Memoire de Fin D'Etude: Theme
Memoire de Fin D'Etude: Theme
Memoire de Fin D'Etude: Theme
THEME
Contribution à l’activité biologique des extrait éthanolique et
méthanolique de microalgue (spiruline)
Présenté par :
LAHCINI Zohra
ACHAB Siham
DAHNOUN Kaouther
le tout puissant de m’avoir illuminé et ouvert les portes de savoir, et de m’avoir donné la
Toutes les expressions de l’estime et de gratitude du monde sont insuffisantes pour exprimer
nos remerciements à nos parents qui nous ont accompagnés tout au long de notre étude.
Au terme de ce travail nous exprimons tout d’abord mos profonds remerciements à notre
générosité, sa gentillesse, son encouragement, son soutien et de nous avoir fait confiance tout
Nous remerciements tous les membres de jury (Dr ZEGHIB Khaoula et Dr BOURAS Biya
Nos remerciements s'adressent également à tous les enseignants et tous les responsables de la
Une grande pensée pour tous mes amis (es) qui m’ont soutenue au cours de ces années. Enfin,
travail
اهداء
الرحيم. بسم هللا الرحمان
الى من بلغ الرسالة وادى األمانة ...ونصح األمة
إلى نبي الرحمة ....سيدنا محمد صلى هللا عليه وسلم
إلى من كلله هللا بالطيبة والوقار....إلى من علمني العطاء دون انتظار
إلى من أحمل اسمه بكل افتخار ...الى القلب الكبير
والدي العزيز" محمد " اطال هللا في عمره
إلى من كان دعاؤها سر نجاحي وحنانها بلسم جراحي
إلى بسمة الحياة وسر الوجود
امي الحبيبة "فتيحة" أطال هللا في عمرك
إلى روح جدتي الطاهرة رحمها هللا الراحلة عن الحياة الباقية في القلب "خديجة "
إلى من عرفت معهم طعم الحياة .......اخوتي
أمال ,عنتر ,سامية ,يونس ,وائل ,فرح
إلى من تقاسموا معي تعب هذه المذكرة
سهام ,كوثر
إلى رفيقات دربي ......صديقاتي
خلود ,سالف ,كنزة ,الهام ,جهان ,سلسبيل ,صابيرة.
إلى خطيبي الغالي " صادق " وعائلته الكريمة .
إلى من يعود له الفضل في هذا العمل استاذي " عبد الرزاق كرام "
زهراء
اهداء
الحمد هلل عزوجل على توفيقه واحسانه لنا بإتمام هذه المذكرة المتواضعة ,
والصالة والسالم على مبعوث رحمة للعالمين سيدنا محمد وصحبه االخيار
الذي كان له الفضل االول في بلوغي ما انا عليه االن ابي الغالي (جموعي) حفظه هللا ,
الى من وضعتني في طريق النجاح الى من سهرت الجلي امي الحبيبة (عيدة) .
والى من تقاسمو معي تعب هذه المذكرة زهرة ,كوثر وكل رفيقات الدرب والى جميع
سهام
اهداء
اهدي هذا العمل المتواضع إلى من اوصاني بعد ربي خيرا بهما إلى من كانا سندا وعونا
دائما لي ابي الغالي وامي الحنونة الى زوجي العزيز الذي كان سندا كبير في مشوار
مذكرتي لكل العائلة الكريمة من اخوتي وأخي إلى صديقات العمر الالتي قاسمنني لحظاته
الى جميع دفعة 2017إلى استاذي ومشرف مذكرتي كرام عبد الرزاق
كوثر
Résumé
Ce travail vise à étudier la spiruline cultive dans deux régions différentes (Aures
X1 ; Tamanrasset X2), en comparant la composition de l’extraits EOH et MOH et leur activité
antioxydante, la détection des métabolites secondaires et la dosage des polyphénols et des
activités biologiques. La screening chimique a abouti à la présence de saponines, de
flavonoïdes et de phénols pour les spirulines X1 et X2, et à l'absence d'alcaloïdes et
d'anthocyanes, Le rendement de l'extrait EOH dans X1(18.40%) et dans X2(13.80%), est
supérieur à celui de l'extrait MOH pour les deux spiruline , et pour La mesure de teneur on
polyphénols on à, obtenue un tenure on phénol est égale (12.54 mg ) à MOH ,dans la
spiruline X1 supérieur à celle de la spiruline X(2.95) à EOH , et pour la musser de tenure on
flavonoïde montré que les résultats musser de la tenure de flavonoide sont similaires entre
X1(1.56 mg) à MOH et X2 (0.05mg) à EOH . En estimant l'activité antioxydant à l'aide du
test de piégeage du radical libres DPPH et le test de réduction de FRAP, les résultats du test
DPPH ont montré la supériorité de l'extrait MOH(74.75%) sur l'extrait EOH(69.93%) . et
dans le test FRAP les résultat était similaire ,que l'extrait MOH (78%) et l'extrait
EOH(77%).
Les mots clé :Arthrosphira platansis, DPPH , FRAP , extrait méthanolique , extrait
éthanolique .
Abstract
This work aims to study spirulina grown in two different regions X1 and X2, by
comparing the composition of EOH and MOH extracts and their antioxidant activity, the
detection of secondary metabolites and the assay of polyphenols and biological activities. The
chemical screening resulted in the presence of saponins, flavonoids and phenols for spirulina
X1 and X2, and the absence of alkaloids and anthocyanins, The yield of the EOH extract in
X1 (18.40%) and in X2 (13.80%), is higher than that of the MOH extract for the two
spirulina, and for The musser of tenure on polyphenols is obtained, a tenure on phenol is
equal (12.54 mg) to MOH, in spirulina X1 higher than that of spirulina X(2.95) at EOH, and
for the flavonoid tenure musser showed that the flavonoid tenure musser results are similar
between X1(1.56mg) at MOH and X2 (0.05mg) at EOH. By estimating the antioxidant
activity using the FRAP and DPPH free radical inhibition test, the results of the DPPH test
showed the superiority of the MOH extract (74.75%) over the EOH extract (69.93%). and in
the FRAP test the results were similar to the MOH extract (78%) and the EOH extract (77%).
يهدف هذا العمل الى دراسة ,سبيرولينا من منطقتين مختلفتين x1 x2وذلك من خالل المقارنة
بين المستخلصات االيثانولية و الميثانولية ,وتتضمن هذه الدراسة الكشف على مواد االيض الثانوي
وعديدات الفينول ,والنشاطات البيولوجية .اسفر الكشف الكيميائي عن وجود الصابونيات والفالفونويدات
و الفينول لكال سبيرولينا , x1 x2وغياب القلويدات و االنثوسينات .اما بالنسبة للمردود فإن مردود
المستخلص اإليثانولي في (18.40%) x1وفي (13.80%)X2اكبر من مردود المستخلص الميثانولي
في X1و . X2وفي التقدير الكمي لعديد الفينول ,بالنسبة للفينوالت تفوقت سبيرولينا )(12.54mg
ايضا في )x1 x1على ,(7.98mg )X2اما بالنسبة للفالفينويدات فكانت النتائج متقاربة
(1.52mgو .(0.05mg)x2ومن خالل دراسة النشاطات المضادة لألكسدة بإستخدام القدرة اإلرجاعية
للحديد , FRAPواختبار تثبيت الجذر الحر , DPPHاظهرت النتائج في اختبار DPPHان المستخلص
الميثاولي ( )%74.75تفوق على المستخلص االيثلنولي ( , (69.9%وفي اختبار FRAPكانت النتائج
متقاربة فبالنسبة للمستخلص الميثانولي ) (78%و المستخلص االيثانولي )(77%
الكلمات المفتاحية :سبيرولينا , DPPH ,FRAP ,مستخلص ميثانولي ,مستخلص ايثانولي ,الجزائر
Liste des figures
N Titre Page
1 Spiruline en microscope 5
2 Morphologie de spiruline 6
4 Cycle biologique 8
9 Courbe étalon d’acide gallique pour le dosage des polyphénols pour extrait 45
éthanolique
10 Courbe étalon d’acide gallique pour le dosage des polyphénols pour extrait 46
méthanolique
17 Valeurs IC50 inhibitrices pour 50% de racine de DPPH pour les extraits 50
éthanolique et méthanolique ,l’acide ascorbique et α-tocopherol
08 Les solutions , les mitrailles , les appareilles utilisé dans la activité antioxydante 31
_DPPH : 2,2'Diphenyl-1-picrylhdrazyl.
_ I %: Pourcentage d'Inhibition.
_ Mg EAG/g ME: Milligramme Equivalent Acide Gallique sur Gramme des Matières
d'Extraits
_ MM: Macération.
_ R %: Pourcentage de Rendement
Remerciements
اهداء
Résumé
Liste des figures
Liste des tableaux
liste des abriviation
Introduction
Partie Bibliographie
Chapitre I
Généralité sur spiruline
I.1. Définition de la spiruline ..................................................................................................... 5
I.2. Taxonomie ........................................................................................................................... 5
I.3. Morphologie de spiruline .................................................................................................... 6
I.4. Ultra structure ..................................................................................................................... 7
I.5. Cycle biologique ................................................................................................................. 8
I.6. Ecologie .............................................................................................................................. 8
I.7. Condition de la croissance de la spiruline .......................................................................... 9
I.7.1. Effet de la lumière sur la croissance de la spiruline........................................................ 10
I.7.2. Effet de la source de N sur la spiruline ........................................................................... 10
I.8. Applications principales de la spiruline ............................................................................. 10
I.8.1. En alimentation humaine ................................................................................................ 10
I.8.2. En cosmétique ................................................................................................................. 11
I.8.3. En médecine .................................................................................................................... 12
Chapitre II ................................................................................................................................ 14
Biochimie de spiruline ............................................................................................................. 14
II.1. Photosynthèse ................................................................................................................... 15
II.1.1. Phase photochimique ..................................................................................................... 15
II.1.2. Phase d'assimilation de CO2 ......................................................................................... 15
II.2. Composition biochimique de la spiruline ......................................................................... 16
II.2.1. Protéine .......................................................................................................................... 17
II.2.2 Glucides .......................................................................................................................... 18
II.2.3 Lipide .............................................................................................................................. 18
II.2.3.1 Taux lipide ................................................................................................................... 18
II.1.1.2 Acide gras .................................................................................................................... 19
II.1.4. Acides nucléiques ......................................................................................................... 20
II.1.5. Vitamine ........................................................................................................................ 20
II.1.6. Minéraux ........................................................................................................................ 20
II.3. Métabolite secondaire ....................................................................................................... 21
II.3.1. Composés phénoliques .................................................................................................. 21
II.3.2. Flavonoïdes.................................................................................................................... 22
II.3.3. Alcaloïdes ...................................................................................................................... 22
II.3.4. Terpénoïdes ................................................................................................................... 22
II.3.5. Pigment .......................................................................................................................... 23
Chapitre III ............................................................................................................................... 24
Activité Biologique de spiruline .............................................................................................. 24
III.1. Activité Antioxidante ...................................................................................................... 25
III.2. Activité antimicrobienne ................................................................................................. 25
III.3. Activité anti-inflamatoire ................................................................................................ 25
III.1.4Activité anticancéreuse .................................................................................................. 26
III.1.5 Activité antivirale .......................................................................................................... 27
Partie pratique
Chapitre I
Matériel et Méthodes
I.1.Matériels ............................................................................................................................. 30
I.1.1. Matériels biologique ....................................................................................................... 30
I.1.2. Matériels utilisés ............................................................................................................. 30
I.1.2.1. Screening chimique...................................................................................................... 30
I.1.2.2 Extraction ...................................................................................................................... 30
I.1. 2.4. L’étude de l’activité biologique de la spiruline .......................................................... 32
I.2. Méthodes ............................................................................................................................ 32
I.2.1. Screening chimique......................................................................................................... 32
I.2.1.1 Flavonoïdes ................................................................................................................... 32
I.2.1.2 Tanins............................................................................................................................ 33
I.2.1.3 Composés réducteurs .................................................................................................... 33
I.2.1.4 Saponosides .................................................................................................................. 33
I.2.1.5. Anthocyanes................................................................................................................. 33
I.2.1.6 Alcaloïdes ..................................................................................................................... 34
I.2.1.7 Triterpènes .................................................................................................................... 34
I.2.2. Extraction ........................................................................................................................ 34
I.2.2.1. Macération méthanolique ............................................................................................ 34
I.2.2.2. Macération éthanolique................................................................................................ 34
I.2.2.3. Rendement des macérations......................................................................................... 35
I.2.3. Dosage des composés phénoliques ................................................................................. 35
I.2.3.1. Dosage des polyphénols totaux.................................................................................... 35
I.2.3.2. Dosage des Flavonoïde ................................................................................................ 36
I.3.Etude de l’activité biologique de la spiruline ..................................................................... 36
I.2.4. Activité antioxydante ...................................................................................................... 36
I.2.4.1 DPPH● .......................................................................................................................... 36
I.2.4.2. FRAP ........................................................................................................................... 38
Chapitre II
Résultats et discussion
II.1 Résultat de screening chimique ......................................................................................... 41
II.2. Rendement de macération ................................................................................................ 43
II.3. Dosage des polyphénols totaux ........................................................................................ 45
II.3.1. Dosage des composés phénoliques ................................................................................ 45
II.3.2. Dosage des Flavonoïde .................................................................................................. 47
II.4. Activité antioxydante........................................................................................................ 49
II.4.1. DPPH ............................................................................................................................. 49
Références ................................................................................................................................ 57
Annexes .................................................................................................................................... 62
Introduction
Les plantes médicinales et aromatiques sont des organisme photosynthétique
riche en métabolites primaire (lipide, carbohydrate) et métabolites secondaire( phénol ,
flavonoïd, tanine ) , ses compositions biochimiques se varie selon l’espèce utilisé et les
conditions climatiques, elles sont utilisées comme remède pour guérir plusieurs maladies, les
plantes les plus utilisées sont les plantes supérieurs comme menthe et thé, mais il existe aussi
les plantes inférieurs dans différentes applications alimentaires et dans le domaine de la santé
comme les champignons et les microalgues.
Les microalgue sont utilisées par l'homme depuis des centaines d'années comme
nourriture, fourrage, remèdes et engrais. Les premières traces d'utilisation d'algues remontent
à 13 000 ans au Chili, ont été retrouvés dans des foyers et des artefacts de pierre situés dans
les restes de huttes domestiques sur le site archéologique du Monte Verde au sud du Chili.
Toutes les algues sont comestibles et ont d'importantes propriétés médicinales ,parmi ces
algue spiruline.
La spiruline, dite "microalgue bleu-vert" de forme spiralée qui pousse et vit dans les
lacs salés et les océans, a été découverte par le monde comme calment en 1962. elle est
capable d’utiliser l’énergie de la lumière pour la photosynthèse et pour la production
d’oxygèn. Elle est reconnue comme l'un des aliments les plus nutritifs de la planète ,
La première partie (partie théorique) est constituée par trois chapitres, Chapitre I:
Enfin les conclusions essentielles sur l'ensemble de ce travail ainsi que les
perspectives de sa continuité seront dégagées.
Partie
Bibliographie
Chapitre I
Généralité sur spiruline
I.1. Définition de la spiruline
La spiruline est une microalgue bleu-vert photosynthétique, filamenteuse et
multicellulaire qui pousse dans une large gamme d'eau douce, marine et saumâtre. Il pousse
bien dans un environnement hautement alcalin de pH 10-12 ( Marrez1,al2018) C'est un
organisme procaryote qui partage avec les plantes la capacité d’effectuer de la photosynthèse.
À partir de composés minéraux, d’eau, et de l’énergie lumineuse captée grâce à leur
chlorophylle, elles transforment le gaz carbonique et dégagent l’oxygène ( Ahounon ,2018 )
ils sont apparues sur terre il y a environ 3,5 milliards d'années. On estime que ce sont ces
algues qui, durant un autre milliard d'années, jusqu'à l'apparition de la première plante, ont
assuré la photosynthèse sur notre planète, agissant ainsi sur le phénomène de la régulation
atmosphérique .( Choopani , 2017).
I.2. Taxonomie
La Spiruline est une cyanobactérie (anciennement désignée par le terme « algue
bleue » puis cyanophycée). Elle appartient donc au domaine des bactéries (Bacteria) et se
classe parmi les bactéries gram négatives. Les cyanobactéries forment l’essentiel des bactéries
capables de photosynthèse avec production d’oxygène et peuvent être unicellulaires ou
pluricellulaires.( Loïc Charpy,al 2018)
La spiruline est classée
_Règne : Monera
_Group ou Sous Règne :Procaryotes
5
_Embranchement: Cyanophyta
_Class : Cyanophyceae
_Ordre: Nostocales ( Oscillatoriales)
_Famille: Oscillatoriaceae
_Genre : Oscillatoria
_Sous genre: Spiruline
_Espèces : Arthrosphira platensis (BENAHMED, 2012).
I.3. Morphologie de spiruline
La longueur moyenne de la spiruline est de 250 micromètres lorsqu'elle comporte 7
spires. Il est constitué de filaments mobiles (10 à 12 μm de diamètre) non ramifiés et enroulés
en spirales (Bsnehila ,2015)
La principale caractéristique morphologique d'Arthrospira est la disposition typique
de sa forme cylindrique multicellulaire en forme de Hélice généralement ouverte avec un
diamètre relativement grand, parfois Mince aux extrémités et avec des parois transversales
claires. En revanche, la spiruline a une forme tendue trichome, généralement fermé, uniforme
et étroit Diamètre de la vis (0,5 - 3 m), généralement des cellules à parois transversales
Invisible au microscope optique, sans trou de gaz et avec Grains proéminents (Claudio,
Giuseppe) .On trouve des formes spiralées classiques, ondulées et parfois droites
(Bsnehila ,2015)
6
I.4. Ultra structure
L'organisation cellulaire et d'A. platensis, observée en microscopie électronique,est
typique de celui des organismes procaryotes, étant dépourvu d'une morphologie limitée noyau
et des plastes et présentant une enveloppe externe de type gram-négatif( Vonshak, 1798)
La largeur des trichomes varie de 6 à 12 J .l. m, et est composé de cellules
cylindriques. L'hélice diamètre varie de 30 à 70 J .l .m ; la longueur du trichome est d'environ
500 J .l .m, paroi cellulaire Les trichomes sont entourés d'une fine gaine diffluente. La gaine a
une épaisseur d'environ 0,5 μm et a une structure fibrillaire en forme de filet Le matériau de
la gaine, excrété par les pores assis sur la paroi cellulaire, a été pensé être impliqué dans le
mouvement du filament La paroi cellulaire multicouche est mince, environ 40 à 60 nm, et a
une structure facilement détectable. couche dense aux électrons correspondant au
peptidoglycane . Le régulier des parois transversales espacées qui divisent le trichome en
cellules, reliées par des plasmodesmes, sont formés par la croissance centripète et l'extension
du peptidoglycane et du couche plus interne de la paroi cellulaire vers le centre de la cellule
(Martba, 2003)
7
I.5. Cycle biologique
Un aspect fondamental de la biologie de la Spiruline est son cycle de vie en raison
de la taxonomie, implications physiologiques et de culture. Cette périodese résume en trois
étapes fondamentales: fragmentation des trichomes, cellules d'hormogonie les processus
d'élargissement et de maturation, et allongement des trichomes. Les trichomes matures sont
divisé en plusieurs petits filaments ou hormogonie par la formation antérieure de cellules
spécialisées, les cellules de nécridium, dans lesquellesle matériel cellulaire est réabsorbé
permettant fragmentation. Le nombre de cellules dans le les hormogonies sont augmentées
par la fission binaire. Pour ce processus, les trichomes poussent dans le sens de la longueur et
prend leur forro hélicoïdal (Martba ,2003)
9
I.7.1. Effet de la lumière sur la croissance de la spiruline
L'effet de la qualité de la lumière mixte avec des lampes LED rouges, bleues et
vertes sur la croissance d'Arthrospira platensis a été étudié, de manière à jeter les bases
théoriqu es et techniques pour établir un système d'éclairage de photo-bioréacteur pour une
application dans l'espace. Entre-temps, des indices, comme la morphologie, le taux de
croissance, les compositions de pigments photosynthétiques, l'efficacité énergétique et les
principaux composants nutritionnels, ont été mesurés respectivement. Les résultats ont montré
que la lumière bleue combinée à la lumière rouge pouvait diminuer l'étanchéité de filament, et
l'effet de la lumière verte était opposé. La combinaison de la lumièr bleue ou de la lumière
verte avec la lumière rouge induit la filaments pour devenir plus courts en longueur. Le
traitement 8R2B pourrait favoriser la croissance d'Arthrospira platensis de manière
significative, et sa sécheresse le poids a atteint 1,36 g L-1, soit 25,93 % de plus que le témoi.(
Toudert, 2020).
I.7.2. Effet de la source de N sur la spiruline
Certains laboratoires de soins cosmétiques ont introduit la spiruline dans des crèmes,
des shampoings ou des sérums qu’ils commercialisent du fait du nombre non négligeable
d’actifs naturels retrouvés dans cette cyanobactérie (acides aminés, oligoéléments, anti
oxydants, minéraux, vitamines, acides nucléiques (composants de l’ADN), protéines, acides
gras essentiels, (Banks, 2007). Grâce à ses propriétés anti-oxydantes qui empêchent la
formation de radicaux libres, la spiruline améliore la souplesse et l’élasticité de la peau et
donc retarde son vieillissement et apporte brillance et résistance aux ongles et aux cheveux
par les nutriments et les oligoéléments qu’elle concentre (Banks, 2007). Considéré comme un
aliment « beauté » d’exception, la spiruline est utilisée aujourd’hui dans les soins anti-âges à
11
connotation marine, dans la préparation de produits de soins en spa et thalasso (masques
visage, enveloppements corporels), comme soins réparateurs et fortifiants des cheveux et des
ongles, en cataplasme et enveloppement marins, comme soin revitalisant pour le corps ou
masque minéralisant du visage (Casal,2019).
I.8.3. En médecine
12
13
Chapitre II
Biochimie de spiruline
II.1. Photosynthèse
Près de la moitié de l'activité photosynthétique sur terre est réalisée par des
organismes aquatiques qui ne représentent pourtant que 1% de la biomasse totale (Falkowski
and Raven, 2007). La photosynthèse qui signifie littéralement « synthèse réalisée à l'aide de
l'énergie lumineuse » est le processus par lequel les microalgues transforment l'énergie
lumineuse en énergie chimique et fixent le carbone inorganique dissous (CID) . Il en résulte la
synthèse de matière organique et la production d'oxygène. Ainsi l'activité photosynthétique
est la fixation du CO2 et la production d'O2 via les mécanismes de la photosynthèse. Elle se
compose de deux phases indépendantes chimiquement et physiquement. mais liées par des
intermédiaires communs et des régulations enzymatiques.
Est la phase dite éclairée de la photosynthėse, elle se déroule dans les membranes
thylacoïdiennes, en présence de lumière. La captation de l'énergie lumineuse s'effectue grâce
aux pigments photorécepteurs présents dans la membrane des thylacoïdes. Les pigments
majoritairement présents sont la chlorophylle et les caroténoïdes (comme le bêta-carotène).
Ces pigments sont regroupés dans les photosystėmes pour capter au mieux la lumière. Un
photosystėme est une entité composée d'une antenne et d'un centre réactionnel L'antenne.
intégrée dans la membrane thylacoidienne. est composée de centaines de pigments associés à
des protéines et des lipides.
15
molécules d'ATP et deux molécules de NADPH, H sont consommées. Dans des conditions
optimales, 10 à 16 moles de photons sont nécessaires pour fixer une mole de CO: (Richmond,
2004). En théorie huit moles de CO2 sont nécessaires. Les moles en plus correspondent aux
besoins minimums de la cellule en énergie. (Cadoret et Bernard, 2008).
16
Figure (06) : Composition chimique de la spiruline (Lecointre, 2017).
II.2.1. Protéine
17
II.2.2 Glucides
II.2.3 Lipide
18
II.1.1.2 Acide gras
On considère que chez l'homme, les besoins en acides gras essentiels sont de 1 ou
2% des calories alimentaires pour l'adulte et de 3% pour les enfants . Il est maintenant bien
établi que l'apport de lipides essentiels influe (entre autres) sur le système immunitaire tant
humoral que cellulaire( Hurni 2006).
Les acides gras se distinguent par la longueur de leur chaîne carbonée et leur degré
d’insaturation. (Bsnehila 2015).
La composition des principaux acides gras de 3 espèces de Spiruline révèle la
présence d’une forte concentration en acides gras essentiels (acides gras insaturés C18). Ces
acides gras incluent les oméga-3 et des oméga-6 qui sont qualifiés d’essentiels car l'organisme
humain en a absolument besoin et ne peut les produire . Les acides gras omega-3 et oméga-6
de la Spiruline préviendraient l’accumulation de cholestérol dans l’organisme. Ceci pourrait
expliquer en partie la diminution des taux en cholestérol et triglycérides observés lors des
expériences de L’acide gamma-linolénique (non-essentiel car il peut être synthétisé à partir de
l'acide gras linoléique) constitue 10 à 20% des acides gras (soit 1-2% du poids sec) chez
Spirulina maxima et jusqu’à 40% chez S. platensis, (soit 4% du poids sec). La Spiruline
figurerait parmi les meilleures sources connues d’acide gamma-linolénique
Les sulfolipides tels les sulfoquinovosyl diglycérides qui représentent 5% de la
fraction saponifiable intéressent les chercheurs pour leur activité protectrice contre des
infections virales( Charp, 2008)
Tableau 02: Composition typique en pourcentage des principaux acides gras de trois espèces
de spiruline (Pascaud et al., 1993).
Acide gras Pourcentage
palmitique (16:0) 25.5
palmitoléique (16:1) oméga-6 3.8
stéarique (18:0) .1.7
oléique (18:1) oméga-6 16.6
linoléique (18:2) oméga-6 40.1
gamma-linolénique(18:3)méga-6 40.1
alpha-linolénique (18:3) oméga-3 Absant
19
II.1.4. Acides nucléiques
II.1.5. Vitamine
La différence entre minéraux et oligo-éléments est qu'un minéral excède 1/10 000 du
poids du corps alors qu’un oligo-élément est présent dans des quantités 10 fois moindre ; ainsi
les besoins en minéraux sont de l’ordre du gramme alors que les besoins en oligo-élément
20
sont de l’ordre du milligramme ou microgramme Les minéraux spécialement intéressants
chez la spiruline sont le fer, le zinc, le magnésium, le calcium, le phosphore et le potassium (7
% du poids sec). Selon le pH et la composition du milieu de culture, elle absorbe plus ou
moins les minéraux d’où des teneurs variables. Concernant le fer, il est 2 à 3 fois mieux
assimilé que celui des légumes ou de la viande. En effet, le fer de la spiruline n’est pas à l’état
libre mais chélaté à des acides aminés qui vont favoriser son absorptio (.MANET 2016)
Tableau 04 :composition des minéraux.) Audry ,2016)
Minéraux mg 100g·1
Calcium 130
sodium 0.09
Magnesium 25-50
Phosphore 67
Potassium 100-200
fer 7-18
Zinc 0.4
Les composés phénoliques sont des dérivés non azotés ou leurs molécules sont
formées par une ou plusieurs noyaux aromatiques avec un ou plusieurs groupes hydroxyles.
Chimiquement, les polyphénols peuvent être divisés en plusieurs catégories en se basant sur le
nombre d’atome de carbone dans les squelettes de base, ces structures peuvent être sous
forme libres ou liées à l’ester ou hétérosides telles que des acides phénoliques, des
flavonoïdes, isoflavonoïdes, stilbènes et les tanins sous forme un polymères phénoliques
21
(Ludmila ,et al, 2015). Les différentes classes de ces composés phénoliques sont classées
dans le tableau ci-dessous. ( Abdalaziz, 2017).
II.3.2. Flavonoïdes
Les flavonoïdes sont parmi les polyphénols qui possèdent un squelette de base à 15
atomes de carbone constitués de deux cycles phényles, les cycles A et B, reliés par une chaine
à trois carbones (structure en C6-C3-C6). La chaine en C3 entre les cycles A et B est
communément cyclisé pour former le cycle C. Les flavonoïdes sont capables d'exercer en plus
des propriétés antioxydantes, des propriétés anti-inflammatoires, antiallergiques et anti-
ulcérogènes. Certains, Ils ont été surnommés les « modificateurs naturels des réponses
biologiques » (Bougandoura, 2010), alors que les tanins sont une famille complexe de
principes actifs. Ils ont la capacité de former des complexes avec des macromolécules (les
protéines, glucide …) et des liaisons entre les fibres de collagènes. Leur structure chimique
est particulièrement variable, mais comporte toujours une partie polyphénolique ; il existe
deux catégories de tanins, d'origine biosynthétiques différente : les tanins hydrolysables et les
tanins condensés (Boutalbi , 2014).
II.3.3. Alcaloïdes
II.3.4. Terpénoïdes
Les terpénoïdes est attribué à tous les composés possédant une structure moléculaire
construite d’un monomère à 5 carbones appelé « isoprène » liées avec une ou plusieurs
fonctions chimiques (alcool, aldéhyde, cétone, acide, lactone,…ect). Nous distinguons : les
terpènes proprement dit mono-terpènes en C10, les sesquiterpènes en C15, les di-terpènes en
22
C20, les tri terpènes (C30) (exemple : les stéroïdes), les tétras terpènes (C40) et les poly
terpènes (~4 000) (Boutalbi, 2014). Nous pouvons citer les caroténoïdes qui sont les mieux
connus des terpénoïdes dont ils représentent un large groupe de pigments naturels de couleurs
jaune, orange et rouge. Ils sont très répandus dans les plantes, les algues, et différents
microorganismes. Ils se composent de 40 atomes de carbone, huit unités isoprénoïdes à cinq
carbones (C5), et une longue chaîne hydrocarbonée polyène qui peut contenir de 9 à 15
liaisons conjuguées. En plus du pouvoir colorant, ils ont des propriétés de prévention contre
les maladies chroniques et du cancer .( Abdalazize,2017)
II.3.5. Pigment
23
Chapitre III
Activité Biologique de
spiruline
III.1. Activité Antioxidante
Les propriétés antioxydantes de la Spiruline et de ses extrait sont récemment retenu
l'attention des chercheurs. Dans une des premières études ( Belay ,2002) , ont évalué l'activité
antioxydante des caroténoïdes, des composés phénoliques et des tocophérols extraits de
Spirulina maxima. Ils ont découvert que les composés phénoliques responsables des
caractéristiques antioxydantes des algues étaient des acides organiques (caféique,
chlorogénique, quinique, salicylique, synaptique et trans-cinnamique).
25
de phycocyanine donne la couleur bleue caractéristique des cyanophytes, et d'où le nom
d'algues bleues vertes.( Eriksen 2016) a conclu que la spiruline est la seule source efficace de
production naturelle de phycocyanine dans des conditions photoautotrophes. Malgré les défis
auxquels sont confrontées la culture de la spiruline et l'extraction de la phycocyanine, il n'y a
pas d'autres sources particulières de phycocyanine naturelle. La phycocyanine peut également
être produite à partir d'autres microalgues, par ex. de l'algue rouge unicellulaire Galdieria
sulphuraria dans des conditions hétérotrophes.
Dans une étude précédente, (Ebaid et al., 2017) ont estimé la teneur en
phycocyanine de 46,57 mg ·g−1 poids sec chez A. platensis cultivé dans un milieu Zarrouk
pendant 18 jours à 25 ± 3 °C et une intensité lumineuse de 2500 Lux avec une photopériode
de 18:6 h lumière : cycle d'obscurité. Il convient de noter que la teneur relative en
phycocyanine a montré des changements significatifs dans différentes conditions de lumière
dominante, ce qui a été confirmé comme un mécanisme de piégeage pour prévenir ou réduire
les dommages photo-inhibiteurs ont étudié quatre modèles d'inflammation expérimentaux in
vivo (n = 7) et ont confirmé l'activité de la phycocyanine pure en tant qu'agent anti-
inflammatoire dans tous les modèles étudiés. L'utilisation de 50, 100 et 200 mg·kg-1 de
phycocyanine a réduit de manière significative l'œdème de l'oreille induit par l'acétate de
tétradécanoylphorbol et l'acide arachidonique chez la souris de 47,6, 60,3 et 66,6 %,
respectivement. De plus, l'application de 50 à 200 mg·kg-1 de phycocyanine chez des rats
expérimentaux a inhibé les taux de leucotriène B4 (LTB4), de prostaglandine E2 (PGE2) et
l'œdème induit par l'acide arachidonique ont conclu que la spiruline protège contre les effets
pro-inflammatoires négatifs induits par le glucomannane chez les rats Zucker Fa/Fa en raison
de la teneur élevée en phycocyanine( Shaoa,2019)
III.1.4Activité anticancéreuse
Différentes études et analyses d’experts, ont affirmé que la bêta-carotène, un des
antioxydants implanté dans la spiruline, pourrait inverser le processus cancéreux et inhiber le
déploiement des cellules cancérigènes. Une de ces analyses confirmatives du résultat fut
élaborée avec des personnes qui avaient une leucoplasie buccale (état précancéreux de la
bouche). Ces derniers, ont montré après une prise quotidienne d’1g de spiruline pendant un an
une amélioration de leur état et réussirent à arrêter le développement de la pathologie. La
phycocyanine intervient aussi dans cette activité en s’attaquant aux radicaux libres
responsables du cancer (Vidalo, 2015).
26
III.1.5 Activité antivirale
La richesse de la spiruline en β-carotène, en vitamine B12 ainsi que d’autres
vitamines du groupe B, depuis fort longtemps établi comme substances intéressantes dans la
lutte contre les infections virales n’explique pas entièrement le pouvoir antiviral de la
spiruline. Il semblerait que les polysaccharides membranaires de cette algue soient aussi
impliqués dans ce processus (C. Girardin-Andréani2005). L’équipe du professeur Hayashi, de
l’American Chemical Society, a démontré l’efficacité in vitro des polysaccharides contre la
réplication de plusieurs virus enveloppés comme les Herpès Simplex Virus (HSV), le virus de
l’influenza, le virus de la rougeole, le cytomégalovirus humain (C MV) et le VIH-l
(Yougbare, 2007)
27
Partie
pratique
Chapitre I
Matériel et Méthodes
I.1.Matériels
I.1.1. Matériels biologique
Le matériel biologique utilisé dans ce travail est l'algue bleu-vert Spiruline . Ils sont
cultivé et séchie dans la région de (Aures et Tamanrasset).
Lors de la détection chimique des métabolites secondaires dans , nous avons utilisé
les matérels, appareils, solutions et réactifs listés dans le tableau( 05).
Tableau (05) : matériels , solutions, réactifs et les appareils usagés en screening chimique.
I.1.2.2 Extraction
Au cours du processus d'extraction, les matériels , solutions et dispositifs ont été utilisés et
présentés dans le tableau( 06) .
30
Tableau(06) : matériels , solutions, réactifs et les appareils usagés en macération
méthanolique et éthanolique
En estimant les composés phénoliques, nous avons utilisé les solutions, matériels, et
les appareille présentés dans le tableau (07).
Tableau (07) : En estimant les composés phénoliques, nous avons utilisé des dosage
Dosage de Ethanol
flavonoïde Méthanol
Quercétine
AlCl3 (2%)
31
I.1. 2.4. L’étude de l’activité biologique de la spiruline
Pour estimer l’activité antioxydante, nous avons utilisé les mitrailles, solution et les
appareille présentés dans le tableau (08) .
Tableau (08) : les solutions, les mitrailles, les appareilles utilisé dans la activité antioxydante.
I.2. Méthodes
I.2.1. Screening chimique
I.2.1.1 Flavonoïdes
32
flavonoïdes est mise en évidence si une couleur rose ou rouge se développe après 3 minutes
(Debrayb et al., 1971; Paris et al, 1969).
I.2.1.2 Tanins
I.2.1.4 Saponosides
➢ Préparation du décocté
Dans une fiole jaugée de 250 ml, nous avons mis 1g de spiruline et 50ml d’eau, puis
nous avons porté le mélange à ébullition modérée (décoction) pendant une demi-heure
(30mn). Après refroidissement et filtration, nous avons ajusté le volume de filtrat à 50 ml
d’eau.
➢ Mise en oeuvre pratique
À partir de cette solution mère, nous avons préparé 10 tubes (1,3 cm de diamètre
interne) avec 0.5, 1, 1.5 jusqu’à 5 ml de décocté; le volume final étant réajusté à 15ml avec de
l’eau distillée. Chacun des tubes a été agité avec énergie en position horizontale pendant 15
secondes. Après un repos de 15 min en position verticale, nous avons relevé la hauteur de la
mousse persistante en cm. La formation d'une mousse persistante après 15 mn confirme la
présence des saponosides (Igwe, 2010).
I.2.1.5. Anthocyanes
33
I.2.1.6 Alcaloïdes
I.2.1.7 Triterpènes
Faire tremper 5g de matière biologique sèche dans 10ml de éther de pétrole pendant
24 heures dans l'obscurité, et l'extrait est filtré et placé dans un tube exposé à une plaque
chauffant, jusqu'à ce que l'extrait évaporation, puis il est traité avec 0,5ml d'anhydride
acétique 0,5ml de chloroforme et un peu d'acide sulfurique. (Trease et Evans, 1987).
I.2.2. Extraction
L’extraction des principes actifs de spiruline est effectuée par macération à froid en
utilisant trois solvants de polarités différentes.
34
concentré par Rotavapeur jusqu’à l’évaporation de méthanol. Sont divisés en deux parties,
une dissoute dans l’éthanol, l’autre dans l’eau renferme 10% de DMSO (v/v).
Les composés phénoliques totaux ont été déterminés par la méthode singleton-rossi à
l'aide du réactif de folin-ciocalteau, car ce réactif est constitué d'acide phosphotungsténique
(H3PW12O40) et d'acide phosphomolybdique (H3PMO12O4), qui est réduit par les phénols
en oxydes de tungstène ( W8O23) et du molybdène (MO8O3) de couleur bleue.
Nous préparons des solutions diluées d'acide gallique dans l'éthanol et le méthanol
avec des concentrations connues( 0.2-1mg/ml )pour la détermination quantitative des
polyphénols dans les extraits éthanoliques et méthanoliques.
Les polyphénols totaux ont été déterminés selon SINGLETON et ROSSI (1995) en
utilisant le réactif folin-ciocalteau , où l'on mélange 0,2ml d'une série de concentrations
d'extraits éthanoïques et méthanoïques avec 1ml de solution de folin-ciocalteau diluée 10 fois,
puis on ajoute 0,8 ml de Na2CO3 ( 7.5%) au mélange, puis les tubes sont agités et incubés à
la température du laboratoire pendant 30 minutes.
35
sèche ( AG E/g matière sèche), en traçant une courbe de titrage pour les concentrations
d'acide gallique dissous dans le méthanol et le méthanol.
La quantification des flavonoïdes a été effectuée par une méthode adaptée par avec le
trichlorure d'aluminium et la soude. Le trichlorure d'aluminium forme un complexe jaune
avec les flavonoïdes.
Les flavonoïdes ont été quantifiés par un spectrophotomètre à une longueur d'onde de
420 nm. Pour la quantification des flavonoïdes, nous utilisons la courbe standard de la
quercétine. (ZHISHEN et al., 1999).
L'intensité de l'absorption du mélange est mesurée à une longueur d'onde de 420 nm,
où le résultat est exprimé en nombre de milligrammes équivalent à la quercétine par gramme
de matière sèche.) mg QE/g Matière Sèche).
I.2.4.1 DPPH●
36
est réduit et change de couleur en virant au jaune. Les absorbances mesurées à 517 nm servent
à calculer le pourcentage d’inhibition du radical DPPH●, qui est proportionnel au pouvoir
antiradicalaire de l’échantillon. (Parejo et al, 2002).
Violet
jaune
Figure (07) : Réaction d’un donneur d’hydrogène (antioxyadante) avec le radical DPPH●
Cette méthode est basée sur la mesure de la capacité des antioxydants à piéger le
radical DPPH. L’effet de chaque extrait sur le DPPH est mesuré par la procédure décrite par
Benhammou et al, (2007).
Selon BRAND et ses collègues (1995), être pris 0,5 ml de différentes concentrations
d'extrait éthanolique et méthanolique sont prélevés et 1 ml de solution de DPPH● de
concentration (4 mg/100 ml méthanol : 0.1 mM) Les tubes a été incubé dans l'obscurité
pendant 15 minutes. Les lectures de densité optique des différentes concentrations sont
enregistrées dans un spectrophotomètre à une longueur d'onde de 515 nm. .(DZIRI et al.,
2012)
37
Le pourcentage d'inhibition racinaire DPPH● pour les différentes concentrations
d'extraits alcooliques a été calculé à partir des deux courbes étalons α-Tocopherol ( 0.00001-
0.0001 mg/ml) et d'acide ascorbique avec des concentrations de (0. 002-0.01mg/ml) selon
l'équation suivante :
Ac : absorbance du contrôle
I.2.4.2. FRAP
Le pouvoir réducteur d’un extrait est associé à son pouvoir antioxydant. Cette
technique a été développée pour mesurer la capacité des extraits testés à réduire le fer ferrique
(Fe3+) présent dans le complexe K3Fe(CN) 6 en fer ferreux (Fe2+). En effet le Fe3+ participe
à la formation du radical hydroxyle par la réaction de Fenton. L’absorbance du milieu
réactionnel est déterminée à 700 nm. (Oyaizu, 1986).
38
Le tout est centrifugé à 3000 tours pendant 10 min. 2,5 ml du surnageant de chaque
concentration est mélangé avec 2,5 ml d’eau distillée et 0,5 ml FeCl3 (0,1%). L’absorbance
est mesurée à 700 nm à l’aide d’un spectrophotomètre.
L’acide ascorbique est utilisé comme contrôle positif dans cette expérience dans les
mêmes conditions opératoires.
Calcule EC50
Afin de déterminer l'activité antioxydante des extraits, nous avons calculé l'Ec50,
c'est-à-dire la concentration nécessaire pour réduire de 50% le fer.
39
Chapitre II
Résultats et discussion
II.1 Résultat de screening chimique
L’étude phytochimique a été permis de mettre en évidence divers métabolites
secondaires. Le tableau (9) regroupe les résultats des tests phytochimiques réalisés sur la
spiruline.
Tableau (9) : Résultats du screening phytochimique de spiruline.
Composée ++ -
réducteur
Anthocyanes - / /
41
Recherche Résultat +- X 1 Résultat photo de X Résultat +- Résultat
de 1 photo de X 2
X2
Triterpan + / /
Alcaloide - -
Tanins - ++
/: Test non effectué, - : Test négatif, +: Test faiblement positif, ++: Test positif, +++: Test
fortement positif / X1 :spiruline de Aures / X 2 :spiruline de Tamanrasset .
a- Description
Les tests phytochimiques ont été réalisés sur les deux biomasse séché de spiruline
X1 et X2. En utilisant des solvants de polarité différente et des réactifs spécifiques de
révélation.
42
Le screening phytochimique nous a permis de mettre en évidence la présence de
métabolites secondaires au niveau de la spiruline. La détection de ces composés chimiques est
basée sur des essais de solubilités des constituants, des réactions de précipitation et de
turbidité.
Et pour toutes les Triterpanoides et les Composée réducteur, nous avons remarqué leur
présence en X1 et leur absence totalement en X2.
Les tanins sont abondamment présents dans la spiruline X2 . Alors que la spiruline
X1 , manque de sa présence à travers l'interaction négative .
b- Discussion
Cela a été confirmé par (Abdelaziz 2017) dans son étude sur la détection des
métabolites secondaires de la spiruline, où les résultats ont montré la présence à la fois de
saponines, d'alcaloïdes et de flavonoïdes dans la spiruline et l'absence de tous les composés de
référence, les anthocyanes et les terpènes.
Ainsi, on peut dire que la spiruline est riche en flavonoïdes, phénols et saponines, qui
jouent un rôle très important dans la protection des aliments d'origine végétale contre
l'oxydation, ce sont des antioxydants connus pour leur effet anti-radicalaire (Makhloufi
2010).
43
Tableau (10) : les résultats des extraits étudiés
20.00%
18.00%
16.00%
14.00%
12.00%
10.00% 18.40%
8.00% 13.80%
6.00% 9.60%
7.40%
4.00%
2.00%
0.00%
MOH X1 EOH X1 MOH X2 EOH X2
a-Description
Les résultats obtenus à travers le tableau représentés dans le graphique tableau pour
les spiruline X1 et X2 ont montré que le rapport de rendement des extraits est proche, puisque
nous constatons que le rapport de rendement de l'extrait éthanolique de spiruline X1 et X2 a
44
été estimé à 18,4% et 13,8%, quant à l'extrait méthanolique spiruline X1 et X2 ont été estimés
à 9,6% et 7,40%.
b-Discussion
0.06
y = 0.1028x - 0.0036
absorbanec
0.04 R² = 0.9749
0.02
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8
-0.02
consentration
Figure (09) :courbe étalon d’acide gallique pour le dosage des polyphénols pour
extrait éthanolique .
45
acide galique au méthanol
0.012
0.006
0.004
0.002
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
-0.002
consentration
Figure 10 : courbe étalon d’acide gallique pour le dosage des polyphénols pour
extrait méthanolique.
14 12.54
12
10 7.98
8
6
2.95
4
0.941
2
0
MOH X1 MOH X2 EOH X1 EOH X2
Figure (11) : Teneurs en polyphénols des deux extraits de deux spiruline X1 et X2.
a- Description
La quantité de phénols dans les extraits méthanoliques était très supérieure à leur
quantité dans les extraits éthanoliques X1 et X2. La quantité de composés phénoliques pour
les deux extraits méthanoliques était proche, avec une valeur estimée de 7,98 mg AG E/g
Matière sèche en X2 et 12,54 mg AG E/g Matière sèche en X1, respectivement.
46
Quant aux deux extraits éthanoliques, ils sont également proches, estimés à 0,941 mg
AG E/g Matière sèche en X2 et 2,95 mg AG E/g Matière sèche en X1. La spiruline X1 est
supérieure à X2 dans la teneur quantitative en polyphénols dans les deux solvants.
b-Discussion
Qurcitine au méthanol
1.4
1.2
1
abserbance
0.8
0.6 y = 11.373x + 0.0765
R² = 0.9567
0.4
0.2
0
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12
concentrtion
Figure (12) : courbe standard de la qurcitine pour le dosage des flavonoides dans
l’extrait méthaolique
47
Qurcitine au éthanol
0.12
0.06
0.04
0.02
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1
-0.02
concentration
Figure (13) : courbe standard de la qurcitine pour le dosage des flavonoides dans
l’extrait méthaolique.
1.6
1.4
1.2
1
1.56
0.8
0.6
0.4
0.2
0.0025 0.05 0.0087
0
MOH X1 MOH X2 EOH X1 EOH X2
a-Description
La quantité de flavonoïdes dans les extraits éthanoliques était très supérieure à leur
quantité dans les extraits éthanoliques X1 et X2.
La quantité de flavonoïdes pour les deux extraits éthanoliques était quelque peu
similaire, sa valeur étant estimée à 0,087 dans X2 et 1,56 dans X1, respectivement.
48
Quant aux deux extraits méthanoliques, ils sont également proches, estimés à 0,05 en
X2 et 0,025 en X1, La spiruline X1 est supérieure à X2 dans la teneur quantitative en
polyphénols dans les deux solvants.
b-Discussion
Et par rapport à l’étude réalisée par ( Sahraoui ,2019) , il est atteint des valeurs
élevées par rapport à notre étude qui était estimée à 40,63 ± 0,008 μg EQ/mg d’ l’extraite .
La raison de cette différence de composés phénoliques est due aux conditions climatiques
dans lesquelles vit la spiruline
Pour déterminer le taux d’inhibition des extraits alcooliques de les radical libre de
DPPH, nous avons utilisé l’équation des courbes étalon, de α-tocophérol et de l’acide
ascorbique dans annexe (2). la courbe des inhibition des radical libre DPPH par l’extrait
éthanolique reprisanté dans la figure (13), et le temps d’inhibition par l’extraite méthanolique
des radical libre DPPH reprisant dans la figure (14) respectivement, et les résultats sont
présentés dans la figure( 15).
80.00%
y = 0.7149x + 0.0065
70.00%
R² = 0.9799
60.00%
50.00%
20.00%
10.00%
0.00%
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
concentration
49
80.00%
70.00% y = 0.6681x + 0.0565
R² = 0.9629
60.00%
50.00%
Inhibition (I%) 40.00%
30.00%
20.00%
10.00%
0.00%
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
concentrtion
Après avoir estimé l'intensité d'absorption pour une concentration de 0,01 pour les
extraits alcooliques et les composés standards acide ascorbique et α tocopherole , nous avons
pu déterminer le pourcentage d'inhibition de la racine DPPH à cette concentration grâce à
l'équation linéaire de pour α tocopherol l'extrait EOH et acide ascorbique pour l'extrait MOH
(Figure 16).
6.00%
5.00%
4.00%
3.00%
2.00%
1.00%
0.00%
MOH EOH AA α-tocophrol
50
a- Description
b) Discussion
L'extrait EOH était supérieur à l'extrait MOH dans le pourcentage d'inhibition des radicaux
libres DPPH, et ces résultats sont cohérents avec les découvertes d('Ajal et Makki,2014)
➢ IC50
L'IC50 est exprimée en concentration d'inhibiteur pour 50% du radical libre DPPH a
été déterminée par les équations linéaires des courbes d'inhibition (I%) pour les extraits MOH,
EOH , Acide Ascorbique et, α-tocopherole , respectivement (Voir Annexe N°2 ). L'activité
antioxydante étant inversement proportionnelle aux valeurs d'IC50, plus les valeurs d'IC50
sont faibles, meilleure est l'activité anti-radicalaire.
IC50
μg/ml 80.00%
60.00%
40.00% 74.75%
69.93%
68.32%
20.00%
40.19%
0.00%
Figure (18 ): valeurs IC50 inhibitrices pour 50% de racine de DPPH pour les extraits
éthanolique et méthanolique, l’acide ascorbique et α-tocopherol .
51
a-Description
b-Discussion
À travers les résultats obtenus, nous concluons que la spiruline X1 a une très faible
capacité antioxydante par rapport à l’acide ascorbique et cela est dû à la diminution de
certains composés fonctionnels, et par rapport à une étude qu’il a faite (Lahocine ,2019). Qui
est venu avec la microalgue a une capacité antioxydante légèrement supérieure par rapport à
celle de l’acide ascorbique (0.156 mg/ml) . Son activité antioxydante est due principalement à
sa composition en polyphénols ainsi qu’aux pigments, qui semblent être liées à cette activité.
II.4.2. FRAP
Le test FRAP est considéré comme l'un des tests approuvés les meilleurs, les plus
simples, les plus anciens et les plus fiables (katalinic et al 2005) qui étudie l'efficacité des
antioxydants en termes de leur capacité à inverser divers radicaux libres, et est généralement
utilisé pour étudier l'étendue de la capacité des extraits à inhiber le processus d'oxydation.La
technique de ce test est basée sur la mesure des changements qui se produisent dans la
photoabsorption en raison de l'apparition de la couleur bleue résultant du retour des
antioxydants au composé Fe3+ au Fe2+ au milieu d'une réaction acide (benzie1999).
0.8
y = 0.555x + 0.057
0.6
abserbance
R² = 0.9478
0.4
0.2
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
concentration
60%
50%
Série 3
40% Série 2
30% Série 1
20%
10%
0%
MOH EOH acide
ascorbique
a-Description
A travers les résultats obtenus, on constate que la capacité à réduire le fer varie selon
les extraits, puisque l'on note qu'elle est plus importante dans l'extrait MOH (78%), que est
sont proche a l'extrait (77%).
b-Discussion
53
Conclusion
Conclusion
Les binenfaits de la spiruline sont très nombreux, il s’agit d’une algue naturelle aux
propriétés nutritionnelles très intéressantes, pleines de vertus et d’effets bénéfiques sur
l’organisme. Les bienefait de la santé : lutte contre les carences alimentaire, réduit la fatigue
générale (physique et intellectuelle ), nettoie et purifie l’organisme (propriétés détoxifiantes ),
diminue le cholestérol
55
Nous conclue que la variation de l’activité biologique et de la composition
biochimique de spiruline est due à la variation des condition climatique ainsi que la
composition de milieux de culture de spiruline .
56
Références
Références
58
• BOUGOFFA Samira ,HAMIDI Aicha,2020 : Etude de l’activité antibactérienne de
l’extrait de la spiruline (Spirulina platensis) sur différentes souches pathogènes dans la
région de Ouargla.
• CASAL A., 2019 : l’Aliment Idéal et le plus Complet de Demain, Site web,
www.spirulinefrance.fr
• DZIRI S., HASSEN I., FATNASSI S., MRABET Y., CASABIANCA H.,
HANCHI B., HOSNI K., 2012- Phenolic constituents, antioxidant and antimicrobial
activities of rosy garlic (Allium roseum var. odoratissimum). Journal of Functional
Foods. 4: 423- 432.
• IVANA K., MILENA N., and MIODRAG L., 2011- Comparison of antioxidant and
antimicrobial activities of methanolic extracts of the artemisia sp. recovered by
different extraction techniques. Biotechnology and bioengineering chinese journal of
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• VIDALO J. L., 2015 : Spiruline, l’algue bleue de santé et de prévention, Livre,
Chapitre 3 / Cancer et Spiruline, p 101, Chapitre 16 / Universelle spiruline. A chacun
son profil p. 240.
61
Annexes
Annexe 01
63
Annexe 02
α-tocopherol
50.00%
40.00%
10.00%
0.00%
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
Concentration
Acide ascorbique
100.00%
90.00% y = 0.7297x + 0.1444
R² = 0.9572
80.00%
70.00%
Inhibition (I%)
60.00%
50.00%
40.00%
30.00%
20.00%
10.00%
0.00%
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
concentrtion
64