UNIVERSIDAD NACIONAL “JORGE BASADRE GROHAMNN”

FACULTAD DE AGROPECUARIA
ESCUELA PROFESIONAL MEDICINA VETERINARIA Y
ZOOTECNIA

TEMA:
OBSERVACIÓN DE LAS ETAPAS DE LA MITOSIS

PRACTICA NUMERO 08

ALUMNO:
FERNANDO JEANPIERRE HILARIO URIETA (2023-110022)

ÁREA: BIOLOGIA GENERAL

Sección: B
CICLO: “1”

TACNA-PERU
2023
 OBSERVACIÓN DE LAS ETAPAS DE LA MITOSIS

I. OBJETIVOS

 Observar las fases de la mitosis en raicillas de cebolla.

 Identificar la fase en la cual se encuentran las células.

II. MARCO TEORICO

Observación de las Etapas de la Mitosis

La mitosis es un proceso fundamental del ciclo celular que asegura la distribución

equitativa del material genético a las células hijas. Este proceso es esencial para el
crecimiento, desarrollo y reparación de los organismos multicelulares. La mitosis se
divide en varias etapas clave: profase, metafase, anafase y telofase, seguidas de la
citocinesis.

Etapas de la Mitosis

Profase

Durante la profase, la cromatina se condensa para formar cromosomas visibles bajo el

microscopio óptico. Cada cromosoma está compuesto por dos cromátidas hermanas
unidas por un centrómero. El nucleolo desaparece y la membrana nuclear comienza a
desintegrarse. Los centriolos se desplazan hacia los polos opuestos de la célula,
formando el huso mitótico.

Metafase

En esta etapa, los cromosomas se alinean en el ecuador de la célula, formando la placa

metafásica. Las fibras del huso mitótico se unen a los centrómeros de los cromosomas
a través de los complejos de cinetocoro, asegurando que cada cromátida hermana se
oriente hacia polos opuestos.
 Anafase

Durante el anafase, las cromátidas hermanas se separan simultáneamente y son

arrastradas hacia los polos opuestos de la célula por las fibras del huso mitótico. Este
movimiento asegura que cada polo reciba una copia idéntica del material genético.

Telofase

En la telofase, los cromosomas llegan a los polos de la célula y comienzan a

descompensarse, volviéndose nuevamente cromatina. Se reforman las membranas
nucleares alrededor de cada conjunto de cromosomas, y el nucleolo reaparece. La
célula está casi lista para dividirse por completo.

Citocinesis

La citocinesis es el proceso que sigue a la telofase y culmina con la división física del
citoplasma en dos células hijas. En células animales, esto se logra mediante un anillo
contráctil de actina y miosina que estrangula la célula madre, mientras que en células
vegetales, una nueva pared celular se forma entre las células hijas.

Procedimiento de las Etapas de la Mitosis

La observación de las etapas de la mitosis puede realizarse mediante la preparación de

muestras de tejidos en división, como las raíces de cebolla o células de la médula ósea.
El uso de colorantes específicos, como la orceína o el Giemsa, permite visualizar las
estructuras cromosómicas y el huso mitótico bajo el microscopio óptico.

III. MATERIALES

MATERIALES MUESTRAS REACTIVOS

Laminas cubreobjetos Cebolla con raíces Orceína

Laminas portaobjetos

Bisturí

Cuchillo de Bisturí
IV. PROCEDIMIENTO

 Con esta técnica de tinción se verán los núcleos y los cromosomas en color rosáceo-
morado. La orceína tiñe específicamente la cromatina, la asociación de DNA y
proteínas, que durante la interfase se encuentra relativamente descondensada
formando los cromosomas.

 Con el “squash” se rompen la estructura interna de la raíz, las células se dispersan y

extienden por toda la preparación, incluso separándose unas de otras. Cuanto más
extendidas y más planas por el aplastado mejor las enfocaremos y observaremos.

 El citoplasma, no es teñido.

 El núcleo densamente teñido y en cuyo interior se podrá observar ocasionalmente

una o dos regiones poco o nada teñidas, estas corresponden a los nucleolos que son
muy ricos en RNA y no se tiñen con la orceína. Como el núcleo tiene un volumen, es
más o menos esférico, cuando no se detecta es que se encuentra en la cara opuesta.
Allium cepa tiene dos nucleolos, pero a veces se funden en uno, en estos casos tiene
mayor tamaño.

 La pared celular, característica de las células vegetales que se encuentra externa a la

membran, no se tiñe, pero deducimos su presencia por la forma rectangular o
cuadrada que tienen las células, a diferencia de las células animales que no la poseen
y siempre tiene formas más esféricas y menos angulosas.

 Los cromosomas se verán en aquellas células que se encuentren en mitosis.

1. Obtener raicillas de cebolla de la siguiente manera: las raicillas de cebolla se

obtienen colocando una semana antes de la práctica, un bulbo de cebolla, sin
catáfilas externas y quitándoles todas las raíces secas, en la parte ecuatorial
se introducen 3 o 4 mondadientes distribuidas equidistantemente para
suspender el bulbo en la boca de un vaso con agua corriente, permitiendo
que el líquido se ponga en contacto con el disco germinativo, para permitir la
emisión de nuevas raíces.

2. Con un bisturí realizar un corte transversal de 2 a 4 raicillas entre los 2 o 3

mm del extremo apical, obteniéndose así una muestra por cada raicilla.
3. Colocar las muestras en una placa Petri conteniendo el fijador (ácido acético
al 50%) por un tiempo mínimo de 5 minutos (5 a 30 min)

4. Trasladar la muestra a una luna de reloj y agregarle orceína acética en

cantidad suficiente para cubrir la muestra.

5. Realizar el calentamiento utilizando mechero de alcohol hasta la emisión de

vapores, luego se deja enfriar durante 5 minutos.

6. Repetir el calentamiento 2 veces más Nota: El tiempo de coloración está en

función al tamaño de los cortes y a la maduración del colorante

7. Colocar la muestra en el centro de una lámina portaobjetos, agregarle una

gota del colorante. La orceína tiñe de manera permanente los tejidos y la piel
por lo que hay que tener cuidado en su manejo, y no deben respirarse los
vapores que se desprenden durante la tinción y el calentamiento, para lo
cual debe mantenerse la cabeza alejada y el brazo extendido. Asimismo,
debe ponerse varias capas de papel de filtro para evitar mancharse el dedo,
ya que además de teñir puede irritar levemente la piel al tener ácido acético
y HCl.

8. Colocar una laminilla cubreobjetos

9. Con un lápiz de gráfico (carboncillo) golpee el cubreobjeto en forma

concéntrica de adentro hacia afuera.

10. Con un papel de filtro eliminar el exceso de colorante

11. Cubrir la lámina preparada con papel de filtro y presione fuerte con el pulgar
el cubreobjeto (squash)

12. Observar con objetivo y mediano y mayor aumento.

13. Identificar las fases de la mitosis y graficarlos.

V. RESULTADOS

Se observa una fase de profase ya que durante la profase

los cromosomas se condensan y se vuelven visibles
como estructuras densas y oscuras. La membrana
nuclear comienza a desintegrarse, aunque puede no ser
claramente visible en todos los casos. Además que se
puede ver una estructura densa y granulosa en el centro
de la célula, que probablemente representa los
cromosomas condensados característicos de la profase.
PROFASE

Se observan varias fases como Profase: Las células con

cromosomas visibles, pero sin una membrana nuclear clara.
Los cromosomas están comenzando a condensarse. Anafase:
Las células donde las cromátidas hermanas se están separando
y moviendo hacia los polos opuestos de la célula. Telofase:
Las células donde los cromosomas están en los polos opuestos
y la membrana nuclear comienza a reformarse.

FASES
 VI. DISCUSION

La observación de las etapas de la mitosis en las células de las raíces es una

herramienta educativa y de investigación invaluable. Comprender cómo se lleva a
cabo la mitosis y las condiciones óptimas para su observación es crucial para avanzar
en el conocimiento biológico y en la aplicación de esta información en campos como
la genética y la medicina. La fijación adecuada con ácido acético, la identificación de
fases frecuentes como la profase, y la superación de desafíos asociados con muestras
envejecidas son aspectos esenciales para el éxito de estos estudios.

VII. CONCLUSION

 La práctica de observar e identificar las fases de la mitosis en raicillas de

cebolla ha demostrado ser una herramienta educativa eficaz para entender el
ciclo celular y los mecanismos de la división celular. El uso de técnicas
adecuadas de preparación de muestras ha sido crucial para obtener resultados
claros y precisos. Este ejercicio ha reforzado la importancia de la mitosis en el
crecimiento y la reparación celular, y ha proporcionado una base sólida para
estudios avanzados en biología celular y genética

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

 Campbell, N. A., & Reece, J. B. (2017). Biology. Pearson. Capítulo 12: El

ciclo celular.
 Karp, G. (2018). Cell and Molecular Biology: Concepts and Experiments.
John Wiley & Sons. Capítulo 14: La mitosis y el ciclo celular.
 Cooper, G. M., & Hausman, R. E. (2013). The Cell: A Molecular Approach.
Sinauer Associates. Capítulo 10: El ciclo celular y la división celular.
 Brooker, R. J., Widmaier, E. P., Graham, L. E., & Stiling, P. D. (2017).
Biology. McGraw-Hill Education. Capítulo 15: La mitosis y la meiosis.

IX. ANEXO

1. ¿Cuál es la acción del ácido acético sobre las células de las raíces?
El ácido acético actúa como un fijador celular en la preparación de muestras de raíces.
Su acción incluye:
Fijación de células: Coagula las proteínas y fija las estructuras celulares, manteniendo
 los cromosomas en su lugar para la observación microscópica.
Desinfección: Tiene propiedades antimicrobianas que previenen la descomposición y
la contaminación de las muestras.

2. ¿Cuál es la fase mitótica más frecuente?

La fase mitótica más frecuente es la profase. Durante la profase, los cromosomas se
condensan y se vuelven visibles, lo cual es un proceso relativamente largo en
comparación con otras fases de la mitosis.

3. ¿Qué sucede en la profase de la mitosis?

En la profase de la mitosis, ocurren los siguientes eventos
Los cromosomas se condensan y se vuelven visibles bajo el microscopio.
Cada cromosoma está compuesto por dos cromátidas hermanas unidas por un
centrómero.
El nucleolo desaparece.
La membrana nuclear comienza a desintegrarse.
Los centriolos se mueven hacia los polos opuestos de la célula y el huso mitótico
comienza a formarse.

4. Describa cómo se lleva a cabo la citocinesis en las células animales

La citocinesis en las células animales se lleva a cabo mediante los siguientes pasos:
Formación del anillo contráctil: Un anillo de filamentos de actina y miosina se forma
alrededor de la célula en el ecuador.
Contracción del anillo: El anillo se contrae, estrangulando la célula madre y
dividiendo el citoplasma en dos células hijas.
Separación: Las células hijas se separan completamente, cada una con su propio
núcleo y citoplasma.

5. ¿Cuál sería la dificultad de trabajar con raíces envejecidas?

Trabajar con raíces envejecidas presenta varias dificultades:
Menor actividad mitótica: Las raíces envejecidas tienen menos células en división
activa, lo que hace más difícil encontrar y observar las etapas de la mitosis.
Mayor deterioro celular: Las células de las raíces envejecidas pueden estar más
deterioradas y dañadas, lo que complica la observación clara de las estructuras
celulares.
Mayor acumulación de sustancias: Pueden tener más acumulación de compuestos que
interfieren con la tinción y visualización de los cromosomas.