Cultivo de Microorganismos

Cultivo de
microorganismos
Aux. José María Tarima
Objetivos
Objetivos:
● Conocer los diferentes medios de cultivo utilizados para el análisis
bacteriológico
● Clasificar los medios de cultivo de acuerdo a su consistencia
● Diferenciar los tipos de incubación
● Realizar la siembra en los medios de cultivo
● Reconocer el desarrollo de las bacterias en los medios de cultivo al
conservar las colonias
Análisis bacteriológico
1er día 1er día 1er día 2do día 2do día 3er día
Examen Tinción de Siembra o

Directo Gram o Ziehl- Identificación Antibiograma Informe final
Cultivo
Neelsen
Total: 48 hrs
“
El cultivo es el proceso de
proliferación de microorganismos
al proporcionarles un entorno con
condiciones apropiadas.
”
Cultivo o siembra de microorganismos
Los medios de cultivo, son una mezcla de nutrientes que,

en concentraciones adecuadas y en condiciones físicas
óptimas que permiten el crecimiento de los
microorganismos.
Tipos de medio de cultivo
Existen tres clases de

medios de cultivo:
▰ Sólidos
▰ Semisólidos
▰ Líquidos
Medios de cultivo sólidos
Se utilizan para obtener bacterias

aisladas por la formación de
colonias sobre la superficie del
medio de cultivo y para el
estudio de la morfología de las
colonia.
Se les aplica una sustancia
solidificante, suele ser el
compuesto agar-agar.
Ejemplos de medios sólidos
Agar Sangre:
▰ Se usa sangre de carnero, conejo o
caballo. En ocasiones sangre
humana.
▰ En él se puede observar la
capacidad hemolítica de una
bacteria.
▰ Crecimiento de prácticamente
todos los microorganismo (no es
selectivo).
Agar Chocolate:
▰ Es una variante del agar sangre,
los eritrocitos han sido lisados en
base de calor.
▰ Se usa para el crecimiento de
bacterias respiratorias, ejemplo:
Haemophilus influenzae.
▰ No es selectivo.
Agar MacConkey:
▰ Es un medio selectivo y diferencial.
▰ Identificación de enterobacterias y
bacilos Gram (-).
▰ Contiene sales biliares que inhiben el
desarrollo de bacterias Gram (+).
▰ Diferencia las bacterias de acuerdo a si
pueden o no fermentar lactosa.
▰ Lac+(rosado): Escherichia coli,
Enterobacter, Klebsiella.
▰ Lac-(amarillo): Salmonella, Proteus,
Shigella.
Agar Müller-Hinton:
▰ Utilizado en al antibiograma.
▰ Recomendado por la OMS como
estándar en pruebas de
susceptibilidad a ATB.
▰ Usado también en el cultivo de
Neisseria y Moraxella.
▰ En él pueden crecer casi todos los
microorganismos (no es
selectivo).
Medio Lowenstein-
Jensen:
▰ Se lo usa en el crecimiento de
micobacterias (M. tuberculosis, M.
leprae).
▰ Tiene como base de solidificación
huevo coagulado y no agar como
los otros medios.
▰ Un cultivo de micobacterias tarda
entre 4 a 6 semanas.
Medios de cultivo líquidos
Se denominan caldos y
contienen los nutrientes en
una solución acuosa.
Los primeros medios de
cultivo eran líquidos.
Cuando hay crecimiento
bacteriano se observa
turbidez.
Métodos de incubación
La incubación se realiza
utilizando dispositivos
para controlar la
temperatura, la
humedad y otras
condiciones en las que se
está cultivando un cultivo
microbiológico.
Tarda 24 hrs.
Estufa o Incubadora: Jarra Gaspak:

Se las utiliza para el cultivo de bacterias Cultivo de bacterias anaerobias.
aerobias.
Frasco de Vela Encendida:

Para el cultivo de bacterias
microaerófilas.
Material para realizar el cultivo
Pasos para realizar el cultivo
1. Pasar el asa de platino por el

mechero hasta que esté
incandescente. Esperar 3-5
segundos.
2. Recolectar muestra biológica.
3. Realizar el estriado en la caja de
Petri con un ángulo de 45º.
4. Cerrar la caja de Petri y llevar a
incubar.
Cuestionario
- ¿Qué pasos incluye el análisis bacteriológico?
a)…Examen directo…. b).Tinción de Gram/Ziehl-Neelsen. c)…Cultivo…... d)

…Identificación…. e)…Antibiograma… f)…Informe final…
- ¿Qué es un medio de cultivo?
……Es una mezcla de nutrientes que en condiciones adecuadas y en

condiciones físicas óptimas permiten el crecimiento de los
microorganismos…….
Cuestionario
- ¿De acuerdo a su consistencia como se clasifican los medios de cultivo?
…Líquidos….. ……Sólidos……
- ¿Qué material utiliza para realizar un cultivo?
…Asa de platino……. ………Mechero…….
…Caja de Petri…… ……Incubadora……..

Cuestionario
- ¿Una vez realizada la siembra, donde coloca la caja Petri con la muestra sembrada?
..Estufa o incubadora...
- ¿Cuánto tiempo se queda en la estufa?................ a qué temperatura? ……………
- 24hrs 35-37ºc
- Cómo se clasifican los microorganismos de acuerdo a sus requerimientos de oxígeno?
…Aerobios…… …Anaerobios…….. …Microaerófilos……

- Al término de las 24 horas que vamos a observar en los medios de cultivo?
Si es sólido: ………………. Si es líquido:……………………..

Colonias Turbidez
- ¿Qué métodos de incubación conoce?
……Estufa (aerobio)………. ……Jarra Gaspak (anaerobio)…….. …

Vela encendida (microaerófilo)………
Cuestionario
- ¿Que significa el término “bacteria aerobia”?
......Son bacterias que requieren oxígeno para vivir y proliferar........

- ¿Que significa el término “bacteria anaerobia”?
......Son bacterias que no requieren de oxígeno para vivir y proliferar....

- ¿Qué significa “bacteria microaerófila”?.
…..…Son bacterias que requieren 5-10% de CO2 para vivir y proliferar, es

decir, requieren una menor concentración de oxígeno y más dióxido de
carbono………
Gracias

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Examen Tinción de Siembra o

Los medios de cultivo, son una mezcla de nutrientes que,

Existen tres clases de

Se utilizan para obtener bacterias

Estufa o Incubadora: Jarra Gaspak:

Frasco de Vela Encendida:

1. Pasar el asa de platino por el

- ¿Qué pasos incluye el análisis bacteriológico?

a)…Examen directo…. b).Tinción de Gram/Ziehl-Neelsen. c)…Cultivo…... d)

- ¿Qué es un medio de cultivo?

……Es una mezcla de nutrientes que en condiciones adecuadas y en

- ¿De acuerdo a su consistencia como se clasifican los medios de cultivo?

- ¿Qué material utiliza para realizar un cultivo?

…Asa de platino……. ………Mechero…….

…Caja de Petri…… ……Incubadora……..

…Aerobios…… …Anaerobios…….. …Microaerófilos……

Si es sólido: ………………. Si es líquido:……………………..

……Estufa (aerobio)………. ……Jarra Gaspak (anaerobio)…….. …

- ¿Que significa el término “bacteria aerobia”?

......Son bacterias que requieren oxígeno para vivir y proliferar........

......Son bacterias que no requieren de oxígeno para vivir y proliferar....

…..…Son bacterias que requieren 5-10% de CO2 para vivir y proliferar, es

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