BIOLABO

www.biolabo.fr BIO-FIBRI Dos age c hronométri que

FABRICANT :
BIOLABO SAS, du fibri nogène
Les Hautes Rives Pour la détermination de la concentration en fibrinogène du plasma humain
02160, Maizy, France
REF 13450 R1 6 x 4 mL R2 1 x 125 mL
REF 13451 R1 6 x 10 mL R2 2 x 150 mL
SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES
Tel : (33) 03 23 25 15 50
USAGE IN VITRO
Fax : (33) 03 23 256 256

INTERET CLINIQUE (1) (2) PREPARATION DES REACTIFS

Le fibrinogène est la principale protéine plasmatique affectant la vitesse • Réactif (flacon R1)
de sédimentation. La concentration plasmatique en fibrinogène est Utiliser un objet non coupant (pointe de spatule) pour soulever la
augmentée dans des cas d’inflammation, de nécrose tissulaire, de capsule aluminium et la déchirer. Reconstituer avec le volume d'eau
diabète ou d’obésité. L’administration d’œstrogène et la grossesse déminéralisée indiqué sur l’étiquette.
conduisent également à une élévation du fibrinogène plasmatique. Une • Tampon pour dilution du plasma (flacon R2) : prêt à l’emploi
augmentation du fibrinogène plasmatique constitue un facteur de risque
pour les maladies coronariennes ou du système cérébro-vasculaire. STABILITE ET CONSERVATION
Une diminution de la concentration plasmatique en fibrinogène est en
Stocker à l’abri de la lumière, dans le flacon d’origine bien bouché
général à mettre en rapport avec une anomalie du métabolisme à 2-8°C, les réactifs sont stables, s’ils sont utilisés et conservés
hépatique (cirrhose, ictère...) ou des cas de fibrinolyse ou CIVD dans les conditions préconisées :
(coagulation intravasculaire disséminée) Avant ouverture :
• Jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette du coffret.
PRINCIPE (5) (6) Après ouverture :
Technique basée sur les travaux de Von Clauss et Al., validés par • Transvaser la quantité nécessaire, bien reboucher et stocker à 2-8°C.
Destaing F. et al. En présence d'un excès de thrombine, le temps de • Le réactif de travail reconstitué (flacon R1) est stable :
coagulation d'un plasma préalablement dilué est inversement au moins 24 heures à température ambiante
proportionnel à la concentration en fibrinogène. 30 jours à 2-8°C
30 jours à –20°C
REACTIFS • Le tampon (flacon R2) est stable :
R1 BIO-FIBRI Réactif lyophilisé au moins 3 mois en l’absence de contamination
rejeter tout réactif trouble.
Thrombine calcique d’origine animale.
Kaolin (en faible quantité pour améliorer la détection optique). • Ne pas utiliser le réactif de travail après la date de péremption.
Après reconstitution : Le Réactif de travail n’est pas classé dangereux
PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN (6) (2)
R2 BIO-FIBRI Tampon pour dilution du plasma Plasma
HEPES 0,02 M, pH 7,35
Prélever par ponction veineuse franche.
Anticoagulant (citrate)
• Anticoagulant (0,5 mL de citrate trisodique 0,109 M pour 4,5 mL de
Inhibiteur de fibrinolyse sang). Eviter les prélèvements à la seringue qui favorisent la
Ce réactif n’est pas classé comme dangereux selon le règlement 1272/2008/CE formation de micro-caillots. Centrifuger 5 minutes à 2500 g.
Le fibrinogène est stable dans le plasma :
PRECAUTIONS • 4 h à température ambiante
Les réactifs BIOLABO sont destinés à du personnel qualifié, pour un • 18 mois congelé à -70°C
usage in vitro (ne pas pipeter avec la bouche).
Le dosage peut également être réalisé sur micro prélèvements de
• Consulter la FDS en vigueur disponible sur demande ou sur
sang capillaire sous réserve de respecter des conditions de
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prélèvement et de dosage strictes.
• Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation.
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur. LIMITES (2) (3) (8)
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen ou réactif d’origine
biologique comme potentiellement infectieux. Respecter la législation Les produits de dégradation du fibrinogène peuvent conduire à une
en vigueur. sous-estimation. Dans ce cas, recommencer le test à une dilution
supérieure.
La présence d'un inhibiteur spécifique de l’héparine dans le tampon de
dilution permet un dosage du fibrinogène dans les plasmas héparinés.
Young D.S. a publié une liste des substances interférant avec le
dosage. Voir également Norbert W. Tietz.

REACTIF ET MATERIEL COMPLEMENTAIRES

1. Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales.
2. Analyseur de coagulation automatique ou semi-automatique
3. Eau déminéralisée pour la reconstitution du réactif.

IVD REF LOT →

Fabricant Date de péremption In vitro diagnostic Température de conservation Référence Produit Consulter la notice Numéro de lot Stocker à l’abri de la lumière Suffisant pour diluer avec

H2O
Eau déminéralisée Risque biologique

Made in France Dernière version : www.biolabo.fr Version : 03/10/2018

CALIBRATION INTERVALLES DE REFERENCE (1) (2)
Utiliser le plasma de référence REF 13970 raccordé sur WHO SSC/ISTH Méthode de Clauss Fibrinogène (g/L) 1,50-4,00
Secondary Coagulation Standard NIBSC code : SSCLOT4 Ces valeurs peuvent varier en fonction du couple réactif-instrument
Méthode manuelle sur semi-automate : Préparer une courbe de Il est recommandé à chaque laboratoire de définir ses propres valeurs de
calibration avec des dilutions 1/5, 1/10, 1/15 et 1/20 dans du tampon de référence pour la population concernée
dilution (flacon R2). Déterminer en triplicate les temps de coagulation pour
chacune des dilutions MODE OPERATOIRE
Méthode automatique sur SOLEA 100 : Procéder à la calibration en Placer le réactif de travail (flacon R1) à température ambiante (20-25°C).
utilisant le système de dilution automatique décrit dans l’application
spécifique Méthode manuelle sur semi automate BIO SOLEA2, BIOSOLEA 4 :
OU Diluer les spécimens et contrôles au 1/10 dans du tampon de dilution
Utiliser le tableau de conversion inclus dans le coffret. Calibrant : Préparer les dilutions comme indiqué au § Calibration
L'activité propre à chaque lot de thrombine dépend de la technique utilisée Plasma dilué 0,2 mL
et des conditions opératoires. Il est recommandé de calibrer à chaque Incuber 2 minutes à 37°C
nouveau lot de réactif. Réactif de travail (homogénéisé) 0,2 mL
Le décompte automatique du temps démarre à l’ajout du réactif de
CONTRÔLE DE QUALITE travail et s’arrête lors de la formation du caillot.
REF 13961 Plasma de Contrôle Taux 1 6 x 1 mL
Méthode automatique sur SOLEA 100
REF 13962 Plasma de Contrôle Taux 2 6 x 1 mL Application détaillée disponible sur demande
REF 13963 Plasma de Contrôle Taux 3 6 x 1 mL Note :
Or • Performances et stabilité ont été validés sur SOLEA100 et
Thrombolyzer Compact X (disponibles sur demande).
REF 13971 Coatrol 1 6 x 1 mL • En méthode manuelle et sur autres analyseurs de coagulation,
Coatrol 2 6 x 1 mL performances et stabilité doivent être validés par l’utilisateur.
REF 13972
D’autres applications ou propositions sont disponibles.
• Programme externe de contrôle de la qualité.
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants :
CALCUL
• Au moins un contrôle par série.
• Au moins un contrôle par 24 heures. Fxd
Fibrinogène (g/L) =
• Changement de flacon de réactif. a
• Après opération de maintenance sur l’analyseur. où : F : Concentration en fibrinogène du plasma de référence.
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de d : Inverse de la dilution du plasma testé (d = 10 si dilution 1/10)
confiance recommandées, appliquer les actions correctives suivantes : a : Valeur trouvée en abscisse en reportant t (temps mesuré) en
1. Répéter l’opération en utilisant le même contrôle.
ordonnée
2. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, préparer un plasma de
contrôle fraîchement reconstitué et répéter le test.
3. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, calibrer en utilisant le À partir du tableau de correspondance :
même flacon de plasma de référence et un autre flacon de réactif et Plasma normal, dilution au 1/10 :la concentration en fibrinogène peut être
répéter le test. obtenue par simple lecture du tableau joint au coffret.
4. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, utiliser un autre flacon
de plasma de référence ou un plasma de référence fraîchement Plasma pathologique, dilution différente de 1/10 : tenir compte du facteur
reconstitué et répéter le test. de dilution pour calculer le résultat.
5. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, contacter le service Exemples : Dilution 1/20, multiplier par 2 la valeur lue dans le tableau
technique BIOLABO ou le revendeur local. Dilution 1/5, diviser par 2 la valeur lue dans le tableau
Méthode manuelle sur semi automate BIO SOLEA2, BIOSOLEA 4:
PERFORMANCES à 37°C SUR SOLEA 100 Entrer les temps moyens trouvés de chaque dilution du plasma de
Etudes réalisées avec plasmas normaux et pathologiques référence et les valeurs de fibrinogène (g/L) correspondants dans le
Intra-série Inter-série système. Les concentrations en fibrinogène (g/L) seront calculés
Taux 1 Taux 2 Taux 1 Taux 2
N = 20 N = 20 automatiquement d’après la courbe de calibration
Moyenne g/L 1,33 2,92 Moyenne g/L 1,48 3,23 Automated method on SOLEA 100 : Les concentrations en fibrinogène
S.D. g/L: 0,044 0,063 S.D. g/L: 0,041 0,165 (g/L),seront calculées automatiquement par le système d’après la courbe
C.V. % : 3,3 2,1 C.V. % : 2,7 5,1 de calibration.
Domaine de mesure : entre 0,995 et 8,71 g/L Correction pour anticoagulant liquide, hématocrite normal :
Comparaison avec réactif du commerce : Dans le cas de prélèvement effectué sur citrate liquide (1 volume pour 9
volumes de sang) et pour un hématocrite normal, majorer le résultat de
Etude sur 171 plasmas humains compris entre 0,69 et 9,10 g/L
20%.
Y = 0,9729 x – 0,14 r = 0,9900 Correction pour anticoagulant liquide, hématocrite anormal :
Interférences sur le dosage du fibrinogène (g/L) : La concentration en fibrinogène plasmatique sera obtenue en multipliant le
résultat trouvé par le facteur de correction suivant :
Turbidité Pas d’interférence jusqu’à 0,404 abs
10 - (9 x Hématocrite)
Hémoglobine Pas d’interférence jusqu’à 261 µmol/L 9 - (9 x Hématocrite)
Bilirubine Pas d’interférence jusqu’à 511 µmol/L
Héparine bas poids Pas d’interférence jusqu’à 2,0 IU anti-Xa
REFERENCES
moléculaire
(1) TIETZ N.W. Text book of clinical chemistry, 3rd Ed. C.A. Curtis, E.R. Ashwood,
Héparine non Interférence négative à partir de 1,14 IU W.B. Saunders (1999) p.1133, 1145, 1740-41, 1813, 1846.
fractionnées anti-Xa (2) Clinical Guide to Laboratory Test, 4th Ed., N.W. TIETZ (2006) p.404-405
(3) YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4th Ed. (1995)
D’autres substances sont susceptibles d’interférer (voir § Limites) p.3\260 à 3-261
Stabilité à bord : au moins 5 jours ((8h par jour à bords) (4) VON CLAUSS A. ACTA HAEMATOLOGICA 1957. 17, 237-246.
(5) DESTAING F-DUZER A. PATHOLOGIE ET BIOLOGIE 1960, 8, 1615.
Stabilité de la calibration : 8 jours (6) HURLET A.-JOSSO F: PATHOLOGIE BIOLOGIE 1972, 20, 3-4,165-173
Effectuer une nouvelle calibration en cas de changement de lot de réactif, (7) CAEN-LARRIEU-SAMAMA : L’HEMOSTASE, 1968, EXPANSION SCIENTIFIQUE.
si les résultats des contrôles sont hors de l’intervalle établi, et après (8) Technique en hématologie, Flammarion médecine-sciences, 2nd éd . 1978,
p.184-186
opération de maintenance.

Made in France Dernière version : www.biolabo.fr Version : 03/10/2018