INFORME DE

LABORATORIO

ANÁLISIS COMPARATIVO DE TÉCNICAS ESPECTROFOTOMÉTRICAS EN LA

DETERMINACIÓN DE COMPONENTES FARMACOLÓGICOS.

(Comparative Analysis of Spectrophotometric Techniques in the Determination of

Pharmacological Constituents)

Berdugo Puentes Jorge ¹, Mier Sandoval Juan², Bolívar Gámez Ivan³, Velilla Martínez

Juan⁴

Estudiantes de 3 semestre, facultad de Medicina, Fundación Universitaria San

Martin-Colombia.

RESUMEN: Este análisis comparativo se enfoca en el uso de técnicas

espectrofotométricas en la determinación de componentes farmacológicos. Los autores

destacan la importancia de la espectrofotometría en la industria farmacéutica y tienen como

objetivo analizar las metodologías utilizadas para comparar su eficacia. Se mencionan

varios estudios donde se aplicó la espectrofotometría para el control de calidad de

diferentes fármacos, incluyendo la colchicina, el clorhidrato de ciprofloxacina, el

clorhidrato de bromhexina, el salbutamol y la bromhexina.

En cada uno de estos estudios, se describe cómo se aplicó la espectrofotometría para

determinar la concentración de los fármacos en cuestión, y se mencionan las

modificaciones o adaptaciones específicas en los métodos estándar para adaptarlos a las

necesidades del control de calidad farmacéutico.

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Este análisis resalta la versatilidad y utilidad de la espectrofotometría en la industria

farmacéutica y cómo se aplica en diferentes contextos para garantizar la calidad de los

productos farmacéuticos. Además, se mencionan los detalles específicos de cada estudio,

como la preparación de muestras y las longitudes de onda utilizadas para la medición.

PALABRAS CLAVES: Espectrofotometría, espectrofotómetro, farmacología, validación

de métodos.

ABSTRACT: This comparative analysis focuses on the use of spectrophotometric

techniques in the determination of pharmacological components. The authors emphasize

the importance of spectrophotometry in the pharmaceutical industry and aim to analyze the

methodologies used to compare their effectiveness. Several studies are mentioned in which

spectrophotometry was applied for quality control of different drugs, including colchicine,

ciprofloxacin hydrochloride, bromhexine hydrochloride, salbutamol, and bromhexine.

In each of these studies, it is described how spectrophotometry was applied to determine

the concentration of the respective drugs, and specific modifications or adaptations to

standard methods are mentioned to tailor them to pharmaceutical quality control needs.

In summary, this analysis highlights the versatility and utility of spectrophotometry in the

pharmaceutical industry and how it is applied in different contexts to ensure the quality of

pharmaceutical products. Additionally, specific details of each study, such as sample

preparation and the wavelengths used for measurement, are mentioned.

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KEYWORDS: Spectrophotometry, spectrophotometer, pharmacology, method validation.

INTRODUCCION.

Los avances de la medicina y todas las ramas que emergen de esta, se han visto

influenciadas en gran parte a los avances de las tecnologías moderna, la cual va avanzando

y ha arrastrado consigo nuevas investigaciones para el crecimiento de nuevas

investigaciones que se dan por surgimientos de nuevas necesidades en la misma.

La espectrofotometría es una técnica de caracterización que se ha visto involucrada, más

que todo en la generación de diagnósticos y en muchas industrias como la farmacéutica.

Pero ¿Qué es la espectrofotometría?, ´´La espectrofotometría es una técnica que mide la

cantidad de luz que absorbe una sustancia química. Además, la espectrofotometría permite

determinar la concentración de un compuesto químico, ya que la cantidad de luz absorbida

depende de la concentración´´. [1] ▷ ¿Qué es la espectrofotometría? (ingenierizando.com).

Esto se hace con un espectrofotómetro, que es un instrumento muy común en los

laboratorios de bioquímica ´´ permite llevar a cabo la espectrofotometría. Es decir, el

espectrofotómetro es un dispositivo que sirve para medir la intensidad de luz absorbida.

´´[1]

La espectrofotometría, ha ido cobrando gran relevancia en temas incluso fuera de la

medicina y con distintos objetivos, algunos pueden ser:

En el sector de la alimentación, la espectrofotometría se usa para hacer controles de calidad,

ya que permite determinar la concentración de algunas sustancias en los alimentos.

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De manera similar, la espectrofotometría también se emplea para controlar y tratar las

aguas, pues si el agua tiene una concentración muy grande de algunos elementos químicos

se considera contaminada y, por tanto, no potable.

Asimismo, la espectrofotometría también se utiliza para controlar la calidad ambiental. Los

laboratorios realizan ensayos espectrofotométricos para analizar sustancias químicas.

En la industria textil se usa la espectrofotometría para determinar la composición química

de materiales. También se puede utilizar esta rama científica para averiguar la composición

de las pinturas empleadas.[1]

En este informe exaltaremos una vez más las funciones tan importantes de la

espectrofotometría, analizando algunos artículos donde esta técnica se emplea para el

estudio y fabricación de fármacos.

OBJETIVO GENERAL.

•Comprender la importancia de la espectrofotometría en la industria farmacéutica, reacion e

importancia en las áreas de la investigación y medicina.

OBJETIVOS ESPECIFICOS.

•Analizar de manera detallada las metodologías empleadas por los investigadores para

comparar su efectividad.

•Ampliar nuestros conocimientos de la técnica de espectrofotometría para tener el

fundamento de la técnica y saber cuándo y cómo aplicarla como médicos.

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METODOLOGIA.

•Se tomo 5 artículos científicos relacionados o dirigidos a un mismo campo.

•Se identifico cual fue el uso de la espectrofotometría en cada uno de los artículos

científicos para la aplicabilidad de los diferentes fármacos.

•Se hizo un análisis de los artículos, haciendo un énfasis en la discusión y los resultados

teniendo en cuenta el fundamento de la espectrofotometría.

•Se concluyó del uso de las técnicas de espectrometría en la industria farmacológica.

RESULTADOS.

Nombre del articulo Comparación.

Se describe el método analítico propuesto,

que es una adaptación del método oficial

de la Farmacopea Británica para el control

de calidad de tabletas de colchicina en el

producto Artrichine. Se detallan las etapas

del procedimiento, incluyendo la

preparación de la muestra, la extracción en

etanol absoluto y la medición de la

absorbancia a 350 nm.

se pesó con exactitud una cantidad de

polvo homogéneo y finamente dividido en

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un mortero equivalente a 0,5 mg de

colchicina y se trasvasó a un matraz

volumétrico de 50 mL. Se añadieron 25 mL

de etanol absoluto y se agitó durante 1 hora

Validación del método espectrofotométrico en agitador magnético (THERMOLYNE

para control de calidad de la colchicina en SP18425) a 350 rpm. Posteriormente se

Artrichine tabletas. completó a volumen con etanol absoluto y

se mezcló por inversión. Se filtró a través

de papel de filtro MN 615 • Ø 125 mm, se

desechan los primeros 20 mL. Se

determina la absorbancia a una longitud de

onda de 350 nm frente a un blanco de

etanol absoluto empleando el

Espectrofotómetro

(THERMOSPECTRONIC GENESYS 2).

Luego, el contenido se calculó mediante

una ecuación.

La SR se preparó utilizando el mismo

procedimiento, pero partiendo de 0,5 mg

de colchicina estándar.

Las modificaciones respecto al método

oficial fueron:

· Aumento del volumen inicial de etanol

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absoluto para la extracción del analito de la

matriz.

· Cambio del tipo y tiempo de agitación

para separar la disolución de la muestra de

los excipientes insolubles en etanol

absoluto.

Preparación para llevar a cabo la

Validación se preparó placebo del producto

y se utilizaron los procedimientos y

criterios de aceptación vigentes y se

considera el tipo de método y el objetivo

para el cual se propone. [2]

En este estudio, se desarrolló y validó un

método de espectrofotometría ultravioleta

para el control de calidad del clorhidrato de

ciprofloxacina en tabletas de Ciprecu. El

método se basó en la detección de grupos

cromóforos presentes en la estructura del

compuesto. Se evaluaron diferentes

parámetros, como especificidad, linealidad,

exactitud y precisión.

La especificidad del método se verificó al

comparar la respuesta obtenida para el

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placebo, el blanco y la muestra de

clorhidrato de ciprofloxacina. Se determinó

Validación del método por la absorbancia a una longitud de onda

espectrofotometría específica y se comprobó que no hubiera

ultravioleta para control de calidad de señales analíticas para el placebo.

clorhidrato de ciprofloxacina en tabletas La linealidad del sistema se evaluó

Ciprecu analizando diferentes concentraciones de

clorhidrato de ciprofloxacina en un rango

del 80-120% de la cantidad teórica

declarada. Se construyó una curva de

calibración y se determinaron los

coeficientes de correlación lineal,

determinación, intercepto y pendiente.

La linealidad del método se evaluó

analizando diferentes concentraciones de

clorhidrato de ciprofloxacina en un rango

del 50-150% de la cantidad teórica

declarada. Se prepararon placebos y se

construyó una curva de calibración.

La precisión del método se evaluó

comparando los resultados obtenidos por

diferentes analistas y en diferentes días. Se

realizaron pruebas estadísticas para

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determinar si existían diferencias

significativas.

[3]

Consistió en fabricar soluciones de trabajo

de bromhexina a distintas concentraciones

diluyendo una solución madre de

bromhexina con agua. Estas soluciones de

trabajo se utilizaron para construir una

curva de calibración en la que se midió la

absorbancia de cada solución a una

longitud de onda utilizando un

espectrofotómetro UV-Visible.

Se preparó una mezcla de excipientes que

se asemejaba a las formulaciones

Validación de un método farmacéuticas líquidas para probar la

espectrofotométrico para determinación de selectividad del método, y se añadieron

clorhidrato de bromhexina en formas interferentes para ver cómo afectaban a la

farmacéuticas líquidas, basada en la determinación de la bromhexina. Para

reacción de Bratton-Marshal determinar si había habido interferencias,

se midió la absorbancia de estas soluciones

y se comparó con la absorbancia de la

solución de bromhexina pura.

Se realizaron mediciones repetidas de las

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soluciones de trabajo para evaluar la

precisión del método y se calculó el

coeficiente de variación (C.V.). Para

confirmar la precisión del método, los

resultados obtenidos con el método

propuesto se compararon con los obtenidos

con el método potenciométrico oficial.

[4]

La metodología empleada en este estudio

implicó el uso de un espectrofotómetro

JASCO UV-VISIBLE 450 con una rendija

de 2 nm de ancho y una celda de cuarzo de

1 cm para la adquisición de datos

espectrales. Para la manipulación de datos

se utilizó el software de medición y análisis

espectral JASCO. El estudio utilizó un

método espectrofotométrico utilizando dos

nuevas técnicas matemáticas:

transformación de derivación para eliminar

la interferencia de fondo espectral y técnica

quimiométrica para tener en cuenta todas

las posibles fuentes de variabilidad química

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y física en un modelo de calibración.

La calibración y predicción se realizaron

utilizando un programa CASAP en

lenguaje Pascal, que incluye el algoritmo

de Mínimos Cuadrados Parciales. El

programa también proporcionó estimadores

para determinar el número de factor óptimo

de los datos espectrales, incluido el

indicador de factor (IND) y la relación de

Determinación espectrofotométrica valores propios (ER) basados en valores

simultánea de salbutamol y bromhexina en propios de la matriz espectral de

tabletas. covarianza, así como el valor de relación F

basado en validación cruzada. Método.

Se prepararon soluciones estándar de

sulfato de salbutamol y clorhidrato de

bromhexina disolviendo 50 mg en 10 ml de

etanol absoluto y diluyendo hasta 50 ml

con agua destilada. Las mediciones de

absorción se registraron a lo largo de 200-

350 nm con intervalos de 1 nm frente a un

blanco de etanol al 20%. Las tabletas se

analizaron pulverizando finamente no

menos de 10 tabletas, disolviendo el polvo

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en etanol absoluto, filtrando la solución y

diluyendo con agua.

En general, la metodología implicó el uso

de espectrofotometría, técnicas

matemáticas y programas de software para

determinar las concentraciones de sulfato

de salbutamol y clorhidrato de bromhexina

en una forma farmacéutica combinada.

[5]

Se mencionan dos métodos

espectrofotométricos desarrollados: el

método de longitud de onda dual y el

método espectrofotométrico de centrado

medio.

• Método de Longitud de Onda Dual: Este

método se basa en la diferencia de

absorbancia en dos puntos del espectro

para la determinación selectiva de ATR y

Dos métodos espectrofotométricos para la EZ. Se probaron diferentes longitudes de

determinación simultánea de algunos onda y se seleccionaron valores específicos

fármacos antihiperlipidémicos para cada fármaco. Se construyeron curvas

de calibración y se verificó que ATR

(atorvastatina) y EZ (ezetimiba) obedecen

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la ley de Beer-Lambert en sus rangos de

concentración respectivos.

• Método Espectrofotométrico de Centrado

Medio de Espectros de Relación (MCR):

Para este método, se evaluaron diferentes

parámetros, incluido el rango de longitud

de onda y la concentración del divisor. Se

obtuvieron los mejores resultados

utilizando un rango de longitud de onda de

200 a 290 nm y concentraciones

específicas de ATR y EZ como divisores.

Se construyeron curvas de calibración y se

determinaron las concentraciones de ATR y

EZ midiendo los valores de amplitud de los

espectros de relación centrada media en un

rango de longitud de onda específico.

[6]

Tabla 1 (Autor: autores). Cuadro comparativo sobre las diferencias de técnicas en la

aplicabilidad de la espectrofotometría.

DISCUSIÓN.

Al analizar en profundidad los cinco artículos, queda clara la preeminencia y relevancia de

la espectrofotometría en el contexto de la industria farmacéutica. Cada uno de estos

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estudios se centra en la aplicación de esta técnica analítica en contextos diferentes,

abordando diversos aspectos, desde la cuantificación de compuestos farmacéuticos hasta la

validación de métodos y la evaluación de la calidad de productos medicinales.

Uno de los aspectos más destacados de la espectrofotometría es su versatilidad. A través de

la medición precisa de la absorbancia en longitudes de onda específicas, esta técnica

permite la determinación cuantitativa de una amplia gama de sustancias en diversas

matrices farmacéuticas. Ya sea “la colchicina en tabletas de Artrichine” [2], “el clorhidrato

de ciprofloxacina en tabletas de Ciprecu” [3], “la bromhexina en formas farmacéuticas

líquidas, el salbutamol y la bromhexina en tabletas” [4], o incluso “la atorvastatina y la

ezetimiba en formulaciones antihiperlipidémicas” [6], la espectrofotometría ofrece una

solución precisa y confiable.

Un punto en común entre estos artículos es el empleo de curvas de calibración, basadas en

la absorbancia, como un enfoque esencial en la validación de métodos. “ Curvas de

calibración se utilizan para comprender la respuesta instrumental a un analito y predecir la

concentración en una muestra desconocida” [7], Estas curvas vinculan la concentración

conocida de un compuesto con su absorbancia, lo que permite establecer la linealidad y la

relación cuantitativa entre ambos. Además, la espectrofotometría es fundamental en la

evaluación de parámetros críticos, como la especificidad, la precisión y la exactitud,

garantizando así la fiabilidad de los resultados analíticos.

A pesar de las particularidades de cada estudio, se destaca la espectrofotometría como una

técnica de acceso amplio y fácil implementación en laboratorios farmacéuticos. Su

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simplicidad y versatilidad hacen que sea una herramienta apreciada para analistas y

científicos en la industria, permitiendo un control de calidad robusto y confiable de los

productos farmacéuticos.

Estos cinco artículos refuerzan la idea de que la espectrofotometría es una piedra angular en

la validación y el control de calidad de los productos medicinales. Su capacidad para

proporcionar mediciones precisas y cuantitativas, su versatilidad en aplicaciones

farmacéuticas y su facilidad de uso la convierten en una herramienta invaluable para

garantizar la calidad y eficacia de los medicamentos que finalmente llegan a manos de los

pacientes, contribuyendo así a la seguridad y la confiabilidad en el ámbito de la salud.

la espectrofotometría se erige como una técnica analítica de crucial importancia en la

industria farmacéutica, y la comparación de su aplicación en los cinco artículos subraya su

versatilidad y utilidad en diversos contextos. A través de la medición precisa de la

absorbancia en longitudes de onda específicas, esta técnica se convierte en la herramienta

predilecta para la cuantificación precisa de compuestos farmacéuticos en matrices

complejas, como tabletas, soluciones líquidas y formulaciones farmacéuticas.

En todos estos estudios, la espectrofotometría desempeña un rol esencial en la validación de

métodos analíticos. La construcción de curvas de calibración basadas en la absorbancia es

un enfoque recurrente que establece una relación cuantitativa entre la concentración de un

compuesto y su absorbancia, demostrando la especificidad, linealidad, exactitud y precisión

del método propuesto. Esta consistencia subraya la confiabilidad de la espectrofotometría

en la evaluación de parámetros críticos. A pesar de las particularidades de cada estudio, se

resalta la espectrofotometría como una técnica altamente accesible y fácil de implementar

en laboratorios farmacéuticos. Su simplicidad y versatilidad la convierten en una

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herramienta apreciada por analistas y científicos en la industria, permitiendo un control de

calidad sólido y confiable de los productos medicinales.

En última instancia, estos cinco artículos refuerzan la idea de que la espectrofotometría es

una pieza fundamental en la validación y el control de calidad de los productos

farmacéuticos. Su capacidad para proporcionar mediciones precisas y cuantitativas, su

versatilidad en aplicaciones farmacéuticas y su facilidad de uso la convierten en una

herramienta inestimable para garantizar la calidad y eficacia de los medicamentos que

llegan a los pacientes, asegurando así la seguridad y la confiabilidad en el ámbito de la

salud “En la industria es una técnica altamente utilizada en el análisis elemental de

biosensores, cadenas poliméricas complejas, fármacos, productos de síntesis química,

análisis forense, contaminación medioambiental, perfumes, y una herramienta

indispensable en el campo de la proteómica.” [8]. La espectrofotometría se erige como el

pilar sobre el cual descansa la calidad y eficacia de los medicamentos, garantizando que los

pacientes reciban productos farmacéuticos de alta calidad y confiabilidad.

CONCLUSION.

En conclusión, este análisis comparativo enfocado en el uso de técnicas

espectrofotométricas en la determinación de componentes farmacológicos destaca la

importancia fundamental de la espectrofotometría en la industria farmacéutica. Los autores

han demostrado cómo esta técnica versátil se utiliza en diversos estudios para garantizar la
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calidad de productos farmacéuticos clave, como la colchicina, el clorhidrato de

ciprofloxacina, el clorhidrato de bromhexina, el salbutamol y la bromhexina.

A través de estos estudios, se muestra cómo se aplican adaptaciones específicas de métodos

estándar para satisfacer las necesidades del control de calidad farmacéutica, lo que resalta la

flexibilidad de la espectrofotometría en diferentes contextos. Además, se subraya la

importancia de detalles cruciales, como la preparación de muestras y las longitudes de onda

utilizadas para la medición, que contribuyen significativamente a la eficacia de esta técnica.

En última instancia, este análisis reafirma la espectrofotometría como una herramienta

esencial en la industria farmacéutica, que desempeña un papel crucial en la garantía de la

calidad de los productos farmacológicos y facilita la mejora continua de los métodos de

control de calidad en esta importante área de la ciencia y la salud.

REFERENCIAS.

[1] Ingenierizando. Espectrofotometría. Ingenierizando [Internet]. 20 de julio de 2022;

Disponible en: https://ingenierizando.com/optica/espectrofotometria/

[2] Maikel Pérez Navarro,I Yasleny Rodríguez Hernández,II Yania Suárez Pérez.

Validation of the spectrophotometric method for the quality control of Artrichine tablets.

Revista Cubana de Farmacia. 2016;50(1)

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[3] Pérez Navarro M, Rodríguez Hernández Y, Suárez Pérez Y. Validación del método por

espectrofotometría ultravioleta para control de calidad de clorhidrato de ciprofloxacina en

tabletas Ciprecu. Revista Cubana de Farmacia. 23 de noviembre de 2013;199-212.

[4] BUITRAGO A, GONZÁLEZ S, CALDERÓN L. Validación de un método

espectrofotométrico para la determinación de clorhidrato de bromhexina en formas

farmacéuticas líquidas, basada en la reacción de Bratton-Marshall. REVISTA DE LA

FACULTAD DE FARMACIA. octubre de 2005;47

[5] Tantishaiyakul V, Poeaknapo C, Sribun P, Sirisuppanon K. Simultaneous determination

of dextromethorphan HBr and bromhexine HCl in tablets by first-derivative

spectrophotometry. J Pharm Biomed Anal. 1998 Jun;17(2):237-43. doi: 10.1016/s0731-

7085(97)00188-x. PMID: 9638576.

[6] Abdelwahab NS, El-Zeiny BA, Tohamy SI. Two spectrophotometric methods for

simultaneous determination of some antihyperlipidemic drugs. Journal of Pharmaceutical

Analysis [Internet]. 1 de agosto de 2012;2(4):279-84. Disponible en:

https://doi.org/10.1016/j.jpha.2012.02.002

[7] Calibration curves. JoVE [Internet]. Disponible en:

https://www.jove.com/es/v/10188/calibration-curves-principles-and-applications?

language=Spanish
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[8] Espectrometría de masas. sus aplicaciones en la industria farmacéutica - Pharmatech

[Internet]. Disponible en: https://www.pharmatech.es/articulos/20160708/espectrometria-

masas-aplicaciones-industria-farmaceutica