Scribd Logo
Cargar

¡Te damos la bienvenida a Scribd!

  • 566 vistas

    Microlinfotoxicidad en Placas de Terasaki

    Cargado por

    Nickolas Quichiz
    Este documento describe el método de microlinfotoxicidad en placas de Terasaki para detectar anticuerpos contra diferentes alelos del HLA. Se explica que involucra la extracción de sangre del paciente, el aislamiento de células mono nucleares, la siembra en placas sensibilizadas con sueros contra alelos HLA y la incubación con complemento para lisar las células que unan anticuerpos. Se observa microscópicamente para clasificar los resultados. También describe una variante que usa anticuerpos anti-inmunoglobulinas humanas.

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como PPTX, PDF, TXT o lea en línea desde Scribd

    Microlinfotoxicidad en Placas de Terasaki

    Cargado por

    Nickolas Quichiz
    566 vistas8 páginas
    Este documento describe el método de microlinfotoxicidad en placas de Terasaki para detectar anticuerpos contra diferentes alelos del HLA. Se explica que involucra la extracción de sangre del paciente, el aislamiento de células mono nucleares, la siembra en placas sensibilizadas con sueros contra alelos HLA y la incubación con complemento para lisar las células que unan anticuerpos. Se observa microscópicamente para clasificar los resultados. También describe una variante que usa anticuerpos anti-inmunoglobulinas humanas.

    Descripción original:

    Título original

    MICROLINFOTOXICIDAD EN PLACAS DE TERASAKI.pptx

    Derechos de autor

    © © All Rights Reserved

    Formatos disponibles

    PPTX, PDF, TXT o lea en línea desde Scribd

    ¿Le pareció útil este documento?

    ¿Este contenido es inapropiado?

    Este documento describe el método de microlinfotoxicidad en placas de Terasaki para detectar anticuerpos contra diferentes alelos del HLA. Se explica que involucra la extracción de sangre del paciente, el aislamiento de células mono nucleares, la siembra en placas sensibilizadas con sueros contra alelos HLA y la incubación con complemento para lisar las células que unan anticuerpos. Se observa microscópicamente para clasificar los resultados. También describe una variante que usa anticuerpos anti-inmunoglobulinas humanas.

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como PPTX, PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
    Descargar como pptx, pdf o txt
    566 vistas8 páginas

    Microlinfotoxicidad en Placas de Terasaki

    Cargado por

    Nickolas Quichiz
    Este documento describe el método de microlinfotoxicidad en placas de Terasaki para detectar anticuerpos contra diferentes alelos del HLA. Se explica que involucra la extracción de sangre del paciente, el aislamiento de células mono nucleares, la siembra en placas sensibilizadas con sueros contra alelos HLA y la incubación con complemento para lisar las células que unan anticuerpos. Se observa microscópicamente para clasificar los resultados. También describe una variante que usa anticuerpos anti-inmunoglobulinas humanas.

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como PPTX, PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
    Descargar como pptx, pdf o txt
    de 8

    UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER

    ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE


    TECNOLOGA MDICA EN
    LABORATORIO CLNICO Y ANATOMA
    PATOLGICA

    INMUNOLOGIA

    MICROLINFOTOXICIDAD
    EN PLACAS DE TERASAKI
    PROFESOR: CARLOS BALTODANO HONORES
    ALUMNO: QUICHIZ CHINGA JORGE NICOLS

    FUNDAMENTO
    Este mtodo se basa en el empleo de anticuerpos especficos
    contra
    diferentes alelos del HLA (molculas de clase I y de clase II).
    Cuando estos anticuerpos reconocen al antgeno contra el cual
    son
    especficos, y en presencia de complemento, se produce la
    lisis celular

    COMO SE REALIZA
    Extraccin de sangre del paciente
    Aislamiento de clulas mono nucleares (centrifugacin en

    gradiente de Ficoll)
    Siembra de clulas en fosas de placas de Terasaki
    previamente sensibilizadas con sueros policlonales contra
    diferentes alelos del HLA.
    Incubacin (unin de los Ac a las molculas de clase I o de
    clase II del HLA)
    Agregado de fuente de complemento (suero de conejo)
    Incubacin y lisis de clulas que unieron Ac en la etapa
    anterior
    Agregado de un colorante de contraste para diferenciacin
    de clulas vivas y muertas (diacetato de fluorescena)
    Observacin microscpica y clasificacin.

    VARIANTE DE LA PRUEBA:
    METODO DE LA ANTIINMUNOGLOBULINA
    Extraccin de sangre del paciente
    Aislamiento de clulas mononucleares (centrifugacin en

    gradiente de Ficoll)
    Siembra de clulas en fosas de placas de Terasaki
    Incubacin (unin de los Ac a las molculas de clase I del
    HLA)
    Incubacin con IgG de conejo anti-inmunoglobulinas
    humanas
    Agregado de fuente de complemento
    Incubacin y lisis de clulas que unieron Ac
    Agregado de un colorante de contraste para diferenciacin
    de clulas vivas y muertas (diacetato de fluorescena)
    Observacin microscpica y clasificacin o "scoring

    VENTAJAS
    Tcnica sencilla que requiere poco equipamiento

    sofisticado (microscopio invertido de pifluorescencia)

    DESVENTAJAS
    La tcnica debe realizarse sin interrupcin desde su inicio hasta su

    finalizacin, dado que se trabaja con clulas viables.


    No se detectan Ac no fijadores de complemento, excepto en la variante
    que emplea la anti-inmunoglobulina
    Alto costo
    Baja resolucin
    No existen sueros contra alelos poco frecuentes
    La mayora de los sueros no son monoespecficos y adems presentan
    reactividad cruzada con otros alelos, la alta homologa e identidad entre
    muchos eptopes de las molculas de clase I y de clase II del HLA permite
    agrupar a estas molculas en "grupos de reactividad cruzada" o "CREGs"
    No adecuado para tipificacin de donantes cadavricos (en especial en el
    caso de trasplante de mdula sea)
    Interpretacin difcil por escasez de sueros mono especficos y
    reactividades cruzadas
    No se detecta homocigosis (en general se informa 1 alelo y el otro se
    informa como "blanco")
    Ambigedades (no se pueden definir determinadas combinaciones de
    alelos)

    También podría gustarte