ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE

MEDICINA HUMANA

Curso: Noxas y Respuestas I

PRACTICA N° 03:
Género Bacillus
Género Clostridium

Docente:
Fecha: 07/09/2021
 LOGRO DEL APRENDIZAJE
Al término de la sesión, el alumno
reconoce las características más
importantes del género Bacillus y del
género Clostridium al microscopio y
en pruebas bioquímicas.
 o Bacilos Gram positivos esporulados.
o Aeróbicos o anaerobios facultativos.
Género o Ubicuo en la naturaleza
o La mayoría son contaminantes
saprófitos o de la microbiota.
o
Bacillus Catalasa positivos (la
mayoría).
o Algunos son usados en la industria
(bacitracina, polimixina, alcoholes,
vitaminas, enzimas, etc.
• Especies más importantes:
• B. anthracis: Carbunco
• B. cereus: Gastroenteritis
• B. subtilis: No
patógeno (Inf. oportunistas)
Género Bacillus
 Bacillus anthracis
• Bacilos Gram +, grandes, rectos de 3 a 5 um X 1.0
a 1.2 um.
• Extremos rectangulares
• Forma esporas centrales no deformantes
elipsoidales. Viable por años en los pastos.
• Inmóvil, Catalasa +
• Cápsula polipéptidica prominente (ácido
glutámico)
• Aerobio: desarrollo fácil en medios, con
colonias
grandes, rugosas, irregulares.
• No hemolítico.
• Muy sensible a la Penicilina que le produce
cambios morfológicos.
• Produce el carbunco.
 Bacillus anthracis
Factores de Virulencia
•Cápsula: polipeptídica (ácido poli-D-glutámico),
codificada por un plásmido. Antifagocítica

•Exotoxina: 3 componentes
Ag. Protector (AP): Inmunogénico que se une a los
receptores de las células del huésped y permite el
ingreso.
Factor edematógeno (FE): Actúa sobre adenilciclasa
que produce acumulación de líquidos
Factor letal (FL): metaloproteasa que estimula la
liberación de citoquinas proinflamatorias. Factor
necrosis.
 Epidemiología de Bacillus anthracis
 Principalmente una enfermedad en herbívoros.
 Transmitido al humano por contacto directo
con
productos animales (pelo y lana).
 Amenaza latente
• Importaciones de productos
contaminados provenientes de países endémicos.
• Usualmente clasificada como enfermedad ocupacional.
• Veterinarios y trabajadores del campo, esquiladores de
ovejas y trabajadores de cuero y pieles.

 BIOTERRORISMO 2001:
• 22 casos (50% x inhalación y 50% cutáneos)
• Cinco casos pulmonares murieron.
Observación de cápsula de B. anthracis,
coloreada con Hiss (frotis de lesión
dérmica)
Acción hemolítica y características de la
colonia de Bacillus anthracis y B. subtilis
 Bacillus anthracis: Profilaxis
o Vacunación del ganado y personal de riesgo.
o Incineración de animales muertos por carbunco.
o Eliminación de esporas del suelo es difícil.
o En contactos (bioterrorismo): ciprofloxacina.
* Vacuna:
-En animales: vacuna viva atenuada de una cepa
avirulenta sin cápsula
-En humanos: Filtrado estéril de cultivo de una cepa
avirulenta.
. Trabajadores de laboratorio
. Empleados en hilados de lanas de cabra y oveja.
. Miembros activos militares.
 Bacillus cereus
• B. cereus visto al microscopio, es un bastón alargado, Gram
positivo con flagelos peritricos. Una endospora simple
puede formarse en posición central o paracentral sin
deformar la pared celular. El organismo esporula libremente
en muchos medios bajo condiciones bien aireadas, aunque
las células vegetativas pueden crecer anaeróbicamente.

• Esta bacteria es frecuentemente encontrada como

saprofita en el suelo, agua, vegetación y aire, desde los
cuales se transfiere muy fácilmente a los alimento

• B. cereus produce endosporas que sobreviven a la

pasteurización y son resistentes a varios
desinfectantes.
 Bacillus cereus
PATOGENIA
1)Forma diarreica:
• Producida por la toxina diarrogénica o termolábil, que
es liberada en la fase logarítmica de crecimiento.
• Periodo de incubación de 8 a 16 horas, causa diarrea y dolor
abdominal. El proceso dura 24 horas.
• Los principales alimentos en donde se puede encontrar son
carnes y productos derivados del pollo, arroz, sopas
deshidratadas, embutidos, especias, en los productos derivados
de la vainilla, cereales, harinas, clara de huevo deshidratada, y
cooler de durazno y piña.
2) Forma emética:
• Causada por la ingestión de la toxina cereulida o termoestable
que es liberada en la fase estacionaria del crecimiento.
• Periodo de incubación de 1 a 5 horas, produce vómitos y
nauseas, el proceso dura 24 horas.
VIDEO: Bacillus anthracis

https://www.youtube.com/watch?v=2MRsk0

RtFIw
 o Bacilos Gram positivos esporulados.
o Anaerobios estrictos.
o Ubicuos: medio ambiente, FN de
animales y hombre.
Género o Infecciones de origen exógeno (a
Clostridium veces endógeno).
o Nulo o escaso poder invasor.
o Principal factor de
virulencia. Producción de toxinas.
o Especies importantes:
 Clostridium botulinum
 Clostridium tetani
 Clostridium perfringens
 Clostridium difficile
 Clostridium tetani
• Bacilos Gram positivo (a veces aparece
como negativo).
• Esporas terminales (palillo de tambor)
• Anaerobio estricto
Habitat: suelo, intestino de hombre
y animales.
Origen: exógeno. Inoculación de esporas en
heridas.
• Carece de poder invasor.
Factor de virulencia: producción de la toxina
tetánica.

Toxina termolábil. Puede transformarse en toxoide

(vacuna).
Neurotoxina: Actúa a nivel de la placa motora.
Parálisis espástica.
 Clostridium tetani: Patogenia

Clostridium tetani: Patogenia

 Clostridium tetani: diagnóstico
Frecuentemente clínico.
Diagnóstico microbiológico:
 Tinción de Gram.
 Cultivo e identificación.
 No es posible detectar la toxina.

Aunque el aislamiento del microorganismo por cultivo sólo se

obtiene en el 30% de los casos.

Cultivos en anaerobiosis:
- Agar sangre
- Agar yema de huevo
- Indol +
- Hidroliza la gelatina
 Diagnóstico microbiológico
Las muestras comprenden material de las heridas, pus y
tejido.
-Los frotices al Gram se aprecia bacilos Gram positivos
grandes
-Las muestras se inoculan en medios con carne picada y
glucosa, medios con tioglicolato y agar sangre e
icubados en condiciones anaeróbicas.
- Para obtener cultivos puros se siembra en agar
sangre y en agar yema de huevo.
-La identificación se realiza por pruebas bioquímicas y la
identificación final depende de la producción de toxinas
y su neutralización de las antitoxinas específicas.
Se observa como bacilos delgados, esporas
redondas terminal que deforma a la bacteria
(apariencia de palillos de tambor).

En cultivos frescos los bacilos se tiñen de azul,

pero, tras 24 horas de crecimiento, tienden a
perder la coloración de Gram y aparecen
teñidos de rojo
Clostridium tetani: profilaxis y tratamiento
Profilaxis:
- Ante sospecha clínica, tratamiento inmediato:
- Medidas de soporte (mantener funciones vitales y mitigar
síntomas)
- Inmunización pasiva
- Vacunación.
- Medidas quirúrgicas + antibióticos.
Tratamiento:
-Desbridación quirúrgica inmediata y extensa del área
afectada y la escisión de todo el tejido desvitalizado donde los
microorganismos tienden a proliferar .
-Al mismo tiempo se emplean antimicrobianos como la
penicilina y el metronidazol; y oxígeno hiperbárico para
detoxificar al paciente.
-También se puede utilizar antitoxinas polivalentes que
contienen anticuerpos contra varias toxinas.
 Clostridium botulinum
Grupo heterogéneo de BGP. Anaerobios estrictos.
Ubicuos: suelo,aguas. Pueden contaminar
alimentos (vegetales), heridas y colonizar el tracto
digestivo.
Origen exógeno: Ingesta de alimentos.
Carecen de poder invasor.
Factor de virulencia: Producción la toxina
de botulínica.

Toxina
Termolabiles. Pueden desarrollarse toxoides.
Existen 8 tipos antigénicamente diferentes (A-
G). Enfermedad humana asociada a tipos A, B, E
(F).
Neurotoxina: Aparición de parálisis flácida de
la musculatura esquelética y fallo parasimpático.
 Clostridium botulinum
Diagnóstico
 Clostridium botulinum
C
Bacilos Gram + Colonias grandes
 Clostridium botulinum
Profilaxis
- Procesamiento adecuado de las conservas.
- Evitar la germinación: pH ácido /
temperaturas
inferiores a 4ºC.
-Destrucción de la toxina preformada: Temperaturas
superiores a 80ºC, 20 min.
- Vacunas.

Tratamiento
-Vaciar el estómago para eliminar la toxina.
-Administrar antitoxina botulínica trivalente para
neutralizar la toxina en circulación y la ventilación
asistida.
- Administrar Penicilina o metranidazol.
 Video: Clostridium

https://www.youtube.com/watch?v=JBzaGb
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 Clostridium perfringens (C.welchii)
 Bacilo Gram positivo anaerobio poco estricto
(aerotolerante)
 Rara vez forma esporas
 De rápido crecimiento:
 Doble halo de hemólisis.
 Se subdivide en 5 tipos: A-E.
 Se encuentra en los intestinos de humanos y animales, piel,
zona perineal, boca, aparato genital femenino, suelo, agua,
alimentos (carnes que no están bien cocinadas.

Infecciones en humanos: tipos A y C.

Origen: exógeno.
•Inoculación de esporas en heridas: infecciones hísticas.
•Ingesta de alimentos contaminados: toxiinfección
alimentaria.
Clostridium perfringens
 Clostridium perfringens
Factores de virulencia:
Toxina alfa (tipo histotóxica.
A): Dermonecrotizante y
hemolítica.
Toxina beta (tipo C): necrotizante.

Enterotoxina (tipo A): enterotóxica.

Otras enzimas:
•Hemolisina.
•Colagenasa.
•Hialorunidasa.
•Desoxirribonucleasa.
 Clostridium perfringens
Patogenia
 Clostridium perfringens

Infecciones de tejidos blandos:

• Celulitis anaerobia.
• Miositis supurativa.
• Gangrena Gaseosa.
• Endometritis.
Intoxicación alimentaria
Enteritis necrotizante.
Septicemia

Infecciones de tejidos
blandos:
Ante sospecha clínica: rápido tratamiento.
Confirmación: Diagnóstico microbiológico.
Tinción de Gram.
Cultivo.
Intoxicaciones alimentarias:
Bacterias en alimentos o heces.
Enterotoxina en heces.
 Clostridium perfringens
Diagnóstico
Coloración Gram esporas coloreadas
(tinción de Wirtz Conklin).
Cultivo en medio Cultivo en Caldo de
Thioglicolato Robertson.
Colonias redondas y lisas de 2 a 3 mm rodeadas por una
zona de hemólisis completa
 Clostridium difficile
BGP anaerobios estrictos.
Ubicuos: Flora ambiental (hospitales,
geriátricos).
FN tracto intestinal (2-4%).
70% Neonatos.
20- 25 % Hospitalizados.
Producción de las toxina Ay (cepas no
B toxigénicas).

Patógeno oportunista.
Origen endógeno/exógeno.
Productores de cuadros de gravedad
variable:
 Diarreas asociadas a tratamientos
antimicrobianos.
 Colitis seudomembranosa.
 Clostridium difficile
Diagnóstico de Laboratorio
- Aislamiento del microorganismo.
-Detección de la citotoxina o enterotoxina en
heces de pacientes.

Tratamiento
- Se debe suspender los antibióticos
implicados.
-Tratamiento con metronidazol y vancomicina en
las enfermedades graves.
-Limpiar a fondo la habitación del hospital después
del alta de pacientes.
Muchas Gracias