Copie de Cours de Biosécurité II1
Copie de Cours de Biosécurité II1
Copie de Cours de Biosécurité II1
• DUREE DE LA FORMATION
Un semestre dans le cadre du tronc commun du Master de biologie.
• EVALUATION
- Présence et participation active : 10 %
- Devoir organisé en classe : 20 %
- Un travail bibliographique de synthèse: 20 %
- Examen organisé : 50%
Plan du Cours :
• Définition et notion de risques
-Définition de la biosécurité
- Notions de risques biologiques
pathogénicité
• dose infectieuse
• mode de transmission
• gamme d'hôtes
• disponibilité des mesures préventives
efficaces
• disponibilité des traitements efficaces
QUATRE GROUPES DE RISQUE SONT
DÉFINIS.
Groupe I : Agents biologiques non susceptibles de provoquer une maladie chez
l’homme, (La plupart des virus des plantes et les bactériophages)
•
Groupe II : Agents biologiques pouvant provoquer une maladie chez l’homme et
constituer un danger pour les travailleurs ; leur propagation dans la collectivité est peu
probable, il existe généralement une prophylaxie ou un traitement efficace, (Herpes
simplex, Influenza A, Virus respiratoire syncitial, Rougeole, HIV, Hépatites B et C)
•
Groupe III : Agents biologiques pouvant provoquer une maladie grave chez l’homme et
constituer un danger sérieux pour les travailleurs. Leur propagation dans la collectivité
est possible, mais il existe généralement une prophylaxie ou un traitement efficace,
(Encéphalite à tiques, Dengue, Hépatites B et C, Chikungunya, Influenza aviaire, HIV)
•
Groupe IV : Agents biologiques qui provoquent des maladies graves chez l’homme et
constituent un danger sérieux pour les travailleurs. Le risque de leur propagation dans
la collectivité est élevé, il n’existe généralement ni prophylaxie ni traitement (Lassa,
Ebola, Marburg, Crimée-Congo, Variole, Machupo, Hendra
Quelques exemples de CR des OP
CR3 CR4
CR1 CR2
CR 1 Non - - Nul*
CR 2 Oui impossible oui Faible
CR 3 grave Oui Oui Modéré
CR 4 grave élevée Non élevé
* Un organisme sans risque pour l’expérimentateur CR1 peut représenter un risque pour
l’environnement (perturbations écologiques: pollutions, atteintes de la biodiversité, ...)
Pour l’expérimentateur sain, 3 classes de risques possibles : de CR2 à CR4 pas de CR1,
car signifie pas de risque)
Niveau de risque en fonction des classes de risques
Biosécurité au Laboratoire et la notion de "Confinement".
Les locaux et les processus de mise en œuvre des mesures de
biosécurité adaptées aux organismes biologiques utilisés (OP et/ou
OGM) englobent:
Niveau de confinement L 1
• Espace confiné (limité)
• Facultatif: ESM I
• Inactivation chimique des déchets biologiques
(cultures de Coli K-12/S. Cerevisiae)
• Un autoclave doit être accessible sur le site
• Co-existence de plusieurs types d’activités
Description des Confinements
Niveau de confinement L2:
• doit posséder une EMS (Les enceintes de sécurité
microbiologique ) Les enceintes de sécurité de type I ou II
• le sigle « biohasard » doit être affiché sur les portes d’accès
• Le tablier de laboratoire ne quitte pas le local
• Les portes doivent être équipées d’un système de fermeture
automatique et doivent pouvoir être verrouillées en dehors des
périodes d’utilisation
• une affiche apposée sur les portes d’accès doit mentionner; les
coordonnées du responsable des opérations
• on réalise les centrifugations dans la zone confinée
• un autoclave doit être disponible dans le bâtiment
L2+ diagnostic d’OP de CR3; cultures de virus transformants
• Accès contrôlé
• Port de gants obligatoire
• Pipettes désinfectées avant de quitter l’ESM
• Centrifugations en godets fermés; ouverture des godets
sous hotte
• « Rien ne sort », sauf sous forme de déchets
Recommandé aussi:
- Evier à commande NON manuelle
- Contrôle strict des animaux potentiellement vecteurs des OP
- SAS; dépression
- Un autoclave dans le local
L3 - Caractéristique Générales
• Local en dépression (tout l’air passe par un filtre HEPA avant extraction); 2 SAS
d’accès; vitres de surveillance
• Autonomie électrique (10 h)
• Autonomie technique (centri, spectro,PC, Fax, ...)
• Éviers à commande NON manuelle; ne sont pas raccordés aux égouts
• Un autoclave à double-entrée dans le local
• Local qui peut-être rendu étanche, en cas de nécessité (désinfection par vapeur de
formol)
L3– Mesures de sécurité spécifiques:
• Rien ne sort du L3 sans inactivation/désinfection préalable
• Accès contrôlé (clé)
• Formation des utilisateurs
• Pas de vêtements de ville exposés (port d’une combinaison).
L3 - Mesures spécifiques:
• Port de charlotte, gants (2), masque et lunettes de protection OBLIGATOIRE
• Procédures d’entrée/sortie (conduites standardisées lors du passage dans les SAS)
• Mesure de sécurité en cas de malaise: « Règle des deux hommes »
• Contrôle médical obligatoire régulier
Confinement en L4
• Mesures L3, +
• Conditions d’accès étendues au bâtiment
• Port d’un scaphandre pourvu d’un respirateur
• ESM de type III
CR 1 Non - - Nul* L1
CR 2 Oui impossible oui Faible L2
CR 3 grave Oui Oui Modéré R&D Diag Eradic
L3 L2+ L4
CR 4 grave élevée Non élevé L4
Exemples aux FUNDP
1) Etudes portants sur Brucella spp. (wt): en L3
2) TP de Microbiologie: en L2
3) Cultures de virus pathogènes animaux: en L2
4) Cultures de virus et bactéries pathogènes humains: en L2
NB: L2-Q = L2 pour organismes de quarantaine
Gestion des risques biologiques
Equipements et pratiques de laboratoire mis en œuvre
pour prévenir et/ou gérer le risque
Equipements de confinement:
Poste de sécurité Microbiologique
Règles communes à tous les niveaux de
confinement
1. Adopter les bonnes pratiques de laboratoire en fonction du
niveau du confinement
- PRENDRE CONNAISSANCE du niveau confinement pour chaque de risque biologique
-DEFINIR UN MODE OPERATOIRE précis des niveaux de confinement
- • On ne s’applique pas de produits cosmétiques ou lentilles oculaires
- PIPETTAGE BUCCAL FORMELLEMENT INTERDIT
1. « sensibilité » de l’expérimentateur
(propagation de l’OP par inoculation >< aérosol)
barrière primaire (vêtements adaptés; enceintes microbiologiques)
2. Caractéristique de l’opération conduite
standardisée (routine)
• connaissance des BPM (Bonne Pratiques de Laboratoire)
• mode opératoire complet
• connaissance des méthodes
- de désinfection
- d’inactivation,
Savoir évaluer et gérer les facteurs de risques
biologiques
3. Nature de l’activité (diagnostic >< culture)
4. Sensibilité de l’environnement « proche »
(intra-muros) : barrière secondaire (équipement de sécurité) (Accès limité,
SAS+vestiaire, dépression),
Ethanol - ** ** - +/-
Hypochlorite * ** * * *
Formaldéhyde ** ** ** ** *
Peroxide * ** * * *
Combinaison ** ** ** ** **
(- hypochl, -
étanol, +
ammoniums
quaternaires)*
Inactivation par autoclavage 121°C, 20 min
NB: pour Prion, NaOH 1M ou AUTOCLAVAGE 134°C 18 min
EVITER TOUT RISQUE D’INGESTION:
• On ne mange pas, on ne boit pas
• On ne stocke pas des aliments