Tissue Processsing

Unduh sebagai pptx, pdf, atau txt
Unduh sebagai pptx, pdf, atau txt
Anda di halaman 1dari 19

PAT O L O G I A N AT O M I

KELOMPOK 6

1 . Ay u l H i z b a i n i
2 . A u v a H a r f i
3 . M . Z h o r i f A d i W i n a t a
4 . N a b i l a h B r i l i a n i t a P
5 . Tr i I n d a n g Wa h y u n i n g s i h
PAT O L O G I
A N AT O M I
Spesialisasi medis yang berurusan dengan
diagnosis penyakit berdasarkan pada pemeriksaan
kasar, mikroskopik, dan molekuler atas organ,
jaringan, dan sel.
Patologi anatomi mendiagnosis penyakit
dan memperoleh informasi yang berguna secara
PATO L O G I klinis melalui pemeriksaan jaringan dan sel, yang
A N ATO M I umumnya melibatkan pemeriksaan visual kasar dan
YA I T U … mikroskopik pada jaringan, dengan pengecatan
khusus dan imunohistokimia yang dimanfaatkan
untuk memvisualisasikan protein khusus dan zat lain
di sekeliling sel. Kini, patologi anatomi mulai
mempergunakan biologi molekuler untuk
memperoleh informasi klinis tambahan dari
spesimen yang sama.
PROSEDUR DALAM PATOLOGI
ANATOMI

PEMERIKSAAN KASAR HISTOPATOLOGI

 Merupakan pemeriksaan jaringan  Merupakan pemeriksaan mikroskopik


yang sakit dengan mata telanjang, pada salah satu jaringan yang dicat
khususnya penting bagi fragmen memakai teknik histologis. Cat standar
jaringan yang besar, sebab penyakit ialah hematoksilin serta eosin, tetapi
itu sering bisa dikenali dengan cara lainnya juga ada. Dalam pemakian
visual. Pada tingkat tersebut jumlah keca mokrosop yang dicar dengan
patolog memilih daerah yang akan memakai hematoksilin serta eosin
diperiksa sebagai histopatologi. sebagai penyedia diagnosis spesifik
Terkadang mata bisa diberi dengan berdasarkan pada morfologi
seryakanta atau mikroskop stereo, dianggap sebagai keahlian inti patologi
umumnya saat memeriksa anatomi. Ilmu yang mempelajari
organisme parasit. pencatatan pada bagian jaringan yakni
histokimia.
4
LANJUTAN

IMUNOHISTOKIMIA HIBRIDISASI IN SITU

 Merupakan pemeriksaan yang  Merupakan molekul DNA serta RNA


memakai antibodi sebagai deteksi spesifik bisa dikenali pada bagian yang
keberadaan, lokalisasi dan memakai teknik ini. Jika probe dilebeli
keberlimpahan protein spesifik. dengan celupan berpendar, teknik
Teknik tersebut sangat penting tersebut adalah FISH.
sebagai pembeda antara gangguan
dengan morfologi yang hampir
sama dan juga mencirikan sifat
molekuler kanker tertentu.

5
IMUNOFENOTIPE
ARUS
Merupakan penentuan imunofenotipe
sel memakai teknik sitometri arus.
L A N J U TA N Sangat bermanfaat bagi
mendiagnosis jenis-jenis leukemia dan
limfoma yang berbeda.
3 4
SITOLOGI SITOGENET IKA
Merupakan
JARINGAN
pemeriksaan sel-sel
Merupakan visualisasi
lepas yang dicat
kromosom sebagai pengenal
pada kaca yang
cacat genetik yakni
memakai teknik 1 2 translokasi kromosom.
sitologi. MIKROSKOPI
ELEKT RON
Merupakan pemeriksaan jaringan dengan memakai
mikroskop elektron, yang dapat memungkinkan
pembesaran yang jauh lebih besar, menungkinkan
visualisasi organel dalam sel.
A U T O M AT I C
TISSUE
PROCESSOR
TIPE Leica TP
1050
Automatic Tissue
Processor adalah alat
untuk proses pengolahan
jaringan pada kegiatan
Histoteknik (proses untuk
membuat sajian histologi)
yang telah dipotong dan
telah melalui tahap
proses kimiawi yaitu
Fiksasi (Fixation), Fungsinya :
Pemeriksaan Kotor (Gross
Examination), dan Untuk mengolah jaringan agar
kemudian dilakukan proses mikrotom bisa dilakukan
Pengolahan Jaringan secara sempurna.
(Tis s ue Proc es s ing).
5TAHAPAN PEMROSESAN
JARINGAN
Proses menjaga atau memperbaiki jaringan dengan melewati sampel melalui
bahan kimia yang disebut fiksatif . Fiksatif akan membantu melindungi
FIXAT ION
jaringan dari pembusukan dan autolisis. Fiksatif rutin penggunaan adalah
formalin 10%
Proses menghilangkan molekul air dari jaringan dengan melewatkan
DEHIDRASI jaringan melalui alkohol yang naik. Misalnya metanol, aseton, 70-100%
alkohol.

Proses menghilangkan alkohol dari jaringan dengan melewatkannya


melalui bahan kimia yang akan menghilangkan molekul alkohol. Agen-
CLEARING agen ini disebut agen kliring . Xylene sebagian besar digunakan untuk
pembersihan.

Proses mengisi ruang intraseluler yang tertinggal di jaringan oleh lilin


INFILT RASI parafin. Ini akan membantu memberi sedikit kekakuan pada jaringan
yang diproses.

Langkah terakhir ini dilakukan secara manual . Ini ada hubungannya


EMBEDDING dengan merendam jaringan yang diproses ke dalam cetakan yang
mengandung lilin parafin cair. Ini untuk dukungan eksternal agar
jaringan tidak hancur selama mikrotomi.
PRINSIP KERJA
• Ketika waktu infiltrasi untuk stasiun tertentu
•K e r a n j a n g j a r i n g a n b e r o s i l a s i terlampaui, pesan peringatan akan ditampilkan,
naik dan turun di setiap
stasiun dengan interval tiga menunjukkan nomor stasiun dan waktu
detik untuk memastikan berlebih. Kontrol diatur oleh fungsionalitas
pencampuran yang menyeluruh dengan LCD untuk menunjukkan parameter
dan merata dari reagen dan
infiltrasi jaringan yang operasional. Tutup wadah reagen memiliki
optimal. segel untuk meminimalkan paparan operator
terhadap uap berbahaya.
•W a k t u infiltrasi dapat
diprogram secara terpisah •Keranjang tisu segera terbenam di stasiun jika
untuk setiap stasiun. Hingga listrik mati untuk melindungi sampel agar tidak
sembilan program dapat
dijalankan dengan waktu mulai mengering. Ketika daya pulih, program akan
langsung atau tertunda. dilanjutkan. Jika terjadi kegagalan daya jangka
panjang, lilin dicairkan. Kapasitas keranjang
•K e t i k a t i b a s a a t n y a j a r i n g a n
ditransfer ke gelas atau guci tisu adalah 80 kaset.
berikutnya, tutup mesin •Konfigurasi vakum mempercepat infiltrasi,
diangkat, dan mekanisme
pengangkatan dengan hati-hati memungkinkan tekanan diterapkan ke stasiun
mengangkat keranjang tisu apa pun baik dalam operasi manual atau
dan dengan lembut otomatis. Konfigurasi kontrol asap
memindahkannya ke gelas
berikutnya. mengeluarkan asap dengan kipas dan
meneruskannya melalui filter karbon internal.
Waktu Yang Dibutuhkan

Beaker I – fixative (formalin) 1-2 hours


Beaker II – fixative 1 hour
Beaker III – fixative. 30- 45 minutes
Beaker IV – 70% alcohol. 30 minutes
Faktor yang mempengaruhi
Beaker V – 90% alcohol. 30 minutes
lamanya pemrosesan
Beaker VI – Absolute alcohol. 1 hour
jaringan yaitu :
Beaker VII – Absolute alcohol. 1 hour
1. Ukuran Jaringan
Beaker VIII – Methanol 30 minutes
2. Sifat dan Jenis Jaringan
Beaker IX – Xylene. 1-2 hours
Beaker X – Xylene 45 minutes – 1 hour
Wax bath I (done at 45°c) 2 hours
Wax bath II. 2 hours
BAGIAN-BAGIAN

Gelas Isolasi
Untuk menaruh sample yang sudah diletakan di kaset
jaringan.

Gelas Kaca, T hermos, dan Gelas Parafin


Terdiri dari 10 gelas kaca, berfungsi untuk meletakan
sample berupa cairan. Terdapat 2 thermos yang dapat
dikendalikan suhunya. Terdapat gelas yang dilapisi untuk
lilin parafin.

Kaset Jaringan
Untuk meletakan sampel. Kaset jaringan ini dimasukkan
ke gelas jaringan berosilasi sebelum difiksasi.

12
BAGIAN-BAGIAN

Rotor
Terdapat rotor listrik di dasarnya.

Timer dan Alarm


Berfungsi untuk menandakan bahwa proses jaringan
telah berakhir.

Display dan Tombol Menu


Berfungsi untuk mengatur proses jaringan

13
1. Sebelum memulai, bacalah lembar data keselamatan
untuk mengindentifikasi sifat-sifat, tindakan pencegahan
keselamatan dan penanganan yang tepat dari reagen.
2. Pastikan tempat untuk mencuci tangan dan mata tersedia
dan berfungsi dengan baik. Dan pastikan kotak p3k
tersedia
3. Baca manual operasional dari tissue processing
4. Gunakan jas lab dan sarung tangan dan dikacing
Standar 5. Pastikan tissue processing bekerja dan terhubung dengan
Operasional baik. Kemudian, nyalakan dengan menekan swith on,
biarkan alat selalu menyala karena lilin paraffin harus
Prosedur tetap meleleh
6. Siapkan formalin sesuai kebutuhan, neo clear solution dan
etanol 70%, 90% dan 100% dalam wadah, selalu gunakan
kacamata pengaman selama menyiapkan larutan
7. Angkat carousel cover dengan menekan kontrol button.
Kemudian, angkat wadah reagen dan isi setiap wadah
dengan larutan kimia yg sesuai dengan yg tertera sesuai
dengan label yg ada. Tidak boleh melebihin batas
maksimal atau kurang dari batas minimal ketika pengisian
(sekitar 1.6-1.8 per larutan)
15

8. Pastikan lilin benar-benar meleleh sebelum


memproses jaringan, karena lilin perlu beberapa
jam untuk meleleh
9. Pastikan jaringan dalam kaset jaringan dan
letakan di gelas isolasi, dan kemudian turunkan
carousel cover
10. Ikuti instruksi dan atur program yang
menunjukan waktu pemrosesan untuk setiap
langkah
11. Pastikan program benar kemudian tekan start
untuk memulai program
12. Ketika proses sudah selesai, angkat carousel
cover dan keluarkan gelas isolasi secara hati
hari dan ambil kaset jaringan dan letakan kaset
di baki dari mesin embedding jaringan. Dan
letakkan kembali gelas isolasi ketempatnya dan
tutup caraousel cover.
13. Bersihkan alat setelah digunakan
K E L E B I H A N A U T O M AT I C T I S S U E
P R O C E S S O R

Mesin melakukan
Sangat efisien transfer jaringan dari
satu bak ke bak
lainnya. Sebelumnya,
ini tidak mungkin

Dapat memproses
jaringan yang
berbeda secara
bersamaan

Menghemat Hemat biaya dan


waktu dan ramah pengguna
energi untuk
beroperasi
Troubleshooting
Masalah Penyebab Solusi
Jaringan terasa lunak atau 1. Jaringan mungkin terlalu 1. Proses ulang jaringan
lembek saat proses tissue kotor pada program yang tepat
embeding 2. Jaringan mungkin telah 2. Proses ulang jaringan
diproses pada program pada protokol pemrosesan
yang terlalu pendek untuk yang benar
jenis jaringan tersebut 3. Proses ulang jaringan
3. Pemrosesan reagen dapat pada program yang tepat
saturated dengan air
Jaringan memantul keluar dari Dehidrasi dan infiltrasi parafin Ubah reagen dan proses ulang
blok parafin selama mikrotomi yang buruk karena air yang jaringan pada protokol
atau jaringan tidak melekat tersisa di jaringan pemrosesan yang tepat
pada blok atau slide
Jaringan terlihat berminyak dan 1. Jika suhu air antara 45-50 1. Proses ulang jaringan
"meledak" atau berpisah ° C, maka jaringannya pada program yang tepat
dengan cepat ketika diletakkan kurang diproses 2. Proses ulang jaringan
di bak air 2. Jaringan mungkin terlalu pada program yang tepat
koto
Jaringan tidak melekat dengan Reagent saturasi/jenuh dengan Ubah reagen dan parafin dan
mudah atau mudah jatuh air atau terkontaminasi dengan proses ulang jaringan pada
reagen sebelumnya protokol pemrosesan yang
tepat
Bagian jaringan bernoda Jika jaringan diperbaiki dengan Ubah reagen dan proses ulang
Hematoxylin dan eosin (H&E) benar, maka sampel jaringan pada protokol
menunjukkan pewarnaan nuklir mengalami dehidrasi dan pemrosesan yang tepat
yang tidak merata dan infiltrasi dengan parafin yang
"gumpalan biru" tidak memiliki tidak benar
pola kromatin yang berbeda.
TERIMA KASIH

Anda mungkin juga menyukai