada. El poder de resolución del ojo humano es
de 0,2 mm (poder de resolución: distancia mínima a la que se discriminan dos
puntos), mientras que una célula eucariota típica suele tener unas
dimensiones que oscilan entre 10 y 50 micrómetros (µm; 1 µm = 10-6 mm).
Además, si queremos estudiar la ultraestructura celular hay que tener en
cuenta que el grosor de una membrana celular es de unos 7 nanómetros (nm;
1 nm = 10 -6 µm), mucho más pequeña. Todo ello implica que necesitamos
aparatos que nos permitan aumentar la imagen que obtenemos de las
muestras para discriminar estructuras tisulares diminutas como son las
células o sus compartimentos. Estos aparatos se llaman microscopios.
A los microscopios, sobre todo los ópticos, se les pueden añadir dispositivos
que permiten ampliar su potencialidad. Por ejemplo, al microscopio óptico se
le puede adaptar una fuente luminosa y una serie de filtros para observar
moléculas fluorescentes, o filtros para destacar cambios de densidad en el
tejido, etcétera. A las diferentes formas de utilizar los microscopios para la
observación de características de los tejidos se les llama microscopía. Así
podemos hablar de microscopía óptica de contraste de fase, de
fluorescencia, electrónica, etcétera.
postfijación posterior en tetróxido de osmio. Con ello nos aseguramos una fuerte
fijación para preservar la ultraestructura celular y que no perderemos los lípidos que
forman las membranas celulares durante el proceso de inclusión, gracias al tetróxido
de osmio.
milímetros, puesto que no nos interesa ver la organización general del tejido sino
detalles del mismo. Si queremos observar zonas diferentes de un órgano es
conveniente hacer bloques de muestra pequeños e independientes de cada una de
ellas.
por lo que tenemos que sustituir el agua del tejido por un solvente orgánico que sea
miscible con la resina. Para ello se deshidrata el tejido mediante incubaciones
sucesivas en gradaciones crecientes de etanol o acetona. Como
líquido intermediario entre la acetona pura o el etanol de 100° y las resinas se suele
utilizar el óxido de propileno.
2.4. infiltración:
A) Concepto de infiltración:
sustituirlo. Este procedimiento se utiliza tanto para microscopía óptica como electrónica
de transmisión, con algunas diferencias que se irán matizando.
B) Medios de inclusión:
a) Parafina:
Es una sustancia formada por cadenas alifáticas de carbono, saturadas con H, cuya
y ebullición se sitúa entre 45º y 60º C, dependiendo de la longitud de sus cadenas que pueden
oscilar entre C22 hasta C28.
de cera de color blanco, inodoro e insípido. Es insoluble en agua, pero soluble éter, benceno,
xileno y tolueno, así como algunos ésteres. La parafina no se afecta por los reactivos químicos
más comunes, pero se quema con facilidad. Es el medio de inclusión más utilizado en los
laboratorios de histología y de anatomía patológica.
b) Paraplast:
Mezcla de parafina muy pura con diferentes polímeros. Su coloración es muy blanca y funde a
57º C. Tiene la peculiaridad de no fragmentarse y no necesitar ser enfriada para ser cortada con
el microtomo. Su uso es el mismo que el de la parafina, aunque menos generalizado.
c) Celoidina:
Insustituible para incluir ciertos materiales como ojos, vasos, embriones, etc. Se trata de dinitrito
de celulosa o colodión y se obtiene por acción del ácido nítrico diluido sobre la celulosa. Es
ideal también para cortar grandes piezas.
e) Plásticos y resinas:
Utilizados especialmente para obtener cortes muy finos. Si los cortes son para su observación en
el microscopio electrónico de transmisión, deben ser muy finos (entre 60 y 100 nm) por lo que
se les denomina cortes ultrafinos (thin sections, en inglés). Si son para su observación con
microscopio óptico, se habla de cortes semifinos (semithin sections, en inglés) y su espesor
oscilará entre 0,5 µm y 1 µm.
Epoxy resinas: Epon 812, Araldita, Maraglas, Quetol 651, DER 334, DER 332 y
Spurr.
habitual es la parafina que debe calentarse por encima de su punto de fusión y mantenerla en
moldes: de papel, metal o plástico. En esta etapa, la parafina, fuera de la estufa, comienza a
solidificarse por lo que hay que actuar con rapidez y orientar la pieza en el fondo del molde.
códigos (letras, números, fechas, etc.) escritos con lápiz en papel, se dejará enfriar y se
ultrafinos:
En las inclusiones habituales, para obtener cortes semifinos o ultrafinos (microscopía
electrónica), el medio de inclusión utilizado es un plástico o resina, en estado liquido a la
temperatura ambiente.
Una vez infiltrada la pieza, las muestras se colocan en moldes (de plástico, silicona o capsulas
de gelatina) y se identificarán, con los correspondientes códigos (letras, números, fechas, etc.),
escritos con lápiz en papel. Para conseguir la polimerización de la resina o plástico, los bloques
se introducirán durante unas 24 horas en una estufa a 50-60ºC.
TIPOS DE FIJADORES
Formulación
Formaldehído al 40 %: 100 ml
Agua destilada 900 ml
Dihidrogenofosfato de sodio monohidrato: 4 g
Di-sodio hidrógeno fosfato anhidro 6,5 g
La solución debe tener un pH de 6,8
Tiempo de fijación: 12 – 24 horas
Aplicaciones recomendadas
2. Calcio formol
Formulación
Formaldehído al 40 %: 100 ml
Cloruro de calcio: 10 g
Agua destilada 900 ml
Tiempo de fijación: 12 – 24 horas
Aplicaciones recomendadas
Formulación
Formaldehído al 40 %: 100 ml
Cloruro sódico: 9 g
Agua destilada 900 ml
Tiempo de fijación: 12 – 24 horas
Aplicaciones recomendadas
Formulación
Sulfato de zinc: 1 g
Agua desionizada: 900 ml
Remover hasta que se disuelva y después añadir –
Formaldehído al 40 %: 100 ml
Tiempo de fijación: 4 – 8 horas
Aplicaciones recomendadas
Formulación
Aplicaciones recomendadas
6. Fijador de Helly
Formulación
Aplicaciones recomendadas
Formulación
Solución madre
Cloruro de mercurio: 12 g
Acetato sódico anhidro: 2,5 g
Agua destilada: 200 ml
Aplicaciones recomendadas
8. Solución de Bouin
Formulación
Solución acuosa saturada con ácido pícrico (al 2,1 %): 750 ml
Formaldehído al 40 %: 250 ml
Ácido acético glacial: 50 ml
Tiempo de fijación: 4 – 18 horas
Aplicaciones recomendadas
Formulación
Acetato de cobre: 25 g
Ácido pícrico: 40 g
Formaldehído al 40 %: 100 ml
Ácido acético: 15 ml
Agua destilada 1000 ml
Aplicaciones recomendadas
Formulación
Aplicaciones recomendadas
Formulación
Etanol (absoluto): 75 ml
Ácido acético glacial: 25 ml
Tiempo de fijación: 3 – 4 horas
Aplicaciones recomendadas
Formulación
Etanol absoluto: 60 ml
Cloroformo: 30 ml
Ácido acético glacial: 10 ml
Tiempo de fijación: 1 – 4 horas
Aplicaciones recomendadas
13. Methacarn
Formulación
Metanol absoluto: 60 ml
Cloroformo: 30 ml
Ácido acético glacial: 10 ml
Tiempo de fijación: 1 – 4 horas
Aplicaciones recomendadas
Formulación
Formaldehído al 40 %: 100 ml
Etanol al 95 %: 900 ml
Se pueden añadir 0,5 g de acetato de calcio para garantizar la
neutralidad
Tiempo de fijación: 12 - 24 horas
Aplicaciones recomendadas
Formulación
Etanol absoluto: 85 ml
Formaldehído al 40 %: 10 ml
Ácido acético glacial: 5 ml
Tiempo de fijación: 1 – 6 horas
Aplicaciones recomendadas
Tipos de tincion
Tinción simple
Se trata de aquella que emplea un solo colorante, la cual suele usarse con
frecuencia en cultivos de una sola bacteria, se emplea para poder apreciar
los bordes y su crecimiento, las malformaciones que estas puedan presentar
como por igual para apreciar la estructura peculiar que muchas de estas
puedan generar en su ambiente.
Se diferencia de los demás, porque las bacterias por lo general gozan de una
coloración roja o rosada, la cual se obtiene con gran facilidad por medio de
una serie de aplicaciones, de igual forma, cabe resaltar que los
actinomicetos, adquieren una coloración azul cuando se les aplica el tinte
respectivo.
De giensa
Se trata del tinte que se aplica a las muestras biológicas, es decir, de toda
muestra que procede del organismo humano, trátese de fluidos (saliva, orina,
sangre y demás), o bien de tejidos (como trozos de epidermis o dermis,
mucosas extraídas del interior y demás).
Lo que se busca con ello, es encontrar las rickettsias que puedan ubicarse
entre las respectivas muestras, es decir, la idea de su aplicación es poder
ubicar los distintos microorganismos que actúan como agentes patogénicos y
que pueden desencadenar enfermedades que dobleguen el sistema
inmunitario.
De esporas
Se emplea para la evaluación de microorganismos vegetales, es decir, que
no se pretende con ello el estudio de microorganismos de estructuras más
avanzadas, ya que el único objetivo que se persigue es evaluar la estructura
celular de referidos componentes, los cuales se tiñen con verde de malaquita,
el cual se reduce a un tinte muy tenue que puede disolverse con gran
facilidad.
De cápsulas
Biopsia por punción con aguja fina: Se usa para lesiones palpables o
definidas y se puede usar en zonas más profundas
biopsia por punción con aguja fina gruesa o biopsia de corte: Se usan pistolas
para realixar un cortey extrae fragmentos (para que la biopsia se adecuada
se extrae de 5 a 10 guiado por ultrasonido)
https://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/18704/1/HISTOLOGIA_P2.pdf
https://revistamedica.com/citologia-convencional-citologia-liquida/
https://mx.search.yahoo.com/
search;_ylt=AwrNY82DjDZm3RUIMXjD8Qt.;_ylc=X1MDMjExNDcxMjAwMwRf
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p=biopcia+convencional+y+de+base+liquida&fr2=sb-
top&fr=mcafee&type=E210MX91215G0
https://www.studocu.com/es-mx/document/universidad-salesiana/histologia/
biopsisas-apuntes-4/12789370
https://www.clasificacionde.org/tipos-de-tinciones/
https://www.leicabiosystems.com/es/knowledge-pathway/fixation-and-
fixatives-4-popular-fixative-solutions/
https://bct.facmed.unam.mx/wp-content/uploads/
2018/08/3_tecnica_histologica.pdf
https://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/3-parafina.php