Técnica Histologíca. Tarea 1

UNIVERSIDAD ESPAÑA
Médico Cirujano
Primer Semestre
Histología I
Técnica Histológica
Catedrático: Dr. Ramiro Salvador Espinoza Gonzalez
Alumno: Juan Pedro Castañeda Montes.
Durango, Dgo., agosto 2022

TÉCNICA HISTOLOGICA
Se denomina TÉCNICA HISTOLOGICA al conjunto de procedimientos aplicados a

un material biológico (animal o vegetal) con la finalidad de prepararlo y conferirle las
condiciones óptimas para poder observar, examinar y analizar sus componentes
morfológicos a través de los microscopios fotónicos y electrónicos.
Permiten la observación y el estudio de:

• Protozoarios
• células sanguíneas
• células descamadas o disociadas
• células en cultivo de tejidos
• estructuras muy delgadas y translúcidas como la membrana peritoneal de
animales pequeños o epidermis de vegetales
• granos de polen etc.
Para una observación óptima suele utilizarse tipos especiales de microscopios

fotónicos como el de campo oscuro o el de contraste de fases, con la finalidad
de conferirle las condiciones para: observar, examinar y analizar.
PROCEDIMIENTOS: Tienen por finalidad preparar células, tejidos y órganos

procedentes de seres en los que los procesos vitales se han detenido y es necesario
conservar la estructura que tenían en vida. De manera general, para alcanzar este
objetivo es necesario realizar los siguientes pasos:
1. TOMA DE LA MUESTRA:
Existen diversos procedimientos que permiten obtener muestras de tejidos y

órganos para conseguir preparaciones histológicas de buena calidad. Estos
son:
a) Mediante Biopsia. Consiste en la toma de un tejido u órgano de un ser

vivo. La Biopsia puede ser:
• incisional
• excisional
• por sacabocados
• por punción y absorción
• por raspado
• por trepanación
Los tejidos y los órganos provenientes de biopsias se toman
empleando bisturís o navajas de afeitar nuevos, sin hacer presión
sobre ellos.
2. FIJACIÓN
Es un procedimiento cuya finalidad, al aplicarlo es Detener la vida de las

células e impedir las modificaciones que pueda sufrir la célula, manteniendo
la estructura morfológica de células y tejidos sin que ocurran cambios
notables en ellos. Esta acción garantiza la integridad de las células y tejidos;
se efectúa por mediante agentes químicos denominados fijadores.
Los fijadores se clasifican en dos grandes grupos:

• Oxidantes: el tetraóxido de osmio, el bicromato de potasio, ácido
crómico.
• Reductores: el formaldehído, el glutaraldehído, el alcohol etílico, el
alcohol metílico. (el formaldehído es el más utilizado en México).
UNA BUENA FIJACIÓN.

• Elección del fijador
• Tamaño de las muestras.
• Volumen del fijador.
• Tiempo de fijación.
• Temperatura de la fijación
3. INCLUSIÓN
Los tejidos fijados adquieren cierta consistencia y dureza, pero no la

suficiente para que, de ellos, se obtengan secciones delgadas. Se
conseguirán cuando los tejidos se infiltren con sustancias denominadas “de
inclusión” y adquieran tal dureza que sometidos al filo de una navaja
produzcan secciones, cortes o láminas sumamente delgados y
transparentes.
En la Técnica Histológica, se usa el empleo de la parafina como medio de
inclusión, y dado que no es soluble en agua, su empleo condiciona la previa
extracción del agua contenida en el tejido que se va a someter al proceso de
inclusión.
La inclusión consta de los siguientes pasos:

• Deshidratación. Tiene por finalidad la extracción del agua del tejido
para que la parafina ocupe su lugar.
• Aclaración. Una vez obtenida la deshidratación absoluta de la pieza,
se coloca a la misma en el seno de un líquido, que, mezclándose con
el alcohol, tenga al mismo tiempo la propiedad de disolver la parafina,
es por esta propiedad que recibe el nombre de “Líquido intermediario”.
Pertenecen a este grupo de sustancias el cloroformo, toluol, xilol y
benzol, siendo este último el más utilizado.
• Impregnación en parafina y confección del taco o bloque. Las piezas,
después de haber sido aclaradas, se pasan a una mezcla de parafina
líquida y líquido intermediario en partes iguales. Eliminación del
espesor de parafina que hay entre la superficie del bloque y nuestra
muestra PIRAMIDOTOMO.
4. MICROTOMÍA
Con el objeto de realizar los cortes adecuados para el estudio al microscopio,

se utilizan distintos métodos y variados aparatos de gran precisión, a los que
se denominan micrótomos. Los cortes se retiran del micrótomo con un pincel
de pelo fino y se extienden en agua corriente contenida en una bandeja.
5. COLORACIÓN O TINCIÓN
El procedimiento de coloración o tinción consiste en que una estructura

celular o tisular adquiere específicamente un color bajo la acción de una
sustancia colorante. Se considera que una estructura se ha coloreado o
teñido cuando al ser lavada con el líquido que disuelve al colorante, no se
decolora. El proporcionar color a las estructuras que constituyen un tejido o
un órgano se hace con la finalidad de distinguirlas entre sí y facilitar su
observación.
La tinción sirve para observar los componentes del tejido más completo.
Por ejemplo: por ejemplo, el citoplasma se colorea porque las proteínas
citoplasmáticas poseen carga eléctrica positiva, y las partículas del colorante
tienen carga eléctrica negativa.
Por ejemplo, la coloración de hematoxilina-eosina, en ella los núcleos se

tiñen con la hematoxilina y después la eosina se encarga de colorear al
citoplasma.
6. MONTAJE
Este procedimiento consiste en colocar encima del corte coloreado y

diafanizado una gota de una sustancia adherente, diluida, generalmente en
xilol (resina natural como el bálsamo de Canadá o resinas sintéticas, cuyos
índices de refracción son similares a los del vidrio) y encima de ellos, una
laminilla cubreobjetos, cuidando que no queden burbujas de aire entre la
resina.
MUESTRAS HISTOLÓGICAS
Algunas de ellas son generales y se utilizan para una evaluación global de las
muestras, mientras que otras son más específicas y permiten la identificación y
estudio de estructuras determinadas. Algo para tener en cuenta es que la selección
de la técnica y sus variantes depende básicamente del tejido que queramos
observar y de lo que queramos estudiar en él.
Ejemplos: BIOPSIA:
• Curetaje: Procedimiento que se realiza cuando se obtiene un resultado

anormal en una prueba de Papanicolau. Se extrae una muestra de tejido
anormal de la capa que reviste el canal cervical (parte interna del cuello
uterino que conecta el útero con la vagina) con un instrumento en forma de
cuchara llamado cureta. Luego, el tejido se examina al microscopio para
determinar si hay signos de enfermedad. Es posible practicar un legrado
endocervical junto con una colposcopia (procedimiento para el que se usa un
instrumento con una lente de aumento y una luz a fin de examinar el cuello
uterino, la vagina y la vulva). También se llama curetaje endocervical.
• Sacabocados: Procedimiento mediante el cual se extrae un pedazo
pequeño de tejido de forma redonda, del tamaño del borrador de un lápiz,
con un instrumento afilado, hueco y circular. Luego se revisa el tejido al
microscopio en busca de signos de enfermedad. La biopsia con sacabocados
se puede usar en busca de ciertos tipos de cáncer, como el de piel, de vulva,
y de cuello uterino. También se usa para revisar ciertas afecciones de la piel
y cambios que pueden ocasionar un cáncer.
• Raspado: El médico utiliza una herramienta similar a una cuchilla para

extraer una pequeña muestra de las capas superiores de la piel (epidermis
y una porción de la dermis). No necesitará puntadas. El procedimiento
dejará una pequeña zona hundida. Este tipo de biopsia a menudo se hace
cuando se sospecha de cáncer de piel, o cuando hay una erupción que
aparenta estar limitada a la superficie de la piel.

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