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    King y Altman Sebas

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    Karla Dennise Guerra Cruz
    Este documento describe el método gráfico de King y Altman para resolver ecuaciones cinéticas complejas. El método implica construir polígonos con tantos vértices como especies químicas presentes y usarlos para calcular las concentraciones de cada especie en el estado estacionario. Esto permite expresar la velocidad total en función de las constantes cinéticas y concentraciones de sustrato y producto, obteniendo la misma ecuación que cuando se resuelven las ecuaciones diferenciales en el estado estacionario. El método es sencillo y útil para

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    Este documento describe el método gráfico de King y Altman para resolver ecuaciones cinéticas complejas. El método implica construir polígonos con tantos vértices como especies químicas presentes y usarlos para calcular las concentraciones de cada especie en el estado estacionario. Esto permite expresar la velocidad total en función de las constantes cinéticas y concentraciones de sustrato y producto, obteniendo la misma ecuación que cuando se resuelven las ecuaciones diferenciales en el estado estacionario. El método es sencillo y útil para

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    de 13

    3.

    - Resolucin grfica de ecuaciones cinticas: Mtodo de King y Altman Mtodo esquemtico para la resolucin de ecuaciones con mecanismo cintico complejo

    El mtodo grfico, de K&A, consiste en la construccin, en primer lugar, de un polgono de tantos vrtices como especies qumicas puede presentar la enzima.
    Para el sistema ms simple:

    E + S <==> ES <==> EP <==> E + P


    En el estado estacionario la concentracin total del enzima ser igual a la suma de todas las especies qumicas de esta

    Eo EXi

    ES

    EP

    Se utiliza para todos los sistemas: Con ms de un Substrato y Producto

    ES

    EP

    E
    P k6

    k2 ES

    S k1

    k5 k3 k4 EP

    * A continuacin se construyen tantos polgonos abiertos como lados tiene el polgono, dejando un lado abierto en cada uno de ellos.

    E k2 ES

    E k2 EP E k5 ES k3 k4 P k6 ES

    S k1 k3
    k4

    S k1

    k5

    P k6

    EP

    EP

    * Por otro lado, se cumple que la razn entre una determinada especie qumica [EXi] y la concentracin total de enzima [Eo], [Exi]/[Eo], es igual a la suma de los trminos que afectan a la especie, partido por la suma de todos los trminos que afectan a todas las especies. de los trminos que afectan a la especie EXi [EXi]/[Eo] = ---------------------------------------------------------------------- de los trminos que afectan a todas las especies qumicas Cmo calculamos el numerador y el denominador?

    * Los trminos que afectan a una especie se calculan en


    cada polgono abierto recorriendo el camino para llegar a la especie , multiplicando las constantes de velocidad y las concentraciones de S y P, si hubiera lugar.

    E k2 S k1 k3 k4 k2

    E S k1 k5 P k6

    ES

    EP
    E k5

    ES

    EP

    P k6

    ES

    k3

    k4

    EP

    [E]

    (k2k4) + (k2k5) + k3k5)

    E k2 S k1 k3 k4 k2

    E S k1 k5 P k6

    ES

    EP
    E k5

    ES

    EP

    P k6

    ES

    k3

    k4

    EP

    [ES]

    (k1k4S) + (k1k5S) + (k4k6P)

    E k2 S k1 k3 k4 k2

    E S k1 k5 P k6

    ES

    EP
    E k5

    ES

    EP

    P k6

    ES

    k3

    k4

    EP

    [EP]

    (k1k3S) + (k2k6P) + (k3k6P)

    FORMAS DE LA ENZIMA

    TRMINOS

    [E]
    [ES] [EP]

    (k2k4)

    (k2k5)

    (k3k5)

    (k1k4S) (k1k5S) (k4k6P) (k1k3S) (k2k6P) (k3k6P)

    EXi EXi Eo E ES EP

    As pues,

    (k2k4 + k2k5 +k3k5) [E] = [Eo] --------------------------------------------------------------------------(k2k4 + k2k5 +k3k5) + (k1k4S) + (k1k5S) + (k4k6P) +(k1k3S + k2k6P + k3k6P)

    (k1k4S + k1k5S + k4k6P) [ES] = [Eo] -------------------------------------------------------------------------

    (k2k4 + k2k5 +k3k5) + (k1k4S) + (k1k5S) + (k4k6P) +(k1k3S + k2k6P + k3k6P)

    (k1k3S + k2k6P + k3k6P) [EP] = [Eo] ------------------------------------------------------------------------(k2k4 + k2k5 +k3k5) + (k1k4S) + (k1k5S) + (k4k6P) +(k1k3S + k2k6P + k3k6P)

    - Como vt viene dado por:

    vt = k1[E][S] - k2[ES]

    - Sustituyendo los valores de [E] y [ES] tendremos:

    (k2k4 + k2k5 +k3k5) ----------- [S] k2[Eo] ------------------------------

    (k1k4S + k1k5S + k4k6P)

    vt = k1[Eo] -------------

    Donde:

    t = (k2k4 + k2k5 +k3k5) + (k1k4S) + (k1k5S) + (k4k6P) +(k1k3S + k2k6P + k3k6P)


    y operando, obtenemos:

    (k1k2k4S + k1k2k5S +k1k3k5S - k1k2k4S - k1k2k5S - k2k4k6P)


    --------------------------------------------------------------]

    vt = [Eo] [--

    -Simplificando

    (k1k3k5) (S) (k2k4k6) (P) = [Eo] [------------------ - -------------------] t t

    vt

    - Si en t ordenamos las contantes y sacamos factor comn, podemos escribir:

    t = (k2k4 + k2k5 +k3k5) + k1(k3k4k5) (S) + k6(k2k3k4) (P)


    Cte.

    CoefS

    CoefP

    Usando estas simplificaciones, e introduciendo otras, y operando adecuadamente.


    * Expresin de la ecuacin de velocidad total en presencia de P y S

    VmS KmP[S] VmP KmS[P] vt = ---------------------------------------------KmS KmP + KmP[S] + KmS[P]


    Misma ecuacin que la obtenida en mediante la resolucin de sistemas de ecuaciones diferenciales en el estado estacionario

    Resumen
    El anlisis cintico de M-M est referido a velocidades iniciales
    En el interior celular in vivo el producto de la reaccin est siempre presente, habr que tener en cuenta la velocidad total no las velocidades iniciales Velocidad total es la suma de las velocidades unidireccionales Las ecuaciones referidas a las velocidades totales solamente se resuelven en el estado estacionario: Variacin de las concentraciones de las diferentes especies qumicas en las que se encuentre la enzima respecto al tiempo es cero Resolucin de las ecuaciones de velocidad total se realizada con diferente aproximaciones: Estado estacionario,se obtiene una expresin de velocidad total en funcin de las constantes cinticas Vms, Vmp, Kms Kmp y de las concentraciones de P y S. Resolucin grfica propuesta por King y Altman mtodo sencillo permite la resolucin de planteamientos enzimticos complejos

    VmaxS KmP(S) - VmaxP KmS(P) vt = ------------------------------------------------KmS KmP + KmP(S) + KmS(P)


    Relacin de Haldane, cuando la velocidad total es cero es decir en condiciones de equilibrio relaciona la constante de equilibrio con las constantes cinticas de la enzima (estudiadas de acuerdo con las condiciones de M-M).

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