UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

ENZIMAS

Q.F Analista Bioquímico Clínico: Bertha E. Ramos H.

CONTENIDO
 - Generalidades
 - Fosfatasas
 - Amilasa
 ENZIMAS

Son proteínas con actividad catalítica muy

específica, que aceleran considerablemente la
velocidad de casi todas las reacciones que
tienen lugar en el organismo y determinan el
sentido de ellas. La sustancia sobre la cual
actúa la enzima se denomina substrato.
Enzimas

 Son sustancias reguladoras en el cuerpo de los seres

vivos, por lo general disminuyendo la energía
inicial requerida para poner en marcha la reacción .
 Las enzimas son indispensables para la vida y
catalizan alrededor de 4000 reacciones químicas
conocidas, siempre que sean estables las
condiciones de pH, temperatura o concentración
química, ya que las enzimas al ser proteínas, pueden
también desnaturalizarse y perder su actividad.
COMPONENTES DE UNA
ENZIMA
 - Sitio Activo
 - Sitio Alostérico
 - Grupo Prostético
 - Coenzima
Componentes
 Sitio Activo : Es zona de la enzima en la que se
une el sustrato para ser catalizado
 Sitio Alostérico : Lugar donde se une un producto o
metabolito a la enzima.
 Grupo Prostético : Es el componente no
aminoácido que forma parte de la estructura de las
heteroproteínas o proteínas conjugadas, estando
unido covalentemente a la apoproteína.
Componentes
 Coenzima : Son pequeñas moléculas orgánicas no
proteicas que transportan grupos químicos entre
enzimas.
 Cofactores : Es una molécula pequeña necesaria
para la actividad de muchas enzimas. Los de
naturaleza orgánica son coenzimas.
 CLASIFICACION DE LAS ENZIMAS
 Se establecen 6 clases de enzimas: En función de su acción catalítica
específica.

 1.- Oxido - reductasa: Actúan en reacciones de oxido reducción.

Ejemplo: Deshidrogenasas, Citrocromo Oxidasa .
 2.- Transferasa: Cataliza la transferencia de un grupo de una
sustancia a otra. Ejemplo: Aminotransferasa.
 3.- Hidrolasas: Producen hidrólisis. Ejemplo: Fosfatasas, Péptidasas.
 4.- Liasas: Añaden grupos o ligaduras dobles o quitan grupos de
sustratos. Ejemplo: Fumarato- Hidratasa.
 5.- Isomerasas: Transforman el sustrato en un isómero. Ejemplo:
Fosfogluco - mutasa.
 6.- Ligadas: Catalizan la unión de aminoácidos con el ácido
ribonucleico soluble (RNA-S).
ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
 La enzimología clínica es la aplicación del conocimiento de
las enzimas, en su mayoría proteínas que aumentan o aceleran
la velocidad de las reacciones químicas, son de gran ayuda al
diagnóstico, tratamiento, y pronóstico de la enfermedad.
 ¿ Cuál es la importancia clínica de las enzimas ?
 Las enzimas son proteínas complejas que producen un cambio
químico específico en todas las partes del cuerpo. Por ejemplo
pueden ayudar a descomponer los alimentos que consumimos
para que el cuerpo los pueda usar. La coagulación de la sangre
es otro ejemplo del trabajo de las enzimas.
 PRINCIPALES ENZIMAS DE INTERÉS
CLÍNICO

 En el Laboratorio de Análisis Bioquímicos y Clínicos

se determinan la actividad de las siguientes enzimas :
 - Fosfatasas
 - Amilasa
 - Lipasa Pancreática
 - Lactato deshidrogenasa
 - Creatín kinasa
 - Colinesterasas
 - Transaminasas
 FOSFATASAS

 Son enzimas de diverso origen y localización.

Pertenecen al grupo de las hidrolasas y dentro de
éstas específicamente al grupo de las fosfo
monoesterasas .
 Estas enzimas se caracterizan por su capacidad de
hidrolizar ésteres del ácido fosfórico .
 Tanto la fosfatasa ácida como la alcalina actúan
sobre el mismo substrato si no que se les denomina
ácida y alcalina por que c/u tiene su pH óptimo.
CLASIFICACION DE
FOSFATASAS
 FOSFATASA ACIDA pH óptimo : 5
 FOSFATASA ALCALINA pH óptimo : 9.2 a
9.6
 FOSFATASA ACIDA .-Comprende un grupo de isoenzimas.
fosfatasa con actividad óptima a pH 5.
 Se encuentran presentes en casi todos los tejidos del organismo,
siendo particularmente altas las cantidades de éstas enzimas en :
 - Próstata
 - Hígado
 - Estómago
 - Musculo
 - Bazo
 - Plaquetas
 - Eritrocitos
DIFERENCIAS ENTRE LAS ISOENZIMAS

 Las distintas isoenzimas se diferencian entre si por

su :
 - pH óptimo
 - peso molecular y
 - requerimiento de activadores e
 - inhibidores

FOSFATASA ACIDA
PROSTATICA
 La fosfatasa ácida prostática constituye un valioso examen
auxiliar en el diagnóstico precoz de cáncer prostático, una
de las formas neoplásicas de mayor morbilidad.
 La actividad en suero es normalmente baja .El interés
clínico de la determinación de la fosfatasa ácida se ha
centrado principalmente en el estudio de la fracción
prostática.
 Se ha visto que en individuos con carcinoma de prostáta, se
produce una elevación de los valores de la enzima en suero,
como consecuencia del aumento de la isoenzima prostática.
Esta elevación dependerá del estadio de la enfermedad.
AUMENTO DE LA ACTIVIDAD DE
FOSFATASA ACIDA

 Cuando no se ha producido metástasis y el tumor se

encuentra circunscripto a la glándula, el incremento será
pequeño o nulo, en cambio éste será importante cuando
exista compromiso a otros tejidos, especialmente óseo.
 Aumentos en la actividad de fosfatasa ácida se han
demostrado en :
 - Enfermedades hepáticas
 - Enfermedades renales
 - Mieloma múltiple
 Sin embargo en estos casos la determinación resulta menos
característica de la patología.
METODOS Y VALORES DE REFERENCIA DE
FOSFATASA ACIDA

 MÉTODOS de Valoración : Colorimétricos para la determinación de

la actividad enzimática
 de fosfatasa ácida y prostática sérica .
 Valores de Referencia :
 Fosfatasa Ácida Total : 0.9 - 9 U/L
 Fosfatasa Ácida Prostática : hasta 1.08 U/L
 Valores observados en diversas afecciones :
 Carcinoma Prostático:
 - Fosfatasa Acida Total : 9 - 3,000 U/L
 - Fosfatasa Acida Prostática : 2 - 3,600 U/L

FOSFATASA ALCALINA
Actúa sobre pH óptima de 9.2 – 9.6, varía según el
substrato sobre el cual actúa y la naturaleza del
amortiguador presente.
Hidroliza los monoésteres del ácido fosfórico

 En el adulto ésta enzima proviene en parte del :

 - Hígado , y del hueso
 - Sistema retículo endotelial y vascular
ACTIVIDAD DE LA FOSFATASA ALCALINA

 La actividad sérica de fosfatasa alcalina ósea en

condiciones normales alcanza su mayor actividad en los
niños en edad de crecimiento ( llegando a triplicar los
valores del adulto ), debido a que ésta isoenzima se
localiza en los osteoblastos ( relacionado con la
calcificación y la formación de estructuras óseas ).
 También es fisiológico el aumento que se produce al
final del primer trimestre del embarazo, a expensa de la
isoenzima placentaria que en éste período alcanza
niveles máximos, aproximadamente el doble de los
valores normales.
PATOLOGIAS QUE AFECTAN LA
ACTIVIDAD SERICA DE FOSFATASA
ALCALINA
 Entre las Patologías que afectan la actividad sérica de
fosfatasa alcalina se pueden citar :
 - Carcinoma metástasico en hígado y hueso
( productores de enzima )
 - Coléstasis biliar
 - Fenómenos osteoblasticos
 - Transtornos de mala absorción acompañados de
lesiones ulcerosas ( donde la deficiencia de Vit. D produce
osteómalasia con el consecuente aumento de la fosfatasa
alcalina ósea )
 Valores de Referencia : 68 – 240 U/L
AMILASA

 Es una enzima que actúa sobre los hidratos de

carbono.

 Producida principalmente por:

 - El páncreas exocrino
 - Glándulas salivales ( es más específica ya que
 ésta hidroliza con mayor rapidez la maltotriosa,
 formando glucosa y maltosa )
 Se encuentra elevada en el suero de pacientes con
pancreatitis aguda, alcanzando los valores más elevados
entre las 24 – 30 horas posteriores al ataque, declinando luego
para volver a los niveles normales entre 24 - 48 horas
siguientes.
 Los niveles elevados en suero casi siempre son transitorios,
corresponden a episodios agudos y solo duran 3 días, pero en
la orina persiste hasta 10 días.
 También se encuentran valores aumentados en pacientes con
úlcera gástrica o duodenal, la enzima se libera a través de la
perforación, se absorbe por el peritoneo y aumenta su nivel en
sangre.
¿CUANDO AUMENTA LA ACTIVIDAD DE
AMILASA?

 Cuando hay ruptura de trompa uterina en embarazo

ectópico se libera gran cantidad de amilasa y se
produce hiperamilasemía.
 La aplicación de morfina produce contracción del
esfínter de Oddi y eleva los niveles hasta 900
unidades, dato que se debe tener en cuenta cuando
dosifican a pacientes con posible pancreatitis
aguda y que han recibido este tipo de analgésico.
OTRAS PATOLOGIAS EN LAS QUE AUMENTA
LA ACTIVIDAD DE AMILASA

 También se encuentran valores aumentados en pacientes con :

 - Obstrucción intestinal
 - Obstrucción de conductos biliares
 - Hipertiroidismo
 - Carcinoma de cabeza de páncreas
 - En general en cualquier caso de abdomen agudo
 - Intervención quirúrgica en regiones próximas al páncreas .

 Las parotiditis bacterianas y paperas que producen bloqueo de la

secreción de amilasa salival, se asocian también con elevación de
los niveles de amilasa sérica.
METODOS DE VALORACION VALORES DE
REFERENCIA DE AMILASA

 METODO DE VALORACION : Método cinético

a 405 nm para la determinación de amilasa en
líquidos biológicos con sustrato definido.
 VALORES DE REFERENCIA de AMILASA :
 A 25 ° C : Suero : hasta 84 U/L
 Orina : hasta 455 U/L
LIPASA
 Actúa sobre los lípidos.

 Producida principalmente por las células acinosas

del páncreas y se vierte al duodeno con el jugo
pancreático con el fin de hidrolizar las grasas en el
tubo digestivo, opera en forma óptima a un pH
ácido y en presencia de bilis hidroliza los
Triglicéridos que se encuentra en forma micelar.
SIGNIFICACION CLINICA

 Se observa aumento en suero de pacientes con :

 -Pancreatitis aguda, existiendo marcado
 paralelismo con el aumento de la actividad de la
amilasa.
 - Carcinoma del páncreas
 - Peritonitis aguda
 - Obstrucción intestinal alta .
METODO Y VALORES DE REFERENCIA DE
LIPASA

 METODO DE VALORACION : Método

Turbimétrico
 cinético UV
 VALORES DE REFERENCIA : 25°C - 30°C : 200
U/L