Formulasi Model Fluconazole Eye Drop dan Perbandingannya dengan
Tetes Mata Flukonazol yang Tersedia
 
Sunil  Thakral1  , Munish Ahuja2
1
 Akal College of Pharmacy and Technical Education, Sangrur,
India,  2 Departemen Ilmu Farmasi, Universitas Sains dan Teknologi
Guru Jambheshwar, Hisar, India
 
Abstrak
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk merumuskan formulasi model tetes mata flukonazol dan
kemudian membandingkannya dengan tetes mata yang tersedia. Studi permeasi kornea dilakukan
dengan menggunakan kornea domba yang baru diekstensi, dipasang di antara
donor dan reseptor. Sel reseptor memiliki volume internal 11 mL, yang mengandung ringer
bikarbonat (pH 7,4, 34±1 0 C). Pada interval yang disesuaikan 2 ml. sampel diambil dari lengan
samping dan dianalisis secara spektrofotometrik dengan mengukur absorbansi pada λmax 260
nm. Setiap percobaan dilanjutkan selama sekitar 2,0 jam (triplicate). Pada akhir
percobaan, setiap kornea (dibebaskan dari sklera) ditimbang, direndam dalam 1 mL. metanol,
dikeringkan semalaman di 90 ° C dan
reweighed. Dari perbedaan bobot hidrasi kornea dihitung. Meskipun, formulasi dipasarkan (Zoco
n) terdiri dari 0,3% w / v flukonazol dan formulasi model kami hanya mengandung 0,2% w / v
flukonazol, jumlah flukonazol meresap dari formulasi model dan formulasi mar-keted masing-
masing 78,34±4,26 dan 22,14±1,3. Permeasi dari formulasi model jauh lebih besar daripada
persiapan lain dan menunjukkan lebih sedikit hidrasi kornea (80,29±0,47) daripada persiapan
lain yang tersedia.
 
Kata kunci: Kerititis jamur, flukonazol, permeasi in vitro, hidrasi kornea, formulasi model
 
Formulasi Tetes Mata Fluconazole dan Perbandingannya dengan Tetes 
Mata Fluconazole di Pasaran
Abstrak
Penelitian ini bertujuan untuk melakukan formulasi tetes mata
flukonazol dan membandingkannya den- gan tetes mata yang beredar di pasaran. Studi permeasi
kornea dilakukan dengan menggunakan kornea biri-biri yang telah dikeluarkan, disatukan antara
donor dan reseptor. Sel reseptor memiliki volume internal 11 mL, mengandung ringer
bicarbonate (pH 7,4, 34±1 0C). Sampel diambil pada interval 2 mL sampel dari bagian lengan
bejana dan dianalisis menggunakan spektrofotometri dengan pengukuran absorbansi pada
λmax 260 nm. Percobaan dilanjutkan selama dua jam (triplikat). Pada akhir percobaan, setiap
kornea (dipisahkan dari sklera) ditimbang, direndam dalam metanol, dikeringkan pada suhu
90 0C dan ditimbang ulang, perbedaan berat dari hidrasi korena dihitung. Formulasi yang
dipasarkan (Zo- con) terdiri atas  0,3% w/v flukonazol sedangkan model formulasi dari
penelitian ini hanya mengandung 0,2% w/v flukonazol, jumlah flukonazol yang mengalami
permeasi dari model formulasi dan formu- lasi dipasarkan masing-masing sebesar
78,34±4,26 dan 22,14±1,3. Permeasi dari model formulasi lebih besar dibandingkan dengan
sediaan dan menunjukkan nilai hidrasi korneal lebih kecil (80,29±0,47) dibandingkan dengan
sediaan di pasaran.
 
 Kata kunci: Kerititis jamur, flukonazol, permeasi in vitro hidrasi kornea, formulasi model
 

Penulis yang sesuai:Sunil Thakral, M.Pharm., Akal College of Pharmacy

and Technical Education, Mastuana Sahib, Sangrur, Punjab,
India, email: [email protected]

 
Perkenalan
 
Fungal  eye  infections  are  rare.1  The  number of fungal infections has increased dramatica
l- ly, and those involving the eye pose a serious problem and treatment challenge to practi
cing physicians.2 Fungal keratitis is a major blind- ing eye disease in Asia.3 This disease i
s quite common in the tropics and with large agrarian population.4 Fungal keratitis  is a se
rious and painful corneal inflammation that results from infection by a fungal organism.5 
The symptoms of fungal keratitis are blurred vision; a red and painful eye that does not im
proves when con- tact lenses are removed, increased sensitivity to  light,  and  excessive  te
aring  or  discharge.4 A
presumptive  diagnosis  of  fungal  kerati- tis requires immediate empirical therapy.4 The a
ntifungal  agents  available  today  are  merely fungistatic, and require an intact immune sys
-
tem dan kursus terapeutik yang berkepanjangan. 3,6
Bistriazole antifungal sintetis com-pound fluconazole menunjukkan sifat physi-cal
dan pharmacokinetic yang luar biasa. Fluco-nazole adalah stabil, larut dalam air, bis-
triazole antijamur yang memiliki berat molekul rendah, bioavailabilitas tinggi,
penetrasi okular yang baik bila digunakan baik secara sistemik atau topikal, dan toksisitas
rendah. Hal ini berpotensi berguna sebagai agen OC-ular topikal. Hal ini cukup efektif
terhadap spesies candida. 7 Fluconazole mencegah sintesis ergosterol, komponen utama
membran plas-ma jamur, dengan menghambat sitokrom P-450- enzim lanosterol demeth-
ylase (juga disebut sebagai 14 α-sterol demeth-ylase atau P-450DM). Enzim ini juga
memainkan peran penting dalam sintesis kolesterol pada mamalia. 8
Untuk penyakit mata, admin-istration topikal biasanya lebih disukai
daripada ministrasi iklan sistemik untuk menghindari toksisitas sistemik, untuk onset
tindakan yang cepat, dan untuk mengurangi dosis yang diperlukan. Meskipun administra-
tion topikal menawarkan banyak keuntungan untuk mengobati gangguan struktur anterior
mata, ia menderita.

Kerugian serius dari bioavailabilitas  yang  buruk karena  beberapa faktor biologis, yang ex-ist
untuk melindungi mata dan akibatnya membatasi masuknya obat
 okular. Kondisi okular biasanya  diobati  dengan  pemberian topikal larutan obat yang diberikan
sebagai tetes mata ke dalam cul-de-sac yang lebih rendah. Bentuk dosis konvensional ini
menyumbang sekitar 90% dari formulasi
ophthalmic yang tersedia, terutama karena kesederhanaan dan kenyamanannya. 10
Drugs are commonly applied to the eye for a localized action. A major problem in
ocular therapeutics is the attachment of an optimal drug concentration at the site of action.
Poor bioavailability of drugs from ocular dosage forms is due to the precorneal loss
factors, physiological and anatomical constraints.11 Consequently, after instillation of eye
drops, typically less than 5% of an applied dose reach- es the intraocular tissues.12 This forces 
the cli- nician to recommend a frequent dosing at an extremely high concentration and pulse
type dosing results in several side effects of oph- thalmic products.9 Several mechanisms
such as a relatively impermeable corneal barrier and rapid drainage of the installed solution pr
otect to the eye. Drugs are mainly estimated from the precorneal lachrymal fluid by solution
drain- age, lacrimation and nonproductive absorption of the conjunctiva of the eye. These
factors and the corneal barrier limit the penetration of the topically administered drug into the 
eye.12
 
Metode
 
a. Bahan
Flukonazol diperoleh sebagai sampel hadiah dari pusat penelitian APL, Mandal
(A.P.). Beberapa persiapan yang dipasarkan dari tetes mata flukonazol seperti- Conflu
(East India Phar-maceutical Works Ltd., Kolkata), Kornea (Ahlcon Parenterals (India)
Ltd., Bhiwadi), Zocon (FDC Limited, Waluj) pro- sembuh dari apotek lokal Hisar,
India. Hidroksi propil metil selulosa-E-50 LV

 
Premium (HPMC) dibeli dari Loba Chemie Pvt. Ltd., Bombay. Natrium klorida,
kalium klorida, magnesium klorida, kalsium klorida, natrium bicar-bonate, natrium
dihidrogen ortofosfat dan manitol dibeli dari bahan kimia halus Quali-gens (Mumbai,
India). Semua bahan kimia lain yang dibeli adalah kelas analyti-cal dan digunakan seperti
yang diterima. Bola mata domba segar diperoleh dari toko daging lokal (Hisar,
India), dalam waktu setengah jam setelah penyembelihan hewan. Alat yang digunakan
dalam studi permeasi sama seperti yang diterbitkan di tempat lain. 13
 
b. Persiapan formulasi model
Efek dari formulasi yang berbeda param-eters pada permeasi kornea adalah charac-
terized dan formulasi model flu-conazole dikembangkan berdasarkan hasil sebelumnya. 14
Flukonazol - 0,2%
Benzil alkohol - 0,5%
HPMC - 1,0%
Manitol - 2,88% Penyangga fosfat (pH 6.0)  - q.s
 Formulasi model flukonazol disiapkan dengan melarutkan HPMC dalam penyangga phos-
phate, kemudian manitol ditambahkan dalam larutan ini dan kemudian flukonazol dan ben-
zyl alcohol dicampur dalam larutan di atas dengan gemetar terus menerus pada vortex
shaker, dan akhirnya volumenya dibuat menggunakan buffer fosfat.
 
c. Metode analisis
Solusi Stok
Secara akurat beratnya 25 mg flucon-azole dilarutkan dalam hingga 100 ml. air, Ringer
Bicarbonate (pH 7,4) dan Sorenson fosfat (pH 7,4) dalam 100 ml. termos volumetrik (Kelas
A) untuk memberikan larutan 250 μg / ml.
Solusi  Standar
Solusi  stok (250μg / ml) fluco-

nazole,  seperti  yang  disiapkan di  atas, di-luted untuk  memberikan  10,  25,
50,  100,  150,  200 dan 250  μg / ml dengan dilu-tion yang sesuai dengan air, Ringer
Bicarbonate (pH 7,4) dan Sorenson fosfat  (pH  7.4). Semua solusi dibuat dalam
triplicate. Persiapan kurva standar
Kurva standar disiapkan oleh mea- suring absorbance pada 260 nm (λmax) dari solusi
standar. Data yang diperoleh diplot, dan regresi dilakukan.
 
d. Studi permeasi transkorneal In Vitro15-17
Persiapan kornea
Seluruh bola mata domba diperoleh dari toko daging
lokal dalam waktu setengah jam setelah penyembelihan hewan, dan diangkut
ke laboratorium dengan garam normal dingin (4 ° C) (0,9%) segera. Kornea dengan
hati-hati dieksap bersama dengan 2-4 mm. jaringan skleral di sekitarnya dan dicuci
dengan garam normal dingin sampai bebas dari protein.
Eksperimen permeasi
Fresh cornea was mounted by sandwich- ing the surrounding scleral tissue
between clamped donor and receptor cells of
modi- fied version of Franz diffusion cell in such a way that its epithelial surface (apic
al) faced the donor compartment and endothelial sur- face faced to receptor
compartment. Cell was placed on magnetic stirrer in
holding position. The receptor compartment was filled with 11 ml. of freshly prepared 
bicar- bonate ringer solution (pH 7.4) and
stirred using Teflon coated magnetic stir bar. Drug solution (1 ml.) was placed to the
epithe- lial side of cornea in donor cell and stirring of  the  receptor  fluid  (jacketed  wi
th  water at 34±1°C) was started. At appropriated
in- tervals 2 ml. samples were withdrawn from the receptor compartment and
withdrawn sample volume was replaced with equal volume of fresh bicarbonate
ringer solu- tion to ensure sink conditions. Withdrawn

 
 
Sampel dianalisis menggunakan varian-Cary 5000 UV-VIS-NIR spektrofotometer
dengan mengukur absorbansi pada λmax. dengan 260
nm. Setiap percobaan  dilanjutkan  untuk sekitar
2.0 jam dan dilakukan setidaknya dalam perjalanan-licate.
Pada akhir percobaan, setiap kornea (dibebaskan dari sklera)  ditimbang, direndam
dalam  1  ml.  metanol,  dikeringkan semalam di 90
°C dan reweighed. Dari perbedaan bobot hidrasi kornea dihitung.

Perhitungan coef permeability yang jelas-

ficient
Koefisien permeabilitas yang jelas dihitung menggunakan persamaan berikut:
Papp.= ΔQ / Δt × 1 / (A.C0.60)
Di mana ΔQ / Δt (μg / menit)) adalah fluks di seluruh jaringan kornea,
A adalah luas permukaan jaringan kornea yang terbuka (0,786cm2), C0 adalah konsentrasi
obat awal (μg / ml.) di kompartemen donor dan 60 disertakan untuk mengkonversi menit
ke detik.

Hasil
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Gambar 
1 Permeasi  transkorneal  in  vitro  komparatif  flukonazol dari komersial

tetes mata
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Gambar 2 P
ermeasi transkorneal in vitro flukonazol dari tetes mata flukonazol model

 
Tabel 1 Permeasi kornea komparatif flukonazol dari tetes mata komersial
 

Tet P Tegangan  Visko % P Rela-  Titre  %

es m h permukaa sita   . tive  Value ( Hidras
ata n s (c P × PApp ml.) i Korn
(dyne/cm.) ps) e   ea
r 1
m 0
7
e
a (
s c
i m
./
k d
u e
m ti
u k
l )
a
t
i
f
*
        60 90 120        
Conflu 4 37.09±1.21 6 1.042 6 10. 611. 13.0 7.78 0.92 4.6 83.24±0
. ±0.3 03±1 13±1 5±2. ±1.1 ,93
0 .1 .14 10 7
Kornea 6 40.94±1.38 1.038±0 9.91 12.2 14.06 8.50 1.00 0.358 83.05±1
. .34 ±0.9 5±1. ±1.05 ±0.7 .49
1 1 06 3
Zocon 6 34.29±2,89 1.026±0 11.6 13.2 16.37 9.05 1.06 0.316 82.41±0
. .22 7±1. 9±1. ±1.70 ±1.0 .21
0 52 75 6
 
 
App
 
 
 
 
 
 
 
 
 
* Nilai adalah mean±S.D. (n = 3).
 
 

Tabel 2 Permeasi kornea komparatif flukonazol dari tetes mata komersial

T   sion ( (c Ps Hidras
et dyne/cm. ps ere i Korne
es ) ) mc a
e )
at
io
n
*
        60 90 12  
0
P 6 40.42±0.0 8.38 53.32±5.31 78.34 80.29±0,47
ol . 7 ±0.2 67.092±5,15 ±4.26
a 0 5 7.09±
0.37†
Z 6 34.29±2,8 1.026 14.53±1.94 22.14 82.04±0,82
oc . 9 ±0.21 17.62±1.44 ±1.35
o 0 1.31±
n 0.08
 
 
 Mata

permukaan pH sepuluh-

Viskositas

% kumulatif

PApp

.× 106 (cm./ %
 
 
 
 
 
 
 

*  Nilai  adalah mean±S.D.  (n = 3). †  Berbeda

secara  signifikan  (p  <  0,05)  dibandingkan  dengan  kontrol  yang  ditentukan oleh tes t
berpasangan

 
Fluks di kornea ditentukan dari slop garis regresi yang diperoleh dari bagian linier
kurva antara jumlah kumulatif meresap (Q) vs waktu (t) plot.
Analisis statistik
Perhitungan statistik dilakukan dengan analisis  satu  arah varians (ANO-VA)
diikuti oleh tes Dunnett. Nilai  p <0,05 dianggap signifikan.
 
Diskusi
 
Table 1 and Figure 1 compare the marketed eye drops. The results of in vitro corneal
per- meation study show that the permeation
of fluconazole from various marketed formu- lations follows the order Zocon > Corneal
> Conflu. However no significant difference was observed between the apparent
corneal permeability of different marketed
formula- tions. The normal cornea has a hydration level of 75-80%. The maximum
corneal
hydration level attainable without producing irreversible damage to tissue is 83%. All the 
marketed for- mulations had a corneal hydration of > 82 %, suggesting slight corneal
damaging potential. Table 2 and Figure 2 showing the comparison of the corneal
permeation of model and mar- keted fluconazole eye drops. Eventhough, the marketed
formulation (Zocon) comprised of 0.3% w/v of fluconazole and our model for- mulation
contained only 0.2% w/v of fluco- nazole, the amount of fluconazole
permeated from model formulation was much greater than the marketed formulation. The 
model for- mulation was prepared using some other addi- tives which were proved to enh
ance the invitro corneal permeation.
Hasilnya menunjukkan permeasi flukonazol yang jauh lebih tinggi dari model
untuk mulasi yang dikembangkan di laboratorium kami sebagai com-pared ke formulasi
dipasarkan. Menghasilkan kerusakan ireversibel pada jaringan adalah
83%. Semua formulasi  yang  dipasarkan  memiliki  hydra kornea-

tion >82%, menunjukkan sedikit potensi penuaan bendungan kornea.

 Tabel 2 dan Gambar 2 menunjukkan compari-anak dari permeasi kornea model dan tetes
mata flukonazol dipasarkan.
Meskipun demikian, formulasi yang dipasarkan (Zocon) terdiri dari 0,3% w / v flukonazol
dan formulasi model kami hanya mengandung 0,2% w / v flukonazol, jumlah flu-
conazole yang meresap dari formulasi model jauh lebih besar daripada formula-tion yang
dipasarkan. Formulasi model disiapkan kami - ing beberapa aditif lain yang
terbukti meningkatkan permeasi kornea invitro.
Hasilnya menunjukkan permeasi flukonazol yang jauh lebih tinggi dari model
untuk mulasi yang dikembangkan di laboratorium kami sebagai com-pared ke formulasi
dipasarkan.
 
Kesimpulan
 
Dalam beberapa tahun terakhir, penyelidikan eksklusif telah didedikasikan untuk
memperpanjang waktu retensi obat di permukaan mata dan untuk peningkatan penetrasi
transkorneal agen terapi tradisional dan baru. Dengan menggunakan polimer kita dapat
meningkatkan waktu resi-dential dan dengan menggunakan permeasi enhanc-ers dan
beberapa aditif lain yang mempengaruhi permeasi cor-neal kita juga dapat meningkatkan
permeasi kornea in vitro.
Berdasarkan studi permeasi transkorneal, bentuk dosis optimal yang mengandung
flukonazol (0,2% w / v) dalam phos-phate Sorenson (0,0667 M, pH 6,0) buffered vehicle,
manitol (2,88%), benzyl alcohol (0,5% w / v), hydroxyl propyl methyl cellulose (1,0% w /
v) diformulasikan. Pada perbandingan permeasi flucon-azole dari
model yang  dioptimalkan  untuk  mulasi dengan penurunan  mata yang dipasarkan (Zocon,
F.D.C. Limited) melalui kornea domba berpasangan, peningkatan yang signifikan dari
permeasi kornea in vitro dari formulasi model disajikan secara ob. Dengan meningkatkan
invitro kornea per-meation  dosing  frekuensi  tetes mata dapat

Jurnal Farmasi Klinik Indonesia Volume 1, Nomor 1, Maret 2012

 
dikurangi  dan  konsentrasi  bahan aktif juga dapat dikurangi dengan hasil yang lebih
baik. Namun,  penyelidikan  lebih lanjut  dalam  model  in  vivo diperlukan untuk menilai
bioavailabilitas ocu-lar dari formulasi model yang dioptimalkan secara in vitro.
 
Pengakuan
 
 Para penulis berterima kasih kepada Profesor dan kepala Departemen dan Pustakawan Depart-
ment of Pharmaceutical Sciences, Guru Jamb-hswar University of Science and Technology,
Hissar, Haryana, karena menyediakan fasilitas laboratorium dan perpustakaan.
 
Referensi
 
1. Niţulescu C. Keratitis jamur: pendekatan diagnostik dan terapeutik. Oftalmologia, 2006,
50(4): 33–38.
2. Tu Ey. Alternaria keratitis: pra-sentasi klinis dan resolusi dengan topikal flu-conazole atau
intrastromal voriconazole dan caspofungin topikal. 2009, 28(1): 116–119.
3. Srinivasan M. Jamur Keratitis. Opini saat ini di Ophthalmology, 2004, 15(4): 321–327.
4. Jamur Keratitis. Tersedia di: http:// en.wikipedia.org/wiki/Fungal_keratitis. Terlihat
pada tanggal 25 Januari
5. Cantu-Dibildox J, Alfonso EC. Keratitis jamur: faktor risiko, diagnosis dan pengobatan efec-
tive. Tinjauan ahli dari. Ophthal-mology, 2007, 2(4): 597–602.
6. Thomas PA. Infeksi jamur pada cor-nea. Mata, 2003, 17(8): 852–862.
7. Thiel1 MA, Zinkernagel AS, Burhenne J,

Kaufmann1 C, Haefeli WE.

Voriconazole concentration in human aqueous humor and plasma during topical or c
ombined topical and systemic administration for fungal keratitis. Antimicrobial
Agents and Chemotheraphy. 2007, 51(1): 239–244.
8. Tay ET. Azole Antifungal Agents. Pediat- rics in Review. 2005, 26(1): 20–21.
9. Kaur  IP,  Garg  A,  Singla  AK,  Aggarwal
D. Vesicular system in ocular drug deliv- ery: an overview. International Journal
of Pharmaceutics, 2004, 269: 1–14.
10. Alany RG, Rades T, Nicoll J, Tucker
IG, Davies NM. W/O microemulsions for ocu- lar delivery: Evaluation of ocular irrit
ation and precorneal retention. Journal of Con- trolled Release, 2006, 111(1–2): 145–
152.
11. Patel PB, Shastri DH, Shelat PK,
Shukla AK. Ophthalmic drug delivery system: challenges and approaches. Systemati
c Review in Pharmacy, 2010, 1(1): 113–120.
12. Koevary SB. Pharmacokinetics of
topical ocular drug delivery: potential uses for the treatment of diseases of the
posterior seg- ment and beyond. Current Drug Metabo- lism. 2003, 4(3): 213–222.
13. Malhotra M, Majumdar DK. Effect of preservative, antioxidant and
viscolizing agents on in vitro transcorneal permeation of ketorolac tromethamine.
Indian Jour- nal of Experimental Biology, 2002, 40(5): 555–559.
14. Thakral S, Ahuja M. Effect of formulation factors on In vitro corneal permeation
of fluconazole thorugh excised sheep cornea. African Journal of Pharmaceutical Scie
nc- es and Pharmacy, 2011, 1: 91–103.