Este documento descreve os procedimentos para preparar um meio de cultura com caldo verde brilhante para identificar microrganismos em amostras de água. Inclui os materiais necessários, como balança analítica e autoclave, e os passos para pesar e dissolver o verde brilhante, esterilizar o meio, inocular amostras de água e incubar por 48 horas para identificação.
Este documento descreve os procedimentos para preparar um meio de cultura com caldo verde brilhante para identificar microrganismos em amostras de água. Inclui os materiais necessários, como balança analítica e autoclave, e os passos para pesar e dissolver o verde brilhante, esterilizar o meio, inocular amostras de água e incubar por 48 horas para identificação.
Este documento descreve os procedimentos para preparar um meio de cultura com caldo verde brilhante para identificar microrganismos em amostras de água. Inclui os materiais necessários, como balança analítica e autoclave, e os passos para pesar e dissolver o verde brilhante, esterilizar o meio, inocular amostras de água e incubar por 48 horas para identificação.
Este documento descreve os procedimentos para preparar um meio de cultura com caldo verde brilhante para identificar microrganismos em amostras de água. Inclui os materiais necessários, como balança analítica e autoclave, e os passos para pesar e dissolver o verde brilhante, esterilizar o meio, inocular amostras de água e incubar por 48 horas para identificação.
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ROTEIRO DE PRTICA LABORATORIAL
EXPERIMENTO: PREPARAO DE UM MEIO DE CULTURA COM CALDO
VERDE BRILHANTE PARA IDENTIFICAO DE MICROORGANISMOS EM AMOSTRAS DE GUA
1- INTRODUO Meios de cultura so frequentemente utilizados em laboratrios. Sua finalidade fornecer nutrientes para o cultivo de microorganismos. Com o desenvolvimento da bactria, possvel identific-la atravs do uso de meios de cultura seletivos. Meios de cultura com essa especificao inibem o desenvolvimento de alguns grupos de microorganismos e permite assim, o crescimento de outros. Um exemplo disso o caldo verde brilhante que usado para o isolamento da Salmonella. um meio seletivo para deteco de coliformes e coliformes fecais em leite, produtos lacticnios e em outros alimentos. Caldo bile verde brilhante 2% Finalidade de uso: recomendado para a confirmao de testes presuntivos para organismos coliformes em anlises bacteriolgicas de gua, alimentos, leite e lacticnios. Composio em g/L: Digesto pptica de tecido animal: 10.00 Bile de boi: 20.00 Lactose: 10.00 Verde Brilhante: 0.0133 pH final (a 25C): 7.2 +/- 0.2
2- MATERIAIS Para execuo do experimento os devidos instrumentos sero necessrios: 1- Balo de fundo chato 2- Tubos de ensaio 3- Banho- Maria 4- Balana analtica 5- Autoclave 6- Caldo bile verde brilhante 2% 7- gua destilada
3- MTODOS Preparo do meio de cultura: Seguindo as especificaes das instrues de uso, a referncia na pesagem est de acordo com o volume do solvente a ser adicionado na dissoluo. O padro indicado 40g de verde brilhante para 1000ml de gua, qualquer variao nos valores massa/volume devem ser proporcionais. Aps pesagem do verde-brilhante na balana analtica, deve-se transferir o contedo para o balo de fundo chato. A substncia deve ser dissolvida adicionando gua destilada em volume cuja proporcionalidade est definida por padro. A seguir o material deve ferver em banho-maria para dissolver totalmente o verde brilhante e evitar a permanncia de grnulos. Preparo para esterilizao (Autoclave) Aps aquecimento, distribuir a soluo em tubos de ensaio e isolar o meio de cultura do ambiente tampando os tubos e o que sobrou no balo de fundo chato. Levar o material a autoclave para esterilizao. Autoclavao: realizada em autoclaves (aparelhos que utilizam vapor saturado sob presso). Ao esterilizante. Causa a morte por promover a desnaturao das protenas que constituem os microrganismos. - Condies para esterilizao: 121 C por 15 a 30 minutos a 1 atmosfera a mais de presso. Inoculao das amostras de gua Ao concluir essa etapa, esperar alguns instantes para os tubos esfriarem, depois, coletar amostras de gua em diversas fontes para inoculao nos tubos (deve ser feito em triplicata para cada amostra). Em cada tubo adiciona-se 1ml de amostra. No inocular a cultura no balo de fundo chato. Levar todo o material para a estufa e deixar por um perodo de 48 horas. Ao trmino desse perodo observar os meios de cultura e anotar os resultados
12 - Manual Do Ibama - Parte D Avaliação Da Toxicidade de Agentes Químicos para Microrga-Nismos, Microcrustáceos, Peixes, Algas, Organismos Do Solo, Aves Animais Silvestres e Plantas