Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)
CAIR KINERJA
TINGGI (KCKT)
Oleh :
Destya Hapsari Saputri
Nana Rodiana
Sri Yuliani Rahayu
PENDAHULUAN
Kromatografi adalah suatu istilah umum yang
digunakan untuk bermacam-macam teknik
pemisahan yang didasarkan atas partisi sampel
diantara suatu fasa gerak yang bisa berupa gas
ataupun cair dan fasa diam yang juga bisa berupa
cairan ataupun suatu padatan.
SEJARAH
Penemu : Tsweet (1903), mencoba memisahkan
pigmen-pigmen dari daun dengan menggunakan
suatu kolom yang berisi kapur (CaSO4)
Pada akhir tahun 1960 an, semakin banyak usaha
dilakukan untuk pengembangan kromatografi cair
sebagai suatu teknik mengimbangi kromatografi
gas. High Performance Liquid Chromatography
(HPLC) atau Kromatografi Cair Penampilan Tinggi
atau High Preformance = Tekanan atau Kinerja
Tinggi, High Speed = Kecepatan Tinggi dan
Modern telah berhasil dikembangkan dari usaha ini
PENGERTIAN KCKT
Pompa (Pump)
Fase gerak dalam KCKT => cairan yang bergerak
melalui kolom.
Tipe pompa yang digunakan :
a. Kinerja konstan (constant pressure)
b. Pemindahan konstan (constant displacement)
Pemindahan konstan dapat dibagi menjadi dua:
>pompa reciprocating
>pompa syringe.
KOMPONEN-KOMPONEN KCKT
Injektor (injector)
Sampel yang akan dimasukkan ke bagian ujung
kolom, harus dengan disturbansi yang minimum
dari material kolom. Ada dua model umum :
a. Stopped Flow
b. Solvent Flowing
Tipe dasar injektor yang dapat digunakan :
a. Stop-Flow
b. Septum
c. Loop Valve
KOMPONEN-KOMPONEN KCKT
Kolom (Column)
Kolom dapat dibagi menjadi dua kelompok :
a. Kolom analitik
b. Kolom preparatif
Kolom umumnya dibuat dari stainless steel dan
biasanya dioperasikan pada temperatur kamar,
tetapi bisa juga digunakan temperatur lebih tinggi,
terutama untuk kromatografi penukar ion dan
kromatografi eksklusi.
KOMPONEN-KOMPONEN KCKT
Detektor (Detector)
Fungsi detektor : untuk mendeteksi adanya
komponen sampel di dalam kolom (analisis
kualitatif) dan menghitung kadarnya (analisis
kuantitatif)
Detektor KCKT yang umum digunakan adalah
detektor UV 254 nm. Variabel panjang gelombang
dapat digunakan untuk mendeteksi banyak
senyawa dengan range yang lebih luas.
KOMPONEN-KOMPONEN KCKT